如何配置腐胺
Ⅰ 腐胺如何形成
腐胺是生物胺的一种,是滑搜顶风臭出几里地的超级臭弹,空气中浓度歼帆达到几十个ppm就能把人给熏晕,剧毒.
鸟氨信改历酸在肠菌作用下的脱羧产物,具体可以上网查查
Ⅱ 细胞污染用什么培养基摇菌
细胞污染永恒定律:无论什么细胞只要是不重要的细胞污染了,立刻加84弃之,重新复苏新冻存管培养;实在需要挽救的请参考以下:
细菌污染:主要有洋葱霍尔伯德菌型污染
确定是非常珍贵的细胞 建议分别配置含10倍庆大霉素和两性霉素溶液(G/A)的PBS和5倍庆大霉租氏素和两性霉素溶液(G/A)的完全培养基各一份。然后先用10倍双抗的PBS洗涤细胞5-10次, 然后用5倍双抗的完全培养洗涤细胞3次以上,再加上含双倍的G/A溶液放培养箱培养,一个小时后换液,持续4个小时后,再加上正常培养细胞所需的抗生素,过夜,到最终确定细胞没有任何污染物,因此时细胞受损过大,建议优化培养基方式(血清提高2%-5%)或者立即冻存衡渗细胞,一个月后复苏。
真菌污染:
污染的多是曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌,真菌主要以预防为主,防治为辅,已经污染了,建议采用以下方法:
1. 细胞一旦污染,很难挽救,即使使用制霉菌素或放线菌素D,也是伤敌八千自损一万的办法,可使用抗生素进行查杀,但是高浓度的抗霉菌素对细胞有毒性作用。
2. 把所有细胞从污染的CO2孵箱转移,采用过氧乙酸擦洗孵箱(全部,尤其四个角)。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后,再移入细胞;
3. 用0.5%新洁尔灭擦拭超净台和墙壁,确保不留死角,地面用新洁尔灭消毒液拖地。
4. 将环境彻底消毒,整个培养间高锰酸钾或者乳酸熏蒸,孵箱内部包括托盘等全部用苯酚搽洗,封闭2天。
真菌污染预防方法:
1),将细胞移出来,用微量硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再咐型脊把水盘里加适量硫酸铜或者酸氢二钠高盐液体防止霉菌
2)孵箱应定期清洁,大约一个月左右清洁一次,
3)可在培养基里加两性霉素或制霉菌素)或[放线菌素D或双抗进行预防。
4)最主要的还是要培养良好的无菌观念,实验室尽量不要大声说话,佩戴好口罩,手套,操作时应小心,避免培养基撒入培养箱以及生物安全柜,这些撒入培养箱的培养基为细菌及真菌的繁殖提供了很好的条件。
Ⅲ 牛肝菌有毒的吗
黑牛肝菌在南欧因为它可以用来烹饪而出名的,由于它是菌类,许多人都会对它小心翼翼的,认为菌类的东西都要注意,或许一个不留神就会中毒。
其实,黑牛肝菌的评价甚至还比美味牛肝菌高。而与黑牛肝菌类似的桃红牛肝菌羡链亦在加州获业余者或商人们广泛地采集,以作食材之用。所以,只要是可食用的黑牛肝菌的话,都是没用毒的,都是可以放心食用的。
由于我们没有经过专业的培训或许很难分辨出黑牛肝菌的特征,所以这个时候就应该小心,不要胡乱采摘菌类食品,以免有误,造成严重后果。
黑牛肝菌是什么
黑牛肝菌是一种可以吃的蘑菇,在巴斯克地区和意大利黑牛肝菌经绝让常被拿来食用。它的外表和菌肉都是黑色的,从其外表看,真是名副其实的黑牛肝菌,它的“长相”和其他的牛肝菌科一样,有菌柄和孢子,但是菌盖下并没有菌折。它的味道鲜美,并且有着强烈的气味,是最香的牛肝菌之一。夏季生马尾松,油茶林中地上。也是我国特有品种。
成熟的黑牛肝菌的高度平均在7–25厘米之间;菌盖是暗褐色或深雪茄棕色,并且菌盖表面有一些小小的裂纹。它的菌柄高6–10厘米,厚1.1–1.2厘米,通常较菌盖的直径小。其担孢子呈橄榄色或褐色,大小为13.5–15.5 x 4–5.5微米。从它的外表、形状大小、味道你可以辨认出它就是黑牛肝菌了吗?
黑牛肝菌的食用方法
黑牛肝菌是菌类的食物,很多人都知道,菌类的食物一定在饮食上小心翼翼,要使用正确的食用方法,不然就会容易中毒或引起身体上的不适。那么黑牛肝菌的食用方法是怎样的呢?
