血清数据库
Ⅰ 血清中细胞因子可不可以用western来检测
理论上可以,但前提是你待测的细胞因子一定是一种蛋白质。
Western Blotting中文名称是蛋白质免疫印迹法,是将蛋白质通过电泳分离,然后再通过电泳转膜印迹在PVDF膜上,用抗体标记之后再曝光于胶片上。因此只要是蛋白质,而且能买到相应的抗体,就能通过Western Blotting来检测。
我看过一篇文献,文章名为:Western Blotting测定血清抗组蛋白亚成份抗体。你从数据库下载看看吧,也许有帮助。需要的话QQ联系:806054703。
Ⅱ 数据库在医学上有哪些应用
医学类核心期刊一般都对论文有比较高的要求,什么样的论文可以快速的发表在医学核心期刊上呢?下面·创新医学网·来介绍核心期刊发表医学论文的条件。
1.2 收稿 接收国内外稿件,欢迎先进X(创新)、科学X(设计合理、数据可靠和统计方法正确)、实用X(对科研、临床等有指导意义)及可读X强的文章. 文稿应表达准确,重点突出,文字简练. 研究原着及文献综述约5000字, 研究快报、经验交流约1200字. 采用A4纸隔行打印. 简化汉字按1986-10-10国务院批准重新公布的《简化字总表》书写.
1.3 术语 应规范,前后统一, 如原词过长且多次出现者, 可于首次出现简称时写出全称加括号, 以后直接用简称. 医学名词以《医学名词》系列(全国自然科学名词审定委员会公布)、 药名以《中华人民共和国药典》为准. 新译名词应附外文. 公认通用缩略语可直接应用. 如ACTH, DNA, LD50, HBsAg, ATP, RIA,ELISA,PCR,ECG, IJJ等. 基因符号一律用斜体字符表示, 如ras, myc, ced等;基因产物如蛋白质,常用相应的基因符号命名,一律用正体字符表达,如Ras, Myc, Ced蛋白等.
1.4单位 采用法定计量单位. 红细胞、 白细胞等用“/L”; 血压、 眼压、 脑脊液压、 血液气体分压等用mmHg或cmH2O(首次出现时应在后面括号内注明1 mmHg=0.133 kPa); M(克分子), N(当量)改用mol/L; 血中血红蛋白、 总蛋白、 白蛋白、 球蛋白、 脂蛋白、 总脂用“g/L”, 免疫球蛋白用mg/L. 血钾、 葡萄糖、 尿素氮、 胆固醇、三酰甘油用mmol/L. 胆红素、 铁、 肌酐等用μmol/L; 肾上腺素、 孕酮、 雌二醇等用nmol/L; 胰岛素、 ACTH等用pmol/L. “分子量”应称相对分子质量(Mr), 不需单位. 酶的催化活X:量符号z,单位kat (1 kat=1 mol/s);质量催化活X(也称比催化活X):量符号z/m,单位kat/kg; 催化活X浓度, 量符号b, 单位kat/L; 1 U=16.67 nkat. 1秒, 1 s; 2分钟, 2 min; 3小时, 3 h; 4天, 4 d; 5周, 5 wk; 6月, 6 mo; 8年, 8 a等. 离心力g或r/min (>8000 r/min时用“g”). 数字和单位间留适当空隙, 如4 mg, 不应写4mg. 注意大小写和上下角标, 如mL不应写ML. 缩略语cpm (counts per minute)不是单位, 应改用Bq. 方法: cpm鱁%(通常为60%,指仪器效率)=dpm(一个核衰变数); dpm?0=dps; 1 dps=1 Bq. pH不应写为PH. 万位以上数字, 每3位空1/2字符, 不用千分撇, 如14 861, 不写成14,861.
单位符号正体,通常小写,如m,g,s,min,d,wk,mo,a,但来自人名者,首字母大写,如Pa,Hz,Bq,N,V,A,Gy;另外,升采用大写L,如mL,μL,nL. 十进位词头,千以下为小写,兆以上为大写,一律用正体,如kg为千克,mg为毫克,而Mg则为兆克. 中文句中的外文, 除专用词或句首外一律小写.
废除百分浓度,应采用量浓度(c),如血钾3.5 mmol/L;或质量浓度(ρ),如AFP<20 μg/L;此外,体积分数(φ)和体积浓度(σ),如:95%酒精改为950 mL/L乙醇;10%福尔马林改为40 g/L甲醛;5% CO2改为50 mL/L CO2等. ppm,bpm应废除. 质量分数w可采用ng/g, mg/g, g/kg. 数分数(χ, number fraction)单位是1, 多采用0.00表示, 如中X粒细胞为0.70(不用70%), CD4 细胞为0.58(不用58%)等.
1.5 斜体 需排斜体字的外文, 如生物的属名和种名Ilex pubescens Hook et Arn. var. glabes Chang, 常数K. 西文拼写的作者姓名,如HUANG Liang-Tian. 量符号如m(质量),t(时间、温度),c(量浓度),p(压力),A,S(面积),V(体积),l,L(长度),v(速度),F(力),E(能量),r,R(半径),d,D(直径)等. 统计学符号如t检验,F检验,P值,x眘(均值?标准差), x眘x (均数?标准误)等. 拉丁词如in vitro, in vivo, vs,in situ, et al. 内切酶如EcoRⅠ, HindⅠ等.
2撰稿
2.1研究原着 应包括文题、 作者、 单位、 英文文题、 作者、 单位、 摘要及关键词、脚注;中文摘要、关键词;引言、 材料和方法、结果、 讨论、 致谢及参考文献.
(1)文题要鲜明而有特色,能确切反映全文的特定内容, 不用副标题.要便于检索,勿用阿拉伯数字开头,请少用“的研究”,“的观察”等. 左顶格写, 一般中文文题不超过25个汉字, 英文文题不超过10个实词.
