亮氨酸储存液怎么配置

1. DMEM/F12培养液配制

DMEM/F12培养基说明书
产品代号：MD207-050
一．【组成成分】
成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L
无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042
五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105
九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1
七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081
氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55
氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035
无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24
氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98
无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65
磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6
七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02
L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2
L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031
L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219
甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17
L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365
L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68

二．【产品指标】

外观 粉红色固体粉末
溶解性 完全溶解，溶液澄明。
pH值
①加NaHCO3 6.60～7.20
②不加NaHCO3 5.50～6.10
水分（%） ≤5.0
渗透压（mOsm/kgH2O）
①加NaHCO3 274～302
②不加NaHCO3 238～263
细菌内毒素（EU/ml） ≤10
微生物检查（CFU/g） ≤1000
细胞生长试验 细胞形态 与标准细胞形态相似

细胞数量 加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
三.【配制方法】
⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水（水温20℃～30℃）到950毫升，轻微搅拌溶解。
⑵ 加入2.438克碳酸氢钠。
⑶ 轻微搅拌溶解，加注射用水至1升。
⑷ 用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH至所需值。
⑸ 用0.2μm滤膜正压过滤除菌。
⑹ 溶液应在2℃－8℃下避光保存。
四．【贮藏】 2℃－8℃冷藏，干燥、密封、避光贮藏。

2. 亮氨酸的制备方法

氨基酸的制造是从1820年水解蛋白质开始的。1908年日本人Ikeda发现谷氨酸钠是鲜味的强化剂，开始了工业化生产氨基酸的历史。1957年日本开始运用微生物进行谷氨酸发酵生产，从此揭开了微生物发酵方法生产氨基酸的历史新篇章。20世纪六十年代左右，关于L一亮氨酸生物合成以及其代谢调节机制相继阐明。这为微生物发酵法生产L一亮氨酸定向育种及酶法生产L-亮氨酸提供了理论基础。
L一亮氨酸的生产方法主要有提取法、化学合成法、酶催化法、微生物发酵法等。 氨基酸是蛋白质的组成单位，在酸性条件下，将L一亮氨酸含量较高的蛋白质水解，得到各种氨基酸的混合物，经分离、纯化、精致等工序获得L一亮氨酸产品。
我国大部分厂家采用蛋白质水解法生产L一亮氨酸和L-胱氨酸。蛋白质水解法生产L一亮氨酸的优点是生产设备简单，技术要求不高，并且L一亮氨酸在蛋白质中的含量较高。但是蛋白质水解法生产的缺点是费时、污染严重、收率低、产品质量得不到保证，大规模生产受到限制。 酶催化法生产L一亮氨酸通常是利用转氨酶转氨给a一酮基异己酸生成L一亮氨酸和组氨酸将相关的酶和NADH共价结合在膜上，让底物缓缓地经过膜而进行酶催化反应生成L一亮氨酸。如1981年，Wichmann er al.建立了一种用超滤膜制成的膜反应器，膜上共价结合了亮氨酸转氨酶、甲酸转氨酶、和NADH，当底物。一酮基异己酸通过膜反应器后，可被催化生成L一亮氨酸，其中NADH通过甲酸同步氧化成CO2实现再生。
酶法生产氨基酸的优点是转化能力强，可避免代谢调控中的反馈抑制和反馈阻遏，并且其生物反应器紧凑，产物组分相对单一，易进行后工序加工处理，可以提高产品质量，降低成本。但酶法生产中所用到的酶需通过微生物发酵生成并提取精制，工艺过程比较复杂，且成本较高，因此目前尚未得到广泛的应用。如果能够低成本获得高酶活的酶，则酶法生产L一亮氨酸是一条经济可行的工艺路线。
微生物发酵法 一． 浓缩段
原料：蒸汽
将一次母液通入浓缩罐内，通入蒸汽，温度120℃，气压-0.09MPa，浓缩时间6h，结晶。
终点产物：结晶液（去一次中和段）
二，一次中和段
辅料：硫酸，纯水
结晶液进入一次中和罐，通入硫酸，纯水，温度80℃，中和时间4h，过滤
终点产物：1，滤液（回收利用）2，滤渣（去氨解段）
三, 氨解段
辅料：氨水，纯水，蒸汽
滤渣进入氨解罐，通入氨水，纯水，蒸汽，温度80℃，氨解时间3h，过滤
终点产物，1，滤液（回收利用）2，滤渣（去脱色段）(胱氨酸)
四，脱色段。
辅料：蒸汽，纯水，活性炭
滤渣进入脱色罐，通（投）入蒸汽，纯水，活性炭，温度80℃，脱色时间2h，过滤，
终点产物：1，滤渣（回收利用）2，滤液（去二次中和段）
五，二次中和段
辅料：氨水，蒸汽
滤液进入二次中和罐，通入氨水，蒸汽，温度80℃，中和时间4h，过滤，
终点产物，1，滤液（回收利用）2，滤渣（即L-亮氨酸粗品，去精制段）
六，精制段
辅料：蒸馏水，蒸汽(组氨酸盐酸盐)
用蒸馏水冲洗上段工序产品并离心甩干，送入烘干机，通入蒸汽烘干，包装，入库，烘干温度100℃，烘干时间3h。
终点产物：L-亮氨酸成品