首先,食用黑牛肝菌的时候,应该先把黑牛肝菌放入盆内,注入清水浸泡3分钟之后再捞出,冲淘去菌种的泥沙,拣去杂质。
然后,再放入盆内,注入清水(刚好淹过菌子)用一盘子将菌压下,让其吸收水分均匀,自然发胀, 要注意浸泡时间不宜太短哦。
待到它发胀好后就可以像普通的菜那么做着吃了,或炒或炖,随你喜欢。
黑牛肝菌的做法
黑牛杆菌可并派局以有很多种吃法,可以当煮来吃,可以当配菜炒着吃,可以熬汤喝,不多说了,赶紧来学学它有哪些做法,具体又是怎么做的?
菜式一:牛肝菌炆滑鸡
1、准备好材料:黑牛肝菌、小蘑菇、鸡、酒、盐、生抽、糖、生粉;
2、黑牛肝菌和小蘑菇先用水泡软,洗净后晾干水分备用;
3、鸡洗净斩件;
4、鸡先用酒、盐、生抽、糖、生粉腌好;
5、起镬放油烧热;
6、放入姜和蒜头爆香后;
7、倒入鸡块爆炒片刻后溅酒,加入清水;
8、再将牛肝菌和小蘑菇放入兜匀;
9、加盖煮五六分钟,放盐调味勾芡便成。
小贴士:凡菇菌类的干品一定不可以爆炒的,那样的话菇和菌会变得象柴皮一样的难啃了。
Ⅳ 骆驼奶粉能解善神经系统吗
开始喝骆驼奶吧!
有一个喝骆驼奶的习惯,不但是对睡眠的好处,还可能会改变你磨行脊很多不满意的现状。
从免疫系统到内脏器官的排毒修复,都要靠良好的睡眠。长期拥有好睡眠,是十分珍贵的事情。好睡眠带给你一个好身体,很多疾病会被消灭在萌芽状态;还会有一些病症,带贺不用吃药就渐渐地自行康复了。
女人们更相信,美丽是睡出来的,好睡眠比任何化妆品都管用。天天好睡眠的人,无论外表,还是细胞、血液等各项指标,都要比同龄人显得年轻。
早晚各喝一杯骆驼奶,直到你完全拥有7-8小时充足睡眠的时候,你不仅仅是扔掉了安眠药,而且意想不到的收获会越来越多。
二.骆驼奶是肠道“清道夫”
骆驼奶是一个扫荡肠道腐败的“清道夫”。长期喝骆驼奶,能抑制体内不饱和醛酮对肠道平滑肌的破坏,会促使肠蠕动的功能修复,把腐败的东西打扫出去。骆驼奶还会让肠道内的有益菌快速繁殖,形成强大的有益菌群,来抑制肠道有害菌,令肠道的腐败土崩瓦解,营造一个健康的肠内微生物环境。在这种健康的肠道环境下,新生的大便无毒无害,通过正常的肠蠕动,定时排出去;这就是健康的“香蕉便”。
有喝骆驼奶习惯的人,很少有便秘和腹泻的问题。
在新疆的木垒县做过一个调查,找到12个常喝骆驼奶的人,他们当中没有一个人有便秘。在让他们了解了排“香蕉便”的好处后,有几个人开始观察自己的大便,过了几天还特意打来电话,说自己就每天排香蕉便,语气很兴奋。
和朋友聚会、谈事,如果你朋友有口臭或不小心放的屁很臭,说明他的肠胃道环境是腐败的,建议他每天喝点骆驼奶,并跟他讲排香蕉便的好处。喝一段时间骆驼奶,可以解决便秘的问题,多数情况排香蕉便。而且,自从排便改善之后,气色和精神头可以大为改善。
其实,每天早上的排便也就是在排毒。大便在肠道中的时间超过24小时会腐败滋生大约22种毒素:氨、吲哚、甲基吲哚、腐胺和尸胺、组胺、硫化氢、神经碱、苯酚、梭状芽孢杆菌肠毒素等。这些毒素对人体的伤害大于每天吸一包烟。长期便秘,隐患无穷。
再者,便秘会引起:色斑、痤疮、皱纹、口臭、大肚子等问题。
全身的瞎渗营养主要是通过肠道吸收进来的,如果肠道内环境是腐败的,它所滋生出来的毒素会透过肠壁,进入血液,流向全身。经常喝骆驼奶的人,肠道的环境是健康的,全身的各个部分都能够从中受益。尤其是女士,正常的排便还能祛斑,保持皮肤的光洁细腻,让你更年轻、让你更自信、让你神采飞扬。
Ⅳ 无土栽培植物 缺钾怎么办
看一下根,须多不?要是稀稀拉拉没几根,就是缺钾了。烧点草木灰撒上就成。别烧了小区里的草坪哇~
具体的:
植物缺钾时细胞形态有明显变化,其组织中常出现细胞解体,死细胞很多。缺钾时,植物外形也有明显的变化。由于钾在植物体内流动性很强,能从成熟拦和叶和茎中流向幼嫩组织进行再分配,因此植物生长早期,不易观察到缺钾症状,即处于潜在性缺钾阶段。此时往往使植物生活力和细胞膨压明显降低。表现出植株生长缓慢、矮化。缺钾症状通常在植物生长发育的中、后期才表现出来。严重缺钾时,植株首先在植株下部老叶上出现失绿并逐渐坏死简喊盯,叶片暗绿无光泽。双子叶植物叶脉间先失绿,沿叶缘开始出现黄化或有褐色的斑点或条纹,并逐渐向叶脉间蔓延,最后发展为坏死组织。单子叶植物叶尖先黄化,随后逐渐坏死。植物出现褐色坏死组渗野织与缺钾体内有腐胺积累有关。