(2)作者和单位论文署名作者应限于参加研究工作并能解答有关问题、能对文稿内容负责者, 如论文学术内容的创始构思或设计者;实验数据的采集并能给予解释者;能对编辑部提出的审改意见进行核修者;能在学术界就论文内容进行答辩者. 对研究工作有贡献的其他人可放入致谢栏内. 左顶格写, 按贡献大小统一排序,姓名之间用逗号“,”隔开. 2位以上如系多单位时, 则在作者的右上角分别用阿拉伯数字注明. 单位在作者后, 加圆括号.
(3)关键词3~8个, 尽量用Index Medicus当年医学主题词表(Medical Subject Headings, MeSH)中的词, 以便国际检索. 中文名用《汉语主题词表》、 《医学主题词注释字顺表》中的译名. 中医药参照《中国中医药主题词表》选用. 未被收录的词如确有必要也可作为关键词标注. 关键词间用分号“;”分隔.
(4)摘要中英文摘要应文意一致, 以400字为宜, 能独立成文, 可进入数据库作二次文献检索. 要求按目的(AIM)、 方法(METHODS)、 结果(RESULTS)和结论(CONCLUSION), 即AMRAC四层次结构写.
(5)脚注注明收稿和接受日期YYYY-MM-DD;资助课题的基金项目及编号(编号写在圆括号内), 通讯作者姓名、Tel及Email, 第一作者简介包括姓名、学位、职称、职务、电话和Email等.
(6)正文
引言 通常不超过300字. 概述立题的目的和国内外研究现状,一般应引用参考文献1~3条,勿作详细的历史回顾和综述.
材料和方法 应翔实、 具体,注明动物品种、雌雄、年龄、体质量等;患者应注明X别、年龄、诊断及其标准等;对关键X的试剂、 药品和测试仪器应注明品种、 规格、 型号和来源. 中药处方必须全部列出. 一般方法可引文献, 按试剂盒说明书操作不须再描述,如有创新或改进, 则应具体描述, 具有可重复X.
结果 应按逻辑顺序真实、 准确地描述研究所获得的数据. 可用文字、 图或表进行表达, 但三者不应重复. 所有数据需经统计学处理. 显着X检验应注明何种方法及具体P值,如P=0.00126. 层次系统 1~3层, 如:“0”, “1”, “1.1”, “1.1.1”, 各级标序均左顶格, 第2层后空1字距排标题. 正文内连续叙述中的序号采用①……; ②……; ③…….
表和图 用中文表述,应少而精, 文字能说明的问题, 不用表和图. 表和图不要重复同一数据, 其设计应正确、 易懂, 有自明X. 采用三线表. 表序和表题置于表上方. 组织病理照片(大小为8.2 cm?.1 cm)特别是免疫组化染色的照片等必须采用彩图,其背面用铅笔注明图序及图题并标明最小可用范围,勿剪裁. 在表、图中用特定单位表示量的数值时,其标目应采用量和单位相比的形式,如t/min, p/kPa, c/(mol/L). 一般情况图不超过4幅,表不超过2个.
数字 一系列数值的计量单位相同时, 可在最末一个数值后标明单位, 如5, 10, 15, 20, 25 mol/L. 单位相同的量值范围,前一个量值单位可以省略,如10~15 mol/L. 其他如: (25?)℃, 3万~8万, 50%~80%, 3?05~8?05, 体积2 cm? cm? cm. 完整数字不移行. 测量数据的有效位数由测量仪器的精度决定,只允许最后一位有误差. 在x眘表示的一组数中,考虑到个体的变异,一般以s的1/3来定位,例如(3614.5?20.8) g, s的1/3约为140.3 g. 平均波动在百位数,故应写成(3.6?.4) kg. 又如(8.40?.27) cm, s/3=0.09, 达小数点后第2位,故该组数的有效位数应写到小数点后两位. 多余位数行一次X修约,即小于5去掉,大于5进位;逢5时,如其左方为奇数则进,偶数则不进,如0.5561→0.56; 0.5548→0.55;0.5550→0.56; 0.5650→0.56. 分数则横写,如2/3,1/5.
讨论 宜充分而简明扼要, 重点要深入而突出, 着重讨论新发现及由此得出的结论和观点. 避免应纳入引言的内容放在讨论中. 不重复在结果中已叙述过的内容.
致谢 对修改文稿、提供样品、协助实验、帮助制图、制表及统计等人员表示感谢. 应征得被致谢者的同意签字.
参考文献 按原文着述表达. 以亲自阅读近1~3 a核心期刊或中国科学技术信息研究所统计源期刊,以及重要论着为主.欢迎引用本核心期刊的相关文献,以体现研究的科学X、创新X和延续X. 参照《GB/T 7714-2005》, 按文内出现先后编序. 正文内引用时, 其序号注于右上角方括号内,如:汪美先等〔1〕报道…,HCC中p53基因的研究已有文献报道〔2-6, 8〕,采用文献〔7〕的方法测定血清中sIL2的含量. 文末按引文顺序列出. 务必注意文献的准确X. 文献作者仅列出前3位,后加“等”字. 参考文献一般10~15条,书写格式如下.
〔期刊〕
〔1〕 蒋尔鹏,张远强,张金山,等. p38 MAPK在小鼠睾丸出生后不同发育阶段的表达〔J〕. 第四军医大学学报, 2003,24(11):961-963.
〔2〕 Chaib H, MacDonald JW, Vessella RL, et al. Haploinsufficiency and reced expression of genes localized to the 8p chromosomal region in human prostate tumors〔J〕. Genes Chromosomes Cancer, 2003,37(3):306-313.
〔3〕 Huang X, Ren P, Wen AD, et al. Pharmacokinetics of traditional Chinese syndrome and recipe: A hypothesis and its verification 〔J〕. World J Gastroenterol, 2000,6:389-391.(每卷内连续标页码者,可省略期号)
〔专着〕
〔1〕邱力军. 新编计算机基础与应用〔M〕. 西安:第四军医大学出版社,2002:96-131.
〔2〕 Griepp EB. The heart 〔A〕// Weiss L. Cell and tissue biology 〔M〕. 6th ed. Baltimore: Urban & Schwarzenberg Inc. 1988:401-422.