3. 亮氨酸作用是什么谁能介绍下

亮氨酸一般多用于面包、面类制品。配制氨基酸输液及综合氨基酸制剂，降血糖剂，植物生长促进剂。可用作香料，可改善食品风味。在医药行业，L一亮氨酸是临床选用的复合氨基酸静脉注射液不可缺少的原料，对于维持危重病人的营养需要，抢救患者的生命起着积极的作用。亮氨酸还在调节氨基酸与蛋白质代谢方面起重要作用。研究发现，亮氨酸是骨骼肌与心肌中唯一可调节蛋白质周转的氨基酸。另外也有研究表明，亮氨酸能促进骨骼肌蛋白质的合成。亮氨酸的代谢产物。一酮异己酸一也具有调节蛋白质代谢的作用。

4. L-亮氨酸的生产方法

氨基酸的制造是从1820年水解蛋白质开始的。其提取顺序是是L-胱氨酸，L-组氨酸，L-亮氨酸，L-精氨酸，1908年日本人Ikeda发现谷氨酸钠是鲜味的强化剂，开始了工业化生产氨基酸的历史。1957年日本开始运用微生物进行谷氨酸发酵生产，从此揭开了微生物发酵方法生产氨基酸的历史新篇章。20世纪六十年代左右，关于L一亮氨酸生物合成以及其代谢调节机制相继阐明。这为微生物发酵法生产L一亮氨酸定向育种及酶法生产L-亮氨酸提供了理论基础。
L一亮氨酸的生产方法主要有提取法、化学合成法、酶催化法、微生物发酵法等。
提取法(蛋白水解法)：氨基酸是蛋白质的组成单位，在酸性条件下，将L一亮氨酸含量较高的蛋白质水解，得到各种氨基酸的混合物，经分离、纯化、精致等工序获得L-亮氨酸产品。
化学合成法:亮氨酸化学合成法有A . Strecker ,。一卤代酸氨解、相转移催化等几种方法。虽然化学合成法原理简单，价格低廉，但操作复杂，反应条件苛刻，产物多，产率不高，并且有的方法涉及到有毒物质。化学合成法得到亮氨酸是消旋的DL一亮氨酸，为了得到L一亮氨酸，必须进行光学异构体的拆分。
酶催化法生产L一亮氨酸通常是利用转氨酶转氨给。一酮基异己酸生成L一亮氨酸。将相关的酶和NADH共价结合在膜上，让底物缓缓地经过膜而进行酶催化反应生成L一亮氨酸。如1981是否能够被解除和解除的效果。获得积累目的产物的突变株最有一效的方法是通过基因突变解除微生物的正常代谢控制。获得突变株常用的几种方法如下:选育营养缺陷型菌株，切断或改变平行代谢途径;选育抗结构类似物突变株解除反馈抑制和阻遏;选育细胞膜通透性突变株，使目的产物分泌到细胞外，使细胞内终产物的浓度达不到引起反馈调节的浓度;，应用基因工程、代谢工程的手段有目的改造微生物菌株，使其高浓度合成目的产物。
天然品存在于脾脏、心脏等中，并以蛋白质的形式存在于各种动植物组织中，腐败分解后可游离而出。
用途：营养增补剂。一般多用于面包、面类制品。配制氨基酸输液及综合氨基酸制剂，降血糖剂，植物生长促进剂。
可用作香料，可改善食品风味。
质量标准：FCC
项目 标准:
旋光+14.5～+16.5°
含量 98.5～101.5%
重金属（以Pb计） ≤0.002%
铅 ≤10mg/kg
干燥失重 ≤0.2%
氯化物≤0.1%
功用：属于必需氨基酸，成人男子需要量2.2g/d。为婴幼儿正常生长及成人维持正常氮平衡所必需。
限量：1.占食品中总蛋白质量的6.4%。
2.可安全用于食品。
[包装]：牛皮纸袋或纸桶包装，每袋（桶）净含量为25kg，还可根据用户需要包装。
[运输]：轻装轻卸以防包装破损，防日晒雨淋，不能与有毒，害物同运。为非危险品。
[贮存]：本品应贮存在阴凉、干燥、清洁、遮光的环境中，严禁与有毒、有害物质混放，以免污染。
L-亮氨酸的特性
白色有光泽六面体结晶或白色结晶性粉末。略有苦味。于145~148℃升华。熔点293~295℃（分解）。在烃类存在下，在无机酸水溶液中性能稳定。每克溶于40ml水和约100ml醋酸。微溶于乙醇，溶于稀盐酸和碱性氢氧化物和碳酸盐溶液。不溶于乙醚。
L-亮氨酸生产工艺
一． 浓缩段
原料：蒸汽
将一次母液通入浓缩罐内，通入蒸汽，温度120度，气压-0.09Mpa，浓缩时间6h，结晶。
终点产物：结晶液（去一次中和段）
二，一次中和段
辅料：硫酸，纯水
结晶液进入一次中和罐，通入硫酸，纯水，温度80，中和时间4h，过滤
终点产物：1，滤液（回收利用）2，滤渣（去氨解段）
三, 氨解段
辅料：氨水，纯水，蒸汽
滤渣进入氨解罐，通入氨水，纯水，蒸汽，温度80，氨解时间3h，过滤
终点产物，1，滤液（回收利用）2，滤渣（去脱色段）(胱氨酸)
四，脱色段。
辅料：蒸汽，纯水，活性炭
滤渣进入脱色罐，通（投）入蒸汽，纯水，活性炭，温度80，脱色时间2h，过滤，
终点产物：1，滤渣（回收利用）2，滤液（去二次中和段）
五，二次中和段
辅料：氨水，蒸汽
滤液进入二次中和罐，通入氨水，蒸汽，温度80，中和时间4h，过滤，
终点产物，1，滤液（回收利用）2，滤渣（即L-亮氨酸粗品，去精制段）
六，精制段
辅料：蒸馏水，蒸汽(组氨酸盐酸盐)
用蒸馏水冲洗上段工序产品并离心甩干，送入烘干机，通入蒸汽烘干，包装，入库，烘干温度100，烘干时间3H。
终点产物：L-亮氨酸成品

