叶绿素分离的层析液如何配置

❶ 叶绿素分离研磨加什么

在做叶绿素的提取和分离实验时，研磨绿叶时需要加入二氧化硅（使研磨充分），碳酸钙（ 防止色素受到破坏），无水乙醇（提取色素）；
分离色素用层析液．
滤纸条从上到下分别是：胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b．
故答案为：
二氧化硅 无水乙醇 层析液 胡萝卜素 叶绿素a

❷ 叶绿素的提取液和层析液分别是什么

提取液：丙酮5ml。

层析液：石油醚。

在做叶绿体色素分离时用到,将叶片碾碎，浸出绿色液体，将液体与层析液（石油醚）混合，将滤纸一段进入混合液体，四种色素在层析液中的溶解度不同，在滤纸上留下4条色素带。由此观查出各种色素的相对含量和种类。

纸层析法一般用于叶绿体中色素的分离，叶绿体中色素主要包括胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b，它们在层析液中的溶解度不同，溶解度大的随层析液在滤

纸上扩散地快，反之则慢；含量较多者色素带也较宽。最后在滤纸上留下4条色素带，所以利用纸层析法

能清楚地将叶绿体中的色素分离。

叶绿素提取后的色素带分布：最上端橙黄色为胡萝卜素，其次黄色为叶黄素，再下面蓝绿色为叶绿素a，最后的黄绿色为叶绿素b。

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叶绿素含量的测定方法主要有紫外分光光度法、荧光分析法、活体叶绿素仪法、光声光谱法和高效液相色谱法。不过目前应用最为广泛的还是分光光度法。

叶绿素提取液的吸收光谱表明：有两个强吸收峰，分别在红光区和蓝紫区，不同提取溶剂和原料所得的叶绿素溶液的吸收光谱比较相似。

叶绿素a、叶绿素b的红区最大吸收峰分别在663nm、645nm附近，在蓝紫区分别为429nm、453nm附近。由于提取溶剂和原料不同，对叶绿素提取液进行光谱扫描后，所得的最大吸收值可能有较小范围的浮动。

高效液相色谱(HPLC)定量检测叶绿素含量准确率较高，效果很好。用甲醇和丙酮作为流动相，体积比为80：20时，同时在流动相中加入质量分数为0.1%的冰醋酸，流速为1.0mL/min。利用每一种色素的色谱峰面积进行定量，叶绿素a、叶绿素b的定量可通过外标法由工作曲线求得。

❸ 叶绿素提取分离实验的层析液成分是什么

下面四种都可做层析液：

（1）20份汽油、2份丙酮、2份石油醚、1份苯。将滤纸条直接用该层析液进行层析，就可以得到比较理想的效果。

（2）9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合。

（3）汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。

（4）体积分数为95%的酒精或93号汽油。

❹ 高中叶绿素分离实验中层析液是什么物质

下面四种都可做层析液：
（1）20份60℃-90℃下分馏出来的石油醚、2份丙酮、1份苯。将滤纸条直接用该层析液进行层析，就可以得到比较理想的效果。
（2）9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合。
（3）汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。
（4）体积分数为95%的酒精
（5）93号汽油
分离叶绿素试验中是20份60℃-90℃下分馏出来的石油醚、2份丙酮、1份苯，也恶意用93号汽油。

❺ 叶绿素的提取和分离实验怎么做

提取色素：称取5 g的绿叶，剪碎，放入研钵中→加入少量二氧化硅、碳酸钙和10 mL无水乙醇→研磨→过滤→收集到试管内并塞严试管口。

制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长与直径的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，在距离剪角一端1cm处用铅笔画一条细的横线。

画滤液细线：用毛细吸管吸取少量的滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细线，待滤液干后，再画1～2次。

分离色素：将适量的层析液倒入试管中。结果为滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同的色素带。

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叶绿素提取注意事项：

制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角，这样可以使色素在滤纸条上扩散均心，便于观察实验结果。

过滤时不用滤纸过滤而用单层尼龙布过滤是因为滤纸对色素具有吸附作用，若用其过滤，会导致收集到的滤液色素含量少，使实验效果不明显或失败。

分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液，这是因为色素易溶解于层析液中，导致色素带不清晰，影响实验效果。

❻ 在绿叶中色素的提取和分离的实验步骤

（1）提取光合色素

用天平称取5 g绿色叶片，剪碎，放入研钵中。向研钵中放入少量二氧化硅和碳酸钙，加入10 mL无水乙醇（也可用丙酮），迅速、充分地研磨。在玻璃漏斗基部放一块单层尼龙布，将漏斗插入试管。将研磨液倒入漏斗，及时用棉塞塞严盛有滤液的试管。
①剪碎和加二氧化硅的作用：利于研磨充分
②加入碳酸钙的原因：防止色素破坏。研磨时会破坏溶酶体，溶酶体里面的有机酸会流出来而色素中有Mg，碳酸钙能和酸反应，防止酸和镁反应，破坏了色素。
③加入无水乙醇（丙酮）的原因：光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素。
④迅速研磨：防止乙醇挥发和色素的破坏。
⑤单层尼龙布的作用：过滤、去除杂质。
⑥用棉塞塞严的原因：防止乙醇（丙酮）挥发、提取液变少、变干。
（2）制备滤条
将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条一端剪去两角，在此端距顶端1 cm处用铅笔画一条细横线。
①滤纸条的长与宽略小于试管：既能使滤纸条轻松地放入试管内，易于取出，也能防止滤纸条太小，弯曲塌陷在试管内。
②剪去滤纸条两角的作用：1.保证滤纸能立在烧杯中2.保证滤纸上的滤液线能水平向上扩展。
③1 cm：保证滤纸条有足够的长度泡在层析液中，又能使色素带不浸在层析液（分离液）中。
④用铅笔，不能用签字笔、圆珠笔、画笔的原因：签字笔、圆珠笔、画笔的笔液色素会也能溶于乙醇和层析液，污染从绿叶中提取的色素。