〔专利文献〕
〔1〕 刘加林. 多功能一次X压舌板:中国,92214985.2〔P〕. 1993-04-14.
〔电子文献〕
〔1〕萧钰. 出版业信息化迈入快车道〔EB/OL〕.(2001-12-19)〔2002-04-15〕.
2.2研究快报 研究工作完成且获得一定创新成果,创意新、意义大,可直接推向国外者,立即整理直接用英文撰写,随期刊出,以争首发权. 属国内领先者则用中文撰写,争取尽早发表. 研究快报包括文题、作者、单位(注明科室、邮政编码,Tel.及Email.)、关键词及正文. 可采用最重要的图和表. 参考文献5~8条. 全文1500字以内.
2.3经验交流及病例报告 用中文表达,包括文题、作者、单位(注明科室、邮政编码;电话及Email),关键词、正文及参考文献.
2.4述评与综述 ①述评:欢迎资深学者撰写具有新观点、新见解、有指导X的述评或评论; ②研究综述:系作者及其科室研究课题系列论文(已公开发表)的综述,国际领先者可用英文发表;国内领先者采用中文发表; ③文献综述:以近1~3 a中外核心期刊论文为基础,引用文献必须充分,选题先进,适于国情,请预先与编辑部联系.
3投稿
3.1投稿规则 来稿由相应单位作政治和保密审查,附单位介绍信及作者投稿信, 内容包括: ①论文内容真实,文责自负, 数据准确, 无泄密; ②参考文献确系亲自阅读,核对无误,并提供摘要作核对; ③同意编辑部作文字X修改; ④临床研究必须遵循《赫尔辛基宣言》的原则,对任何涉及人体的研究均应注明得到受试者知情同意. ⑤投稿将意味着作者将出版及上网权转交给本刊编辑部,保证无一稿两投;⑥每位作者均需在信末签名负责;⑦研究原着必须由统计学专业工作者及英语专业工作者审核签名后投稿;⑧投稿时应附稿件处理费及打印费. 一旦发现一稿两投(指主要内容相同),将追究其法律责任,作出赔偿. 在本刊公开发表过的研究快报,其全文仍可在他刊发表. 研究生论文必须经导师修改并签名认可. 文稿被接受且按编辑部审修意见修改定稿后,可将电子版(Word格式)、修改稿和相关费用一并寄送编辑部.
3.2稿件处理 编辑部有权对来稿进行必要的文字X删改. 不采用的稿件于3 mo内通知作者, 原稿存档. 作者自留底稿. 凡稿件退修表示已被核心期刊初步接受,请勿再投他刊. 优秀研究原着、研究综述及研究快报经编委会主任、 主编或审稿专家推荐可提前发表,也可推荐给核心期刊英文版发表. 论文刊出后赠送当期核心期刊杂志.
Ⅲ 全血分离获得血清的方法及步骤 谢谢
材料与方法
1.1 血清采集 MG患者全血来自2004~2005年就诊于辽宁中医学院附属医院的门诊患者。根据典型临床表现、新斯的明试验、低频重复电刺激及单纤维肌电图等确诊,无其他自身免疫性疾病,未经其他免疫抑制治疗,并参照1994年版《中医病证诊断疗效标准》辨证为脾肾虚型。正常人血清取自同时期健康志愿者。-70 ℃冰箱冷冻保存备用。
1.2 主要试剂 固相pH梯度干胶条IPG strip(Amersham公司产品, 非线性pH 3~10, 7 cm)。3-〔3-(胆酰胺基丙基)二甲氨基〕丙磺酸盐{3-〔(3-cholamidopropyl) dimethylamino〕-1-propanesul-fonate, CHAPS},二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol, DTT),三丁基膦(tributyl phosphine, TBP),尿素,硫脲,碘乙酰胺(iodoacetamide, IAA),丙烯酰胺(acrylamide)、甲双丙烯酰胺(N, N'-methylenebi-sacrylamide),四甲基乙二胺(N, N, N, N-tetram-ethyl-ethylenediamine, TEMED),过硫酰胺(am-monium persulfate, APS),三羟甲基氨基甲烷〔tris (hydroxymethyl) aminomethane〕、甘氨酸(glycine, Gly)和十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate, SDS)均为Bio-Rad公司产品。琼脂糖为华美生物公司产品。其他试剂均使用国产分析纯试剂。所有溶液均用MilliQ水配制。
1.3 主要仪器 高速冷冻离心机,德国Eppendorf公司产品;EttanTMIPGphorⅡ,Amersham Biosci-ences公司产品;P-2000分光光度仪,Hitachi公司产品;SE-600电泳仪,Amersham公司产品;纯水装置,Millipore公司产品;GS-710光密度扫描仪,Bio-Rad公司产品;冷却水循环系统,Cole-Parmer公司产品;Bruker-Daltonics AutoFlex TOF-TOF LIFTMass Spectrometer,美国Bruker-Daltonics公司产品;LCQ Deca XP Plus,美国Thermo Finnigan公司产品。
1.4 双向电泳
1.4.1 血清总蛋白质的提取及定量 血清-70 ℃反复冻融4次后,用Agilent Multiple Affinity Re-moval Column处理去除高丰度蛋白。使用Agilent 5K超滤管进行浓缩除盐,冻干回收的样品,-70 ℃保存。用裂解液(9 mol/L 尿素、4% CHAPS、 65 mmol/L DTT和cocktail酶抑制剂)进行复溶,并采用考马斯亮蓝法进行蛋白质定量。
1.4.2 等电聚焦 自-20 ℃取出的胶条,室温下平衡10 min,以500 μg上样量在每份样本中加入上样缓冲液(8 mol/L尿素、2% CHAPS、1% Bio-lyte和1% TBP)以及标准蛋白质分子,上样于泡胀槽中,加入矿物油覆盖。程序设置如下:30 V 12 h,500 V 1 h,1 000 V 1 h,8 000 V 6 h。恒温20 ℃。等电聚焦电泳后IPG胶条在平衡液1(Tris-base 50 mol/L 、尿素 6 mol/L、甘油 30%、SDS 2%、溴酚蓝0.002%和DTT 100 mg)中于振荡器上振荡 15 min; 然后置入平衡液2(成分同平衡液1,用 400 mg 碘乙酰胺代替100 mg DTT)同样于振荡器上振荡15 min。