5. 亮氨酸的理化性质

外观与性状：本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。
熔点：332℃（消旋体），293～295℃（左旋体）
酸碱性：pH约为为5.5 ～6.5
溶解性：本品在甲酸中易溶，在水中略溶，在乙醇或乙醚中极微溶解。
相对密度（水=1）：左旋体1.293
比旋光度：取本品，精密称定，加6mol/L盐酸溶液溶解并释稀成每1ml 中含40mg的溶液，依法测定（附录Ⅵ E），比旋光度为+14.5°至+16.0°
储存注意事项：本品应密封干燥避光保存。

6. 谁能告诉我——白氨酸和亮氨酸的区别急，谢

白氨酸;leucine
分子式：C6H13NO2
分子量：131.18
CAS号：

密度：左旋体1.293℃
熔点：消旋体332，左旋体293～295℃
性状：白色晶体
溶解情况：溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。
用途：医药上作营养剂。
制备或来源：由谷蛋白、玉米蛋白等蛋白质水解、精制而得，也可用化学方法合成。

性质：又称亮氨酸。学名α-氨基-γ-甲基戊酸或α-氨基异己酸。白色晶体。左旋体密度1.293。熔点：消旋体332℃（分解），左旋体293-295℃（闭管，分解）。溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。医药上用作营养剂，也用于生物化学研究等。可由谷蛋白、玉米蛋白等蛋白质水解、精制而得，也可用化学方法合成。

亮氨酸
亮氨酸

拼音名：Liang’ansuan

英文名：Leucine

书页号：2000年版二部－525

C6H13NO2 131.17

本品为L-2-氨基-4- 甲基戊酸。按干燥品计算，含C6H13NO2不得少于98.5％。

【性状】 本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。

本品在甲酸中易溶，在水中略溶，在乙醇或乙醚中极微溶解。

比旋度 取本品，精密称定，加6mol/L盐酸溶液溶解并释稀成每1ml 中含40mg的溶

液，依法测定（附录Ⅵ E），比旋度为＋14.5°至＋16.0°。

【鉴别】 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集298 图）一致。

【检查】 酸度 取本品0.50g ，加水50ml，加热使溶解，放冷至室温，依法测定

（附录Ⅵ H），pH值应为5.5 ～6.5 。

溶液的透光度 取本品0.50g ，加水50ml，加热使溶解，放冷至室温，照分光光度

法（附录Ⅳ A），在430nm 的波长处测定透光率，不得低于98.0％。

氯化物 取本品0.25g ，依法检查（附录Ⅷ A），与标准氯化钠溶液5.0ml 制成的

对照液比较，不得更浓（0.02％）。

硫酸盐 取本品1.0g，依法检查（附录Ⅷ B），与标准硫酸钾溶液2.0ml 制成的对

照液比较，不得更浓（0.02％）。

铵盐 取本品0.10g ，依法检查（附录Ⅷ K），与标准氯化铵溶液2.0ml 制成的对

照液比较，不得更浓（0.02％）。

其他氨基酸 取本品，加水制成每1ml 中含4mg 的溶液，作为供试品溶液；精密量

取上述溶液适量，加水释稀成每1ml 中含20μg 的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法

（附录Ⅴ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正

丁醇－水－冰醋酸（3:1:1 ）为展开剂，展开后，晾干，喷以茚三酮的丙酮溶液（1 →

50），在80℃干燥5 分钟，立即检视，供试品溶液所显杂质斑点的颜色，与对照溶液的

主斑点比较，不得更深（0.5 ％）。

干燥失重 取本品，在105 ℃干燥3 小时，减失重量不得过0.2 ％（附录Ⅷ L）。

炽灼残渣 取本品1.0g，依法检查（附录Ⅷ N），遗留残渣不得过0.1 ％。 铁盐 取本品1.5g ，依法检查（附录Ⅷ G），与标准铁溶液1.5ml 制成的对照液

比较，不得更深（0.001％）。

重金属 炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（附录Ⅷ H第二法），含重金属不得过

百万分之十。

砷盐 取本品2.0g，加水5ml，加硫酸1ml与亚硫酸10ml，在水浴上加热至体积约剩2ml ，

加水5ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，加盐酸5ml ，加水使成28ml，依法检查（附录Ⅷ