（3）画滤液细线

用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画细线（也可用玻片较短那一端的边缘沾取滤液后，印在滤纸条上）。待滤液线干后，重复画线一两次。
①滤液线要细，要均匀：保证滤液色素在同一起始点上。
②待滤液线干后再重复画线的原因：既保证了滤液线的色素量，也防止滤液线过宽。画的次数越多，色素量越多，越好跑，色素带也就分得越开，越清楚。

（4）分离光合色素

将适量的层析液（分离液）倒入试管，将滤纸条画线一端朝下，轻轻插入层析液中，迅速塞紧试管口。
①适量的层析液：保证足量用于色素的分离，防止层析液浸没滤液线，也防止空气污染（层析液易挥发、有毒），避免试剂的浪费。
②层析液的作用：色素可溶于层析液中，不同的色素在层析液中的溶解度不同。溶解度高的色素随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的色素在滤纸上扩散得慢。这样，最终不同的色素会在扩散过程中分离开来。
③注意不要让层析液触及滤液线。接触后会使大量滤液溶于层析液中，导致实验失败。
④塞紧试管口的原因：层析液易挥发，且具一定的毒性。
（5）观察、记录
待层析液上缘扩散至接近滤纸条顶端时，将滤纸条取出，风干。观察滤纸条上所出现的色素带及其颜色，并做好记录。
最后滤纸条上将分离出四条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。

❼ 叶绿体色素提取与分离实验

用毛细玻璃管蘸取植物叶片研磨液画一条滤液细线（在制备滤纸条之后）
加入二氧化硅是为了研磨的充分，加碳酸钙是为了防止研磨时色素被破坏,加入丙烯来溶解色素。
层析也是由二十分石油醚、二份丙酮、一份苯混合，将滤纸下部（切记仅是滤液线以下）浸入层析液。
减去角是为了尽量让层析液在滤纸上的扩散速度相等

❽ 提取叶绿素为什么必须用无水乙醇，后面鉴别成分（层析法）必须专门配层析液（课本上这么讲的）

其实叶绿素这个东西很娇贵的，浸取所用的溶剂不同对其稳定性都有影响。
我做过实验，浸取最适合的溶剂就是经精提过的无水乙醇，最理想，丁酮、乙酸乙酯等都不很好。并且乙醇也要用95%的那种，含水量高了时间长了都不可以。
你做层析，需要考虑载体对水的敏感性，对水太亲和了恐怕对有机试剂就不那么“友好”了。用活性氧化铝作载体时关键一步的活化就说明问题。

❾ 叶绿素的提取和分离实验中,画滤液细线用的液体是什么

画滤液细线用的液体：丙酮（作用：溶解叶绿体中的色素）
叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂丙酮中，所以，可以用丙酮提取叶绿体中的色素。
层析液（石油醚）：是一种脂溶性很强的有机溶剂。（作用：溶解并分离色素）
根据叶绿体中的四种色素在石油醚中的溶解度不同来进行分离，溶解度高的在滤纸上扩散的快，溶解度低的扩散得慢。溶解度最高的是胡萝卜素，它随石油醚在滤纸上扩散得最快，叶黄素和叶绿素a的溶解度次之；叶绿素b的溶解度最低，扩散得最慢。这样，四种色素就在扩散过程中分离开来。

附：实验教学方案—叶绿体中色素的提取和分离
实验原理
叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂丙酮中，所以，可以用丙酮提取叶绿体中的色素。
层析液（石油醚）是一种脂溶性很强的有机溶剂。根据叶绿体中的四种色素在石油醚中的溶解度不同来进行分离，溶解度高的在滤纸上扩散的快，溶解度低的扩散得慢。溶解度最高的是胡萝卜素，它随石油醚在滤纸上扩散得最快，叶黄素和叶绿素a的溶解度次之；叶绿素b的溶解度最低，扩散得最慢。这样，四种色素就在扩散过程中分离开来。
目的要求
1．学会提取和分离叶绿体中色素的方法和原理。 2．能分辨叶绿体中的四种色素。 材料用具
新鲜的绿色叶片（如菠菜叶片）。
干燥的定性滤纸，烧杯（ 100 mL），研钵，玻璃漏斗，吸管，剪刀，小试管，药勺，量筒（10ml），天平，试管架 丙酮，层析液，二氧化硅，碳酸钙。
方法步骤
1．提取绿色叶片中的色素
（1）取几片绿色的叶片，去掉叶柄和主脉，用天平称取5g叶片，剪碎，放入研钵中。
（2）向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，进行充分的研磨。用量筒量取5ml丙酮，倒入研钵中，迅速充分研磨。 （3）将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤。将滤液收集到一个小试管中，及时用棉塞将试管目塞紧。
2．制备滤纸条
取一块预先干燥处理过的定性滤纸，将滤纸剪成长 10 cm、宽 1cm的滤纸条，在距滤纸条一端 1cm处用铅笔画一条细的横线。
3．画滤液细线、
用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待滤液于后，再画2~3次。
4．分离叶绿体中的色素
将3 mL层析液倒入烧杯中，将滤纸条（有滤液细线的一端朝下）略微料靠着烧杯的内壁，轻轻地插入到层析液中，随后用培养皿盖盖上烧体；注意，不能让滤纸上的滤液细线触到层析液。 5．观察实验结果
看到四种色素的颜色后，取出滤纸条，观察滤纸条上的色素带颜色、位置、宽窄，并且填写实验报告。