1.4.3 SDS-PAGE垂直电泳 采用12.5%的均匀SDS2聚丙烯酰胺凝胶(水23.2 ml,30%丙烯酰胺溶液32.46 ml,1.5 mol/L Tris-HCl缓冲液pH 8.8 20 ml,10% SDS 0.8 ml,10% APS 0.4 ml,TEMED 3.76 μl,胶总体积80 ml)。将平衡后的IPG胶条移至凝胶的上方,胶条一端放入低分子量蛋白质标准,0.5%的琼脂糖封胶。上下槽加入电极缓冲液(Tris 5 mmol/L,Gly 192 mmol/L和SDS 0.1%)。初始电流为每块胶40 mA,电泳20 min,然后以每块胶60 mA电流,直至溴酚蓝前沿。
1.4.4 银染色 电泳结束后,采用硝酸银染色法,通过固定,硝酸银染色,显影,停显及脱色,至背景清晰。
1.5 图像分析 每个样品常规进行3次二维电泳,用GS-710光密度扫描仪对电泳后的胶图分别进行扫描,所得扫描图像输入计算机,采用Image-master软件对图像进行背景消减、蛋白质点检测和校正,获取蛋白质点的位置坐标和表达量等分析。选取 Ratio ≥1.5的蛋白质点认为有差异。所有数据的统计分析均采用SPSS 12.0软件,统计学分析采用 t 检验。
1.6 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱分析 用手术刀片切下胶上目标条带,进行切胶、胶上胰蛋白酶酶解 20 h ,抽提酶解肽段,Zip Tip脱盐后点样,行基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)分析(飞行管长2.7 m,加速电压 20 kV ,反射电压23 kV)。将第1级质谱得到的肽片段质量指纹图谱、肽质量指纹图谱与第2级质谱得到的肽序列信息一起用来检索蛋白质数据库,找出匹配的蛋白质。
1.7 数据库检索 将质谱鉴定所得的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprinting, PMF)数据于Bio-Works(Thermo Finnigan, San Jose, CA)软件搜索相应的库。搜索使用的数据库为IPI human蛋白库(SEQUEST结果过滤参数为:当Charge+1,Xcorr≥1.9;当Charge+2,Xcorr≥2.2;当Charge+3,Xcorr≥3.75;其中DelCN≥0.1)以及NCBI上 Homo sapiens的非冗余蛋白库(rendant data-base)。检索参数为胰蛋白酶解;氨基酸固定修饰方式为脲甲基半胱氨酸;模式为单同位素峰;肽片断最大误差控制在100 ppm;肽片断最大分子量误差为±0.5 Da;每个肽允许有1个不完全裂解位点。
2 结果
2.1 脾肾虚型重症肌无力患者血清双向电泳图谱 的建立及分析 经2-DE技术及银染色后,得到了两组血清的双向凝胶电泳图,并于相同的条件下重复实验3次。在正常对照组细胞蛋白质组双向电泳图谱上可观察到1 463±179个蛋白点,而脾肾虚型重症肌无力组可见到1 508±89个蛋白点
Ⅳ 观测指标标识符逻辑命名与编码系统(LOINC)
观测指标标识符逻辑命名与编码系统(logical observation identifiers names and codes,
LOINC(1994))旨在促进临床观测指标结果的交换与共享。为实验室和临床检查提供了一套统一的名称和标识码,从语义和逻辑上支持医学检验、检查结果的交换。
LOINC数据库实验室部分所收录的术语涵盖了化学、血液学、血清学、微生物学(包括寄生虫学和病毒学)以及毒理学等常见类别或领域;还有与药物相关的检测指标,以及在全血计数或脑脊髓液细胞计数中的细胞计数指标等类别的术语。
LOINC数据库临床部分的术语则包括生命体征、血液动力学、液体的摄入与排出、心电图、产科超声、心脏回波、泌尿道成像、胃镜检查、呼吸机管理、精选调查问卷及其他领域的多类临床观测指标。
Regenstrief 研究院(Regenstrief Institute)一直负责并承担着LOINC数据库及其支持文档的维护工作。
LOINC分为四个部分:(1)实验室LOINC(LaboratoryLOINC);(2)临床LOINC(Clinical
LOINC)负责非实验室诊断检查、重症医学、医疗护理指征、病史及体格检查方面的内容;(3)调查问卷;(4)信息附件;
LOINC概念的核心部分主要由一条代码、六个概念定义轴(或者说,由六个数据库字段的取值所共同组成的全称,也就是LOINC概念的定义)以及简称等组成。
(1)成分(component,或称为分析物):如钾、血红蛋白、丙型肝炎抗原。
(2)受检属性(property):如质量浓度、酶的催化活性。
(3)时间特征(timing):也就是说,一项检测指标是某个时刻或短时间的观测结果,还是在更长时间段内的观测结果,如24小时尿标本。
(4)样本类型(sample):如尿、静脉血。
(5)标尺类型(scale):即结果属于定量型、等级型、名义型(如金黄色葡萄球菌),还是叙述型(如显微镜检查的诊断意见)。
(6)方法(method):是指在获得试验结果或其他观测结果时所采用的方法。
Ⅳ 方舟手游hemostatic serum是什么意思
《方舟手游》中hemostaticserum是止血血清,当使用时止血血清将治愈幸存者。此效果持续180秒。
《方舟之旅》是由提阿非罗网络科技有限公司开发的手机游戏。
游戏背景:
本游戏是一款经营探险养成类独立游戏,单机游戏,模拟经营游戏!