J第一法），应符合规定（0.0001％）。

热原 取本品，加氯化钠注射液制成每1ml中含20mg的溶液，依法检查(附录Ⅺ D)，

剂量按家兔体重每1kg 注射10ml，应符合规定（供注射用）。

【含量测定】 取本品约0.1g，精密称定，加无水甲酸1ml 溶解后，加冰醋酸25ml，

照电位滴定法（附录Ⅶ A），用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空

白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于13.12mg的C6H13NO2。

7. 等电亮氨酸ph

摘要：采用天然高分子絮凝剂壳聚糖对L-异亮氨酸发酵液进行预处理，在发酵液pH=2，壳聚糖用量30mg／L的条件下可取得较好的絮凝效果．并通过静态吸附实验，考察了pH和L-异亮氨酸浓度对平衡吸附量的影响．最后确定了732离子交换树脂提取L-异亮氨酸的最佳工艺条件： 上柱发酵液pH=2，上样速度0.6BV／h，洗脱液为0.5mol/L的NH4Cl．流出液经脱色、浓缩结晶后得L-异亮氨酸成品，总提取率为55％．
关键词：L-异亮氨酸；离子交换；提取；工艺条件
1前言
早在1936年，Rose等人根据动物营养试验结果证实，L-异亮氨酸为人和动物体营养必需氨基酸之一。它可作为强化剂添加于食品中，可用于配制一般营养复合氨基酸输液和治疗型特种氨基酸输液，其用量逐年增长IJl。目前，L-异亮氨酸主要是通过发酵法来生产，在L-异亮氨酸的发酵液中，除主要产物外还有其他氨基酸如丙氨酸、缬氨酸，因L-异亮氨酸跟这两种氨基酸均为中性氨基酸，它们的结构相似，等电点也接近，导致L-异亮氨酸分离非常困难。目前中性氨基酸的工业化分离方法国内外报道都不多，为了提高总提取率，作者采用离子交换法对L-异亮氨酸的分离提取进行了研究。
2实验部分
2．1 材料和仪器
001 X7(732)离子交换树脂，中国医药(集团)上海化学试剂公司。离子交换柱(φ20×500mm)，无锡仪器厂。L-异亮氨酸发酵液，江南大学生物工程学院氨基酸研究室提供。回转式恒温调速摇瓶柜HYG-II型，上海欣蕊自动化设备有限公司。PHs-3C型精密pH计，上海雷磁仪器厂。72 分光光度计，上海第三分析仪器厂。
2．2 发酵液预处理
在发酵液中加入草酸并加热至80℃，保温3min，离心除去部分菌体和碳酸钙，上清液用絮凝剂处理，过滤，根据物质颜色与吸收光颜色的互补关系，实验中采用650nm的入射波长，测定其透光率。
2-3 树脂的预处理
阳离子交换树脂依次用20％NaCl、2mol／LNaOH、2mol／L HCl浸泡洗涤，最后浸泡于去离子水中备用。
2．4 分析方法
