配置母液为什么要按顺序加入药品

㈠ 配制培养基的步骤

1、配制溶液

向容器内加入所需水量的一部分，按照培养基的配方，称取各种原料，依次加入使其溶解，最后补足所需水分。对蛋白胨、肉膏等物质，需加热溶解，加热过程所蒸发的水分，应在全部原料溶解后加水补足。

配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。

2、调节pH值 

用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。

3、过滤

用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。用纱布过滤时，最好折叠成六层，用滤纸过滤时，可将滤纸折叠成瓦棱形，铺在漏斗上过滤。

4、分装

已过滤的培养基应进行分装。如果要制作斜面培养基，须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基，则须将培养基分装于锥形瓶内。

分装时，一手捏松弹簧夹，使培养基流出，另一只手握住几支试管或锥形瓶，依次接取培养基。分装时，注意不要使培养基粘附管口或瓶口，以免浸湿棉塞引起杂菌污染。

装入试管的培养基量，视试管和锥形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培养基时，每只15×150毫米的试管，约装3～4毫升（1/4～1/3试管高度），如制作深层培养基，每只20×220毫米的试管约装12～15毫升。每只锥形瓶装入的培养基，一般以其容积的一半为宜。

5、加棉塞 

分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。

制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与姆指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。

棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松，塞好后，以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应在管内或瓶内，上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札，准备灭菌。

6、制作斜面培养基和平板培养基

培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。

(1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5～1米左右的木条，厚度为1厘米左右。将试管头部枕在木条上，使管内培养基自然倾斜，凝固后即成斜面培养基。

(2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上，点燃酒精灯，右手托起锥形瓶瓶底，左手拔下棉塞，将瓶口在酒精灯上稍加灼烧，左手打开培养皿盖，右手迅速将培养基倒入培养皿中，每皿约倒入10毫升，以铺满皿底为度。

铺放培养基后放置15分钟左右，待培养基凝固后，再5个培养皿一叠，倒置过来，平放在恒温箱里，24小时后检查，如培养基未长杂菌，即可用来培养微生物。

㈡ 培养基的配制有哪些

1.培养基

培养基的种类较多，常常是不同种的植物要求的培养基成分不同。根据培养植物，选用适宜的培养基。现将常用的几种培养基组成介绍给读者，供参考。

（1）MS培养基

（1）MS培养基

（2）White培养基

（2）White培养基

（3）Vacin and Went（VW）培养基

（3）Vacin and Went（VW）培养基

（4）Kundson C（KC）培养基

（4）Kundson C（KC）培养基

2.培养基母液的配制和保存

经常配制培养基，为减少工作量及便于低温贮藏，一般配成比所需浓度高10～100倍的母液，配制培养基时只要按比例量取即可。配好的母液需装在棕色小口瓶中，存放在0～4℃冰箱中可使用半年至1年。如发现有沉淀物则不可再用，需重新配制。MS培养基母液配制如下：

3.培养基的配制过程

将母液从冰箱中取出，依次排好，按需要定量吸取，放入量筒中。称取琼脂，加少量水后加热，并不断搅拌，直到全部溶化。再加入称好的糖和前面备好的各种成分，不断搅拌，使之充分混合。测定已配好的培养基氢离子浓度（酸碱度），用0.1～1.0摩尔/升（0.1～1.0摩）氢氧化钠和盐酸将培养基调至所需的浓度。

将配好的培养基分别灌注到培养瓶中（试管或三角瓶），用盖子（棉塞、橡胶塞、铝箔）将瓶盖好，外面再包一层牛皮纸，标明编号。

培养基通常用高压灭菌锅灭菌。气压111.46～121.59千帕（1.1～1.2千克/厘米2压力），10～20分钟。冷却备用。