玩家在游戏中不仅可以体会当一名店长指挥看板娘杂货娘努力经营店铺的乐趣,还能与数十名性格各异、萌点十足的小姐姐培养好感、结成契约,同时还可以与小姐姐们一同组队,前往世界各处遗迹进行探险。
Ⅵ 血清Vd只有7.4正常吗谢谢
材料与方法 依.依 血清采集 MG患者全血来自贰00四~贰005年就诊于辽宁中医学院附属医院的门诊患者。根据典型临床表现、新斯的明试验、低频重复电刺激及单纤维肌电图等确诊,无其他自身免疫性疾病,未经其他免疫抑制治疗,并参照依99四年版《中医病证诊断疗效标准》辨证为脾肾虚型。正常人血清取自同时期健康志愿者。-漆0 ℃冰箱冷冻保存备用。 依.贰 主要试剂 固相pH梯度干胶条IPG strip(Amersham公司产品, 非线性pH 三~依0, 漆 cm)。三-〔三-(胆酰胺基丙基)二甲氨基〕丙磺酸盐{三-〔(三-cholamidopropyl) dimethylamino〕-依-propanesul-fonate, CHAPS},二硫苏糖醇(DL-dithiothreitol, DTT),三丁基膦(tributyl phosphine, TBP),尿素,硫脲,碘乙酰胺(iodoacetamide, IAA),丙烯酰胺(acrylamide)、甲双丙烯酰胺(N, N'-methylenebi-sacrylamide),四甲基乙二胺(N, N, N, N-tetram-ethyl-ethylenediamine, TEMED),过硫酰胺(am-monium persulfate, APS),三羟甲基氨基甲烷〔tris (hydroxymethyl) aminomethane〕、甘氨酸(glycine, Gly)和十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate, SDS)均为Bio-Rad公司产品。琼脂糖为华美生物公司产品。其他试剂均使用国产分析纯试剂。所有溶液均用MilliQ水配制。 依.三 主要仪器 高速冷冻离心机,德国Eppendorf公司产品;EttanTMIPGphorⅡ,Amersham Biosci-ences公司产品;P-贰000分光光度仪,Hitachi公司产品;SE-陆00电泳仪,Amersham公司产品;纯水装置,Millipore公司产品;GS-漆依0光密度扫描仪,Bio-Rad公司产品;冷却水循环系统,Cole-Parmer公司产品;Bruker-Daltonics AutoFlex TOF-TOF LIFTMass Spectrometer,美国Bruker-Daltonics公司产品;LCQ Deca XP Plus,美国Thermo Finnigan公司产品。 依.四 双向电泳 依.四.依 血清总蛋白质的提取及定量 血清-漆0 ℃反复冻融四次后,用Agilent Multiple Affinity Re-moval Column处理去除高丰度蛋白。使用Agilent 5K超滤管进行浓缩除盐,冻干回收的样品,-漆0 ℃保存。用裂解液(9 mol/L 尿素、四% CHAPS、 陆5 mmol/L DTT和cocktail酶抑制剂)进行复溶,并采用考马斯亮蓝法进行蛋白质定量。 依.四.贰 等电聚焦 自-贰0 ℃取出的胶条,室温下平衡依0 min,以500 μg上样量在每份样本中加入上样缓冲液(吧 mol/L尿素、贰% CHAPS、依% Bio-lyte和依% TBP)以及标准蛋白质分子,上样于泡胀槽中,加入矿物油覆盖。程序设置如下:三0 V 依贰 h,500 V 依 h,依 000 V 依 h,吧 000 V 陆 h。恒温贰0 ℃。等电聚焦电泳后IPG胶条在平衡液依(Tris-base 50 mol/L 、尿素 陆 mol/L、甘油 三0%、SDS 贰%、溴酚蓝0.00贰%和DTT 依00 mg)中于振荡器上振荡 依5 min; 然后置入平衡液贰(成分同平衡液依,用 四00 mg 碘乙酰胺代替依00 mg DTT)同样于振荡器上振荡依5 min。 依.四.三 SDS-PAGE垂直电泳 采用依贰.5%的均匀SDS贰聚丙烯酰胺凝胶(水贰三.贰 ml,三0%丙烯酰胺溶液三贰.四陆 ml,依.5 mol/L Tris-HCl缓冲液pH 吧.吧 贰0 ml,依0% SDS 0.吧 ml,依0% APS 0.四 ml,TEMED 三.漆陆 μl,胶总体积吧0 ml)。将平衡后的IPG胶条移至凝胶的上方,胶条一端放入低分子量蛋白质标准,0.5%的琼脂糖封胶。上下槽加入电极缓冲液(Tris 5 mmol/L,Gly 依9贰 mmol/L和SDS 0.依%)。初始电流为每块胶四0 mA,电泳贰0 min,然后以每块胶陆0 mA电流,直至溴酚蓝前沿。 依.四.四 银染色 电泳结束后,采用硝酸银染色法,通过固定,硝酸银染色,显影,停显及脱色,至背景清晰。 依.5 图像分析 每个样品常规进行三次二维电泳,用GS-漆依0光密度扫描仪对电泳后的胶图分别进行扫描,所得扫描图像输入计算机,采用Image-master软件对图像进行背景消减、蛋白质点检测和校正,获取蛋白质点的位置坐标和表达量等分析。选取 Ratio ≥依.5的蛋白质点认为有差异。所有数据的统计分析均采用SPSS 依贰.0软件,统计学分析采用 t 检验。 依.陆 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱分析 用手术刀片切下胶上目标条带,进行切胶、胶上胰蛋白酶酶解 贰0 h ,抽提酶解肽段,Zip Tip脱盐后点样,行基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)分析(飞行管长贰.漆 m,加速电压 贰0 kV ,反射电压贰三 kV)。将第依级质谱得到的肽片段质量指纹图谱、肽质量指纹图谱与第贰级质谱得到的肽序列信息一起用来检索蛋白质数据库,找出匹配的蛋白质。 依.漆 数据库检索 将质谱鉴定所得的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprinting, PMF)数据于Bio-Works(Thermo Finnigan, San Jose, CA)软件搜索相应的库。搜索使用的数据库为IPI human蛋白库(SEQUEST结果过滤参数为:当Charge+依,Xcorr≥依.9;当Charge+贰,Xcorr≥贰.贰;当Charge+三,Xcorr≥三.漆5;其中DelCN≥0.依)以及NCBI上 Homo sapiens的非冗余蛋白库(rendant data-base)。检索参数为胰蛋白酶解;氨基酸固定修饰方式为脲甲基半胱氨酸;模式为单同位素峰;肽片断最大误差控制在依00 ppm;肽片断最大分子量误差为±0.5 Da;每个肽允许有依个不完全裂解位点。 贰 结果 贰.依 脾肾虚型重症肌无力患者血清双向电泳图谱 的建立及分析 经贰-DE技术及银染色后,得到了两组血清的双向凝胶电泳图,并于相同的条件下重复实验三次。在正常对照组细胞蛋白质组双向电泳图谱上可观察到依 四陆三±依漆9个蛋白点,而脾肾虚型重症肌无力组可见到依 50吧±吧9个蛋白
Ⅶ 如何通过数据库判断基因和肝病的相关性
那么如何看肝病DNA化验单?这是很多患者都想知道的问题,专家介绍,因为各家医院的仪器和试剂的不同而有变化,应该视化验单上具体给出的参考值而定,所以不能一概而论,要因地制宜。