L-异亮氨酸和L-丙氨酸含量的测定采用纸色谱定量分析法。即将待测液点样于新华3号层析纸上，电吹风加热赶氨，经展开剂(正丁醇：冰醋酸：水=4：l：1)展开后，用1.0％茚三酮丙酮溶液显色，剪下斑点加5ml 75％乙醇：0.2％ CuSO4.5H20=39：l的溶液洗脱，显色液在分光光度计的570nm波长下测吸光值，然后从标准曲线上查出氨基酸的含量。
2．5 静态吸附量和选择性系数的测定
准确量取经过预处理的lOml离子交换树脂和100ml一定浓度不同pH值的L-异亮氨酸发酵液，置于500ml的锥形瓶中。25"C下恒温振荡，直至平衡为止，测定平衡后发酵液中L－亮氨酸和L－丙氨酸的浓度，按(1)、(2)式计算树脂的吸附量Q及选择性系数KAB。Q=(Co-C‘)V／131.16W (1)式中，Co为起始发酵液中L-异亮氨酸的浓度(g／L)：C‘为平衡后发酵液中L-异亮氨酸的浓度(g／L),V为发酵液体积(L)； 为湿树脂体积(L)：l31.16为L-异亮氨酸分子量；Q为树脂交换容量(mol／L)。
2．6 动态吸附实验
将一定量的离子交换树脂装入玻璃交换柱中，通入已经预处理过的L-异亮氨酸发酵液，直至穿透液与茚三酮反应呈阳性为止，水洗后，用洗脱剂洗脱，分部收集流出液，确定最佳洗脱条件。
3结果和讨论
3．1 发酵液预处理工艺的确定
发酵液是含有大量菌体等固形物组成复杂的带有负电荷的胶体分散体系，同时具有亲水性和憎水性的胶体特性。如果采用带菌体的发酵液直接上柱，不仅给操作带来困难，而且影响产品的质量和收率，因此采用絮凝沉降的办法对发酵液进行预处理。壳聚糖是天然聚合物，具有无毒，易被动物消化吸收，对提高家禽的产蛋率和瘦肉率很有好处，用壳聚糖絮凝得到的菌体蛋白是很好的饲料添加剂。故本文采用壳聚糖为絮凝剂。以其处理后发酵液的透光率为考察指标，结果发现溶液pH和壳聚糖用量是影响絮凝效果的重要因素。
3．1．1 pH对絮凝效果的影响
溶液pH对絮凝作用的影响有两方面：一是影响菌体细胞表面带电情况：二是影响絮凝剂的电离程度和絮凝剂分子链伸展程度。发酵液pH对絮凝效果的影响可以看出pH为2时，絮凝效果最好。这是因为壳聚糖作为一线性含氨基的高分子氨基在酸性介质中质子化，表现出阳离子絮凝剂的性质。pH 值降低，壳聚糖阳离子絮凝剂的性质更加明显，然而当溶液的pH值太低时，会使壳聚糖溶解，反而影响絮凝的效果，另外pH值还会影响壳聚糖的架桥能力，因此pH值太高或太低对絮凝都不利，应该把发酵液控制在合适的pH值。
3．1．2 壳聚糖用量对絮凝效果的影响
壳聚糖用量对絮凝效果的影响可以看出在一定的pH值下，絮凝效果随絮凝剂用量的增加而增加，达到峰值后，又随絮凝剂用量的增加而降低，这与架桥絮凝机理一致 l： 当高分子絮凝剂覆盖微粒表面的部分接近50％时，其絮凝作用最佳； 当絮凝剂过量时，微粒表面全部被覆盖，已没有空余表面吸附起架桥作用的其他絮凝剂，又由于覆盖的絮凝剂带有许多亲水官能团，故反而起分散作用，这时悬浮液又变为稳定的分散体系， 因此絮凝剂过量反而使絮凝效果下降。
3．2 pH值对树脂交换容量和选择性系数的影响
发酵液pH是影响交换平衡关系的一个重要因素。通过静态实验，测定了不同pH下的离子交换容量可以看出pH为2时，树脂的交换容量最大，为0.882mol／L。在pH 由6降至2的过程中L-异亮氨酸以阳离子形式存在，使阳离子交换树脂的吸附量增加，但当pH继续降低时，溶液中[H+]增加，与L-异亮氨酸根离子发生竞争吸附，因此导致交换容量降低。
3．3 发酵液中L-异亮氨酸浓度对树脂交换容量的影响
配制不同浓度的L-异亮氨酸溶液，在pH为2的条件下测定树脂的静态交换容量，实验结果可以看出，随溶液中L-异亮氨酸浓度增加，树脂的交换容量增加，但在浓度大于0.16mol／L以后增加L-异亮氨酸浓度对交换容量的提高影响不大。
3．4 固定床操作工艺
上柱：经预处理后的发酵液调酸至pH为2上柱。另外固定床操作的一个重要参数是固液两相的接触时间，可以用BV／h表示，即每小时流经柱子的上样液为床体积BV（Bed Volume）的倍数。为了进行有效的交换，离子交换过程中必须使固液两相有充分的接触时间，如果液相流速增加，固液接触时间缩短，树脂与上样液来不及交换，就会导致交换区拉长，很快发生渗漏现象。通过实验上柱流速采用0.6BV/h。
水洗： 上柱后， 用适量的水洗。一般为上柱发酵液体积的l～2倍，水洗流速为1.0BV／h。
洗脱：本实验以O.1mol／L，0.2mol／L，O.5mol／L，lmol／L的氨水和0.2mol／L，O.5mol／L，O.8mol／L，1mol／L的NH4Cl作为洗脱剂进行洗脱。结果发现以氨水洗脱时，L-异亮氨酸与L-丙氨酸重叠较多，而以O.5mol／L的NH4Cl作为洗脱剂时，分离效果较好。
3．5 洗脱液的脱色与精制
本实验采用粉末状活性炭脱色。活性炭脱色是利用优先选择吸附有机大分子色素的特性，将色素分子强烈吸附于活性炭颗粒表面，随活性炭的分离而被除去。据文献报道，在偏酸性条件下活性炭脱色效果显着。因此本实验选定pH为4.5。并且通过多次实验，发现当活性炭用量为l％、温度为8O℃脱色lh，能达到较理想的脱色效果。
脱色液经旋转蒸发仪浓缩，加入乙醇结晶，于4℃静置过夜，过滤晶体，真空干燥12h，即得成品。成品总提取率为55％，高氯酸滴定法测得其纯度达98.8％ 。
4结 论
1．壳聚糖对L-异亮氨酸发酵液中的菌体具有良好的絮凝作用。溶液pH和壳聚糖用量是影响絮凝效果的重要因素。pH为2，壳聚糖用量为30mg／L时可获得良好的絮凝效果。
2．pH 2时最有利于732树脂吸附L-异亮氨酸。增加溶液中L-异亮氨酸浓度有利于增加树脂吸附量，但当L-异亮氨酸浓度大于O.16mol／L时，这种影响不明显。
3．L．异亮氨酸经732 树脂吸附，0.5mol／L NH4Cl洗脱后浓缩结晶得成品，成品总提取收率为55％。