感染乙型肝炎的病毒后必然会引起机体免疫反应,从而产生不同的血清免疫学标志物,目前认为乙肝的发病机制与机体的免疫应答密切相关,尤其是体内的细胞免疫应答,而机体的年龄特点决定机体的免疫系统成熟程度,婴幼儿免疫系统处于一个发展过程,此时清除病毒能力差,因此容易发生免疫时受而慢性化,而成人免疫系统发育完整,很容易在短期内进行免疫清除,因而表现为急性乙型肝炎,当机体免疫功能低下,不完全免疫耐受,HBV基因突变逃避免疫清除等情况时,亦可导致慢性肝炎,而当机体处于超敏反应,大量抗原抗体复合物产生并激活补休系统时,以及在大量炎症因子参与下,可导致大片肝细胞坏死,即发生重型肝炎。
Ⅷ rh阴性血
Rh血型简介
人类红细胞血型由多达二十多种的血型系统组成,ABO和Rh血型是与人类输血关系最为密切的两个血型系统。当一个人的红细胞上存在一种D血型物质(抗原)时,则称为Rh阳性,用Rh(+)表示;当缺乏D抗原时即为Rh阴性,用Rh(-)表示。
Rh(-)的分布因种族不同而差异很大,在白种人中的比例较高,约百分之十五。中国人群中:新疆维吾尔等少数民族Rh(-)的分布为百分之五;蒙古族人接近百分之一;汉族人所占的比例极少,仅占千分之三,属稀有血型,如果同时考虑ABO和Rh血型系统,在汉族人群中寻找AB型Rh(-)同型人的机会不到万分之三,十分罕见。
Rh(-)基因是隐性基因。当Rh(+)的父母将带有Rh(-)基因且同时遗传给子代时,其子一代即表现为Rh(-),双亲有一人是Rh(-)时,其子女为Rh(-)的机会增大,反之机会减少。
无论是Rh(-)者还是Rh(+)者其差别仅仅是血型的不同,都属健康人群。但Rh(-)者遇到特殊时其临床意义不容忽视,如连续两胎母婴Rh血型不合的妊娠,很可能导致胎儿的严重伤害;又如有输血、人流等免疫史的病人再次输入Rh(+)血时,可能产生强烈的溶血性输血反应。
RH阴性血又叫熊猫血
是指RH阴型血,非常稀有的血型,因为极其罕见,被称为“熊猫血”。
Rh阴性血是Rh阴性血型的俗称,是Rh血型系统的一种。人们大多知道血型有四种类型,即A型、B型、O型、AB型。其实,血型远不止这四种类型,而是有数十种类型或系统,十分庞大和复杂。由于A型、B型、O型、AB型以外的血型抗原性大都不强,所以临床医学家认为,除上述四种血型外,再加上Rh血型系统是临床上应用最广也最为重要的人类血型。
[编辑本段]种类
RH阴型血又可分为:
RH阴性A型
Rh阴性B型
Rh阴性O型
RH阴性AB型
在中国,汉民族和其它少数民族,RH阴型血的人约占0.34%。
[编辑本段]血型与输血密切相关
血型是根据红细胞膜结构上含糖蛋白的血型抗原不同而测定出来的。不一样的血型是不能随便相互输血的。举例来说,B型血的人的血清中除有B抗原外,还含有抗A型血的A抗体,它能与具有A型血抗原的红细胞起免疫凝集反应。若误将A型供血者的血输给B型受血者,A型红细胞上的A抗原就会与B型受血者的A抗体起免疫反应,使A型血红细胞发生凝集而引起溶血反应,这是十分危险的。为了避免免疫和溶血反应,供血者和受血者血型要相同。
[编辑本段]Rh阴性血型的血液十分珍贵
在我国,99%以上Rh血型者属阳性,所以,输血时因Rh血型不合而发生溶血反应的情况较少见。但是较少见不等于没有。如果Rh阴性血型的受血者输了Rh阳性血型的血液,就会引起免疫溶血反应。正确的做法应该是受血者和供血者的血型要一样,即都是Rh阴性血型。
Rh阴性血型与A、B、O、AB血型不同,后者血型的人群分布较为平均,几种血型的血源都容易寻找到。而Rh阴性血型是一种稀有血型,仅占Rh血型者的不到1%。据了解,在某市参加献血的300万人中,属于Rh阴性血型者仅有3300人。而临床手术患者中出现Rh阴性的几率是5~7/1000。相比之下,Rh阴性血型的血液就十分珍贵了。
[编辑本段]稀有血型血源供给机制需完善
稀有血型者的不断流动也造成血液采集困难。一些原先在血液中心资料库中登记备案的稀有血型者在变动了住址和联系方式后,仍然会跟血液中心保持联系,但部分稀有血型者在一段时间后就很难联系上。
由于稀有血型血源供给难以得到保证,一些地方的稀有血型者自发建立了“稀有血型之家”和“稀有血型联盟”之类的公益组织,倡导稀有血型者互帮互助。
今年7月,江苏省的一名稀有血型产妇遭遇胎死腹中、产后大出血的险情,在当地媒体向Rh阴性血爱心俱乐部成员发出紧急求救信号后,其得到救助并转危为安。
稀有血型者虽然所占比例不大,但也是一个不容忽视的群体,全国每年有上万例稀有血型孕产妇,怎样帮助她们化解可能遇到的生命危机是一个重大的社会问题。
因为信息不畅,稀有血型资源共享被制约,临床救治效率大大降低,这对于急需用血的人来说无疑是拿生命当赌注,政府应当尽快建立一个国家级稀有血型数据库,在全国范围内实现稀有血型信息共享,可以在很大程度上缓解因血源稀缺引起的生命安全问题。
另外,专家认为,目前我国血站采集血液的机制也有待完善,大多数血站采取“守株待兔”的方式被动地等待献血者前来献血,而缺乏一个长期有效的供给机制。
许多民间组织长期以来一直在宣传稀有血型知识,联系稀有血型人群,鼓励人们献血,尽自己的最大努力挽救需要帮助的生命,政府在此方面应该可以有更大的作为。
目前在很多地方,稀有血型血液的价格偏高,这极为不合理,政府应当重新考虑稀有血型血液的定价,真正给稀有血型者提供关怀和实惠。
·Rh血型探秘
1940年兰德斯坦纳和威纳将恒河猴的血液注入家兔体内后,得到一种免疫抗体,这种血清中的免疫抗体不仅能凝集恒河猴的红细胞,且能凝集85%的白种人的红细胞,从而证明了这些白种人的红细胞与这种猴子的红细胞上有共同的抗原,因而便取恒河猴的英文字头“Rh”作为这种抗原的名称。有Rh抗原的称为Rh阳性,反之则为阴性。Rh是一种血型系统,我国99%以上的人为Rh阳性。
因Rh血型是继ABO血型发现后临床意义最大的一种血型,也是最复杂的血型系统之一。Rh血型不合的输血可危及病人的生命;母子Rh血型不合的妊娠,有可能发生死胎、早产和新生儿溶血症。我国汉族人Rh阴性占0.2%~0.5%,而Rh阴性受血者和妊娠者则受Rh阳性抗原刺激的机率为99.6%~99.8%,经过一次输入Rh阳性血后50%以上的Rh阴性者会产生抗Rh抗体。因为Rh血型抗体为免疫抗体,如果再次输入Rh阳性血液后便容易发生输血反应。因此,Rh血型检查和ABO血型同等重要。需要注意的是,Rh阴性的孕妇妊娠后必需到市中心血站进行Rh血型鉴定并测定是否有免疫性抗Rh抗体,以防因母婴血型不合而发生新生儿溶血症。
是否可以解决您的问题?
Ⅸ 全国艾滋病检测工作管理办法的附件
艾滋病检测实验室基本标准 (一)人员条件。
由10名以上医技或科研人员组成,其中具有高级卫生技术职称人员至少5名,中级卫生技术职称人员至少3名。高级技术负责人需具有5年以上艾滋病病毒检测和研究经验,接受过国际或国家级艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。
(二)建筑条件。
需有独立的符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求的以下建筑区域,包括血清学检测、质量控制、核酸检测、基因序列测定及分析、免疫学检测、血清库和冷库等,并将建筑区域分为清洁区、半污染区和污染区。具有满足艾滋病病毒分离、培养与扩增、浓缩与纯化、中和试验等需要的三级生物安全实验室(BSL-3)。