8. 0.05%的亮氨酸如何配制

亮氨酸盐酸盐可看成滴加了盐酸的亮氨酸，亮氨酸钠盐相当于滴加了NAOH.

9. 0.12 M KCl，5 mM 组氨酸缓冲溶液 (pH 6.8)溶液的配制方法谢谢！

L-组氨酸的历史

其实，组氨酸在90年代时价格是非常高的,但是国外的买家，特别是日本和韩国以及欧美市场，是中国的主要买家，其价格也是相当高，一直到2002年，L-组氨酸的价格都是一直坚挺，大概到500元/kg，但是其提炼工艺也是异常的复杂，成本高，制造周期长，不易于保存等特点也是困扰国内主要厂家的原因,L-组氨酸又名L-组氨酸碱，其和L-组氨酸盐酸盐是酸碱对立的两种产品，国内的主要厂家有湖北，山东，浙江等省份厂家，当时的主要工艺还是动物的毛发进行水解以后，在进行中和反应，反复酸碱中和几次之后，我们便得到了结晶析出的L-组氨酸，其前面得到的一种氨基酸我们称之为精氨酸,是以树脂交换，然后上柱吸附为原理，柱子也分为阴树脂和阳树脂之分，其价格也是十分昂贵。

早在1900年代，日本科学家就开始了对L-组氨酸的研究，然后到了1950年，中国的科学家才开始进行水解法生产L-组氨酸的研究，当时主要还是以湖北为生产基地进行生产，同时也带动了L-胱氨酸，L-亮氨酸，L-酪氨酸等系列化氨基酸产品的生产。