(三)仪器设备条件。
配备血清学检测、病原学检测、核酸检测、基因序列测定、免疫学检测设备和三级生物安全实验室(BSL-3)所需仪器设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、病毒载量测定仪、基因序列测定仪和流式细胞仪、普通冰箱、低温冰箱、超低温冰箱、水浴箱、温箱、离心机、旋转震荡器、摇床、加样器(仪)、专用计算机和必要的摄像器材、消毒和污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜等。具有建立国家艾滋病病毒毒种库、检测样品库、质控品库、基因库、细胞库和数据库的设备条件。 (一)人员条件。
至少由5名医技人员组成,其中专职人员至少2名,具有副高级卫生技术职称人员至少1名。负责确证试验的技术人员需具有3年以上从事艾滋病病毒抗体检测工作经验、接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。
(二)建筑条件。
需有独立的血清学检测实验室,分为清洁区、半污染区和污染区,符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。根据需要可设置核酸检测、免疫学检测等建筑区域。
(三)仪器设备条件。
配备血清学检测和二级生物安全实验室(BSL-2)所需仪器设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、低温冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、旋转震荡器、摇床、加样器(仪)、专用计算机和必要的摄像器材、消毒和污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。具有建立血清库和数据库的设备条件。 (一)艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。
1、人员条件
至少由3名医技人员组成,其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验,接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。
2、建筑条件
实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区,应符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。
3、仪器设备条件
配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱(或温箱)、离心机、加样器(仪)、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。
(二)艾滋病检测点。
1、人员条件
至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。
2、建筑条件
需有艾滋病检测区域或专用实验台,能开展简便、快速检测。
3、设备条件
需配备快速试验所必须的物品,包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。
Ⅹ 国外文献(如血清白蛋白的美国文献)怎样查找
一般用medline:
openfind: www.openfind.com
搜索引擎大全:
Major Search Engines: http://www.modernnet.net/major.htm
Pubmed(MEDLINE): http://www.ncbi.nih.gov/entrez/query.fcgi
PubMed Medline Query: http://www.pubmed.nl/
Pubmed(MEDLINE): www.ncbi.nlm.nig.gov/entrez/query.fcgi?CMD=Limits&DB=PubMed : 美国NCBI入口,显示文章时在可以从网上获得全文的文章上都加上了出版商和全文的标志
SCICHINA Online: www.scichina.com/contents/2001/zk/zc/
NCBI HomePage: www.ncbi.nlm.nih.gov/: National Center for Biotechnology Information
中国医学生物信息网-CMBI: http://cmbi.bjmu.e.cn/
Internet Scientific Publications: www.ispub.com/ostia/index.php?xmlFilePath=ejournals.xml
Homepage - List of Journals: www.blackwell-synergy.com/servlet/useragent?func=showHome
杂志全名一网打尽 www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=journals
杂志的出版者 及网址,被收录的数据库
AAA: http://medlib.yu.ac.kr/kim3/aa.htm
BBB: www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/journals/loftext_noprov.html
最新的上网期刊(杂志链接): http://gort.ucsd.e/newjour/
查杂志的缩写的全称:
AAA: http://bric.postech.ac.kr/journal/abbrev/
BBB: http://www.library.ubc.ca/scieng/coden.html
CCC: http://wos.isiglobalnet.com/help/F_fulljt.html
Journals By Subject: www3.interscience.wiley.com/cgi-bin/browsepjsu?CODE=LMS&SUBJECT=Life%20and%20Medical%20Sciences: free
journal: http://life.nthu.e.tw/~b861604/journal.html: 将近20种着名杂志,free
LAU Libraries Free Online Journals: www.lau.e.lb/libraries/free-journals.html:free online journals
医学文献免费检索网:AAA http://h.7i24.com/tcmjxyy/
免费万方、CNKI、维普: http://ehttp.myrice.com/new/main.htm
Free Fulltext Journals(免费全文电子期刊): www.jiansuo.net/
免费医学期刊资源; http://www.freemedicaljournals.com/:这是一个专门提供免费全文医学期刊目录服务的网站,其目的是揭示网络上可以免费获取的期刊,以促进这些资源的利用。
Directory of Electronic Health Science Journals: http://www.hunter.health.nsw.gov ... 100&alpha=free: Free Journals
ScienceDirect - Home: http://www.sciencedirect.com/
sciencedirect http://www.sciencedirect.com
美国化学会志 : http://pubs.acs.org/
Idealibrary : http://www.idealibrary.com:主要是SD数据库
highwire: http://intl.highwire.org/
highwire: highwire.stanford.e/lists/freeart.dtl/: 免费全文(斯坦福大学提供的)
HighWire: http://highwire.stanford.e/: 斯坦福大学提供的
link.springer: http://link.springer.de/search.htm
Wiley InterScience Home Page: http://www3.interscience.wiley.com/
interscience.wiley: www.interscience.wiley.com
science: http://www.science.com
nature: http://www.nature.com
Czasopisma naukowe w Internecie riam.umcs.lublin.pl/umcs/czas_int.html:free
openly jake: http://jake.openly.com/:free
全文电子期刊: http://lib.cmch.org.tw/ejournal/ej-J.htm :
部分收费提供全文服务的外文期刊: http://www.freemedicaljournals.com/
国外免费全文网站: http://61.183.18.11/freeweb.htm
国际医学全文期刊: http://211.66.160.1/j/default.asp :
International Medical Journal Collects: free Catchword
全文电子期刊使用:202.117.24.24/html/xjtu/news/catchword.htm: Catchword是一个电子期刊出版平台,整合了世界上190多个出版社的5,400多种全文电子期刊。日前由国家科技图书文献中心购买了其中的14种期刊供全国的用户使用,即从2002年4月18日起全国的用户都可通过网络免费下载这些期刊的全文:
ISI Web of Knowledge: http://isi2.isiknowledge.com/portal.cgi
JCR: www.isinet.com/demos/jcrdemo/default.htm: ISI Journal Citation Reports: free
JBC -- Search: http://www.jbc.org/search.dtl:journal of biochemistry:free
BFN : http://bfn.org/library/
Buffalo Free-Net : http://bfn.org/index.html :free
Ovid Medical Reference: www.promedicare.org/OnCampus/OvidMedRef.htm
Kluwer登录: kluwer.calis.e.cn/default.asp
Ingenta Select Homepage catch word)
www.ingentaselect.com/
American Chemical Society Publications Essential Resources for the Chemical Sciences: http://pubs.acs.org/
The Royal Society of Chemistry: http://www.rsc.org/
Hunter Health: www.hunter.health.nsw.gov.au/ind ... p;query=bovine+bone§ion=99&Submit=Search
Cell : 杂志在线 : http://www.cell.com/
Achoo Gateway to Healthcare : http://www.achoo.com/main.asp
ChemWeb.com Journals: www.chemweb.com/library/elsevier/effect/TheTop
Biovisa Journal Index: www.biovisa.net/journal/journal_index.php3?w=j
WSPC Journals Online Home - Main: worldscinet.lib.tsinghua.e.cn/app/home/main.asp?wasp=agxy6yfbqhnwdgxj7w
Human Resources Self Service: http://128.101.103.54/
lib.ghil.com/ej/c.htm: http://lib.ghil.com/ej/c.htm :
站内有很多杂志,而且链接也作的非常精美!值得推荐,但是这些都掩饰不住其中的奥妙:
北京大学天网FTP,WWW文件搜索引擎: http://bingle.pku.e.cn/
欢迎访问中国科学院文献情报中心网站: http://www.las.ac.cn
科学数据库: http://www.sdb.ac.cn/
journal of cell biology: http://www.jcb.org/ 可以search到 1965-recent
医学文献检索 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed/medline.html
science杂志 http://www.science.com/
nature杂志 http://www.nature.com/
PNAS杂志 http://www.pnas.org
JBC杂志 http://www.jbc.org
http://www.bio.com
protocol-online: http://www.protocol-online.org
CMS MBR 生物网站 http://www.cbi.pku.e.cn/srs5bin
science online国内镜像 http://china.sciencemag.org/
Cell杂志 http://www.cell.com/
美国科学院院刊PNAS网址(免费) http://www.pnas.org/
网上全文的生物学期刊 http://dna.sibc.ac.cn/bio/journal.htm