总的来说，我们国家在生产氨基酸方面还是比较有优势的，大体上来讲是成本和技术优势，原料优势和政策优势，我们当时的环保要求不高，财政也是很支持，

L-组氨酸还是主要用于药用方面，和甘氨酸等其它氨基酸可以反应生产其它复杂的氨基酸系列产品。
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10. 谁给我介绍亮氨酸````扔几个网站也成啊~

亮氨酸
拼音名：Liang’ansuan
英文名：Leucine
书页号：2000年版二部－525
C6H13NO2 131.17
本品为L-2-氨基-4- 甲基戊酸。按干燥品计算，含C6H13NO2不得少于98.5％。
【性状】 本品为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦。
本品在甲酸中易溶，在水中略溶，在乙醇或乙醚中极微溶解。
比旋度 取本品，精密称定，加6mol/L盐酸溶液溶解并释稀成每1ml 中含40mg的溶
液，依法测定（附录Ⅵ E），比旋度为＋14.5°至＋16.0°。
【鉴别】 本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集298 图）一致。
【检查】 酸度 取本品0.50g ，加水50ml，加热使溶解，放冷至室温，依法测定
（附录Ⅵ H），pH值应为5.5 ～6.5 。
溶液的透光度 取本品0.50g ，加水50ml，加热使溶解，放冷至室温，照分光光度
法（附录Ⅳ A），在430nm 的波长处测定透光率，不得低于98.0％。
氯化物 取本品0.25g ，依法检查（附录Ⅷ A），与标准氯化钠溶液5.0ml 制成的
对照液比较，不得更浓（0.02％）。
硫酸盐 取本品1.0g，依法检查（附录Ⅷ B），与标准硫酸钾溶液2.0ml 制成的对
照液比较，不得更浓（0.02％）。
铵盐 取本品0.10g ，依法检查（附录Ⅷ K），与标准氯化铵溶液2.0ml 制成的对
照液比较，不得更浓（0.02％）。
其他氨基酸 取本品，加水制成每1ml 中含4mg 的溶液，作为供试品溶液；精密量
取上述溶液适量，加水释稀成每1ml 中含20μg 的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法
（附录Ⅴ B）试验，吸取上述两种溶液各5μl ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正
丁醇－水－冰醋酸（3:1:1 ）为展开剂，展开后，晾干，喷以茚三酮的丙酮溶液（1 →
50），在80℃干燥5 分钟，立即检视，供试品溶液所显杂质斑点的颜色，与对照溶液的
主斑点比较，不得更深（0.5 ％）。
干燥失重 取本品，在105 ℃干燥3 小时，减失重量不得过0.2 ％（附录Ⅷ L）。
炽灼残渣 取本品1.0g，依法检查（附录Ⅷ N），遗留残渣不得过0.1 ％。 铁盐 取本品1.5g ，依法检查（附录Ⅷ G），与标准铁溶液1.5ml 制成的对照液
比较，不得更深（0.001％）。
重金属 炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查（附录Ⅷ H第二法），含重金属不得过
百万分之十。
砷盐 取本品2.0g，加水5ml，加硫酸1ml与亚硫酸10ml，在水浴上加热至体积约剩2ml ，
加水5ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，加盐酸5ml ，加水使成28ml，依法检查（附录Ⅷ
J第一法），应符合规定（0.0001％）。
热原 取本品，加氯化钠注射液制成每1ml中含20mg的溶液，依法检查(附录Ⅺ D)，
剂量按家兔体重每1kg 注射10ml，应符合规定（供注射用）。
【含量测定】 取本品约0.1g，精密称定，加无水甲酸1ml 溶解后，加冰醋酸25ml，
照电位滴定法（附录Ⅶ A），用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，并将滴定的结果用空
白试验校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于13.12mg的C6H13NO2。
【类别】 氨基酸类药。
【贮藏】 遮光，密封保存。