植物缺钾时,根系生长明显停滞,细根和根毛生长很差,易出现根腐病。缺钾植株的维管束木质化程度低,厚壁组织不发达,常表现出组织柔弱而易倒伏。缺钾的植物叶片气孔不能开闭自如,因此在水分胁迫的条件下,尤其是高温、干旱的季节,植株失水多而出现萎蔫。在大豆结荚成熟后,植株仍保持绿色,是缺钾的典型症状。在供氮过量而钾不足时,双子叶植物叶片上,常会出现叶脉紧缩而脉间凹凸不平的现象。这是由于氮素充足使细胞内原生质汁液丰富,钾不足使纤维素合成受阻所致。
Ⅵ 大豆叶片原生质体制备的最适条件
原生质体(Protoplast):指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞 。
一、原生质体的应用
由于没有细胞壁,原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。
用作细胞杂交服务于作物改良
用作遗传转化的对象
研究细胞壁的发生过程
筛选突变体
膜的结构、运输、激素接受位点等的研究
用于分离细胞器和大分子
种质资源保存
二、原生质体分离、纯化
原生质体分离的最基本原则是保证原生质体不受伤害及不损害它的再生能力。
(一)分离方法
机械法分离
缺点:产量极低;应用的材料受限制;操作极费力
酶法分离 Cocking最早开展这方面研究
克服了机械法分离的缺陷,可分为直接法和顺序法两种。
酶法可在短时间内获得大量原生质体,缺点是:不纯的酶制剂所含杂质对原生质体可能有不同程度的毒害作用。
(二)影响原生质体分离的因素(酶法)
从理论上讲,只要用适当的酶处理,就能从任何活组织中分离得到原生质体。但是对于原生质体培养来说,要得到活性高、能进行分裂、形成愈伤组织、最后再生完整植株的原生质体则受许多因素的影响。原生质体分离时主要应考虑取材、酶的种类、纯度、酶液的渗透压、酶解时间、温度等。
1. 外植体来源:
生长旺盛、生命力强的组织和细胞是获得高活力原生质体的关键,并影响着原生质体的复壁、分裂、愈伤组织形成乃至植洞蠢高株再生。用于原生质体分离的植物外植体有叶片、叶柄、茎尖、根、子叶、茎段、胚、愈伤组织、悬浮培养物(Suspension cultures)、原球茎、花瓣和叶表皮等。 叶肉细胞是常用的材料,因为叶片很易获得而且能充分供应。取材时,一般用刚展开的幼嫩叶片。另一个分离原生质体的常用材料是愈伤组织或悬浮细胞,采用其作材料可以避免植株生长环境的不良影响,可以常年供应,易于控制新生细胞的年龄,处理时操作方便,无需消毒.
选用悬浮细胞作材料时,需每隔3-5天继代一次,培养一段时间使细胞处于旺盛生长状态。一般在继代后的第三天游离原生质体。
2. 酶液组成和浓度 :
纤维素,占纳尺壁干重的25-50%
植物细胞壁由三个主要成分构成 半纤维素, 平均53%
果胶质, 5%
用来分离植物原档氏生质体的酶制剂主要有纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和离析酶等,酶解花粉母细胞和四分体小孢子时还要加入蜗牛酶。纤维素酶的作用是降解构成细胞壁的纤维素,果胶酶的作用是降解连结细胞的中胶层,使细胞从组织中分开,以及细胞与细胞分开。
常用的酶制剂及其生产厂家有:
纤维素酶有Cellulase Onozuka R-10 (Kinki Yakult Manuf. Co. Ltd., Nishinomiya, 日本),Cellulase Onozuka RS (Kinki Yakult Manuf. Co. Ltd., Nishinomiya, 日本),Cellulase (Sigma),Driselase (Kyowa Hakko Kogyo Co.,日本)。果胶酶有Pectolyase Y23 (Kikkoman Shoyu Co., Lte. Nishinomiya,日本),Macerozyme(Yakult Biochemicles Co.,日本),Pectinase(Serva)等。半纤维素酶有Rhozyme Hp-150 (Rohm and Haas Co. inde. 美国宾西法尼亚州)。
大多数植物分离原生质体时,纤维素酶浓度在1%-3%,果胶酶在0.1%-1%,但也有很多例外。
3. 渗透压:
原生质体操作需要在一定渗透压存在下进行,常用的配制分离原生质体酶液的溶液以及洗涤原生质体的溶液为CPW液,CPW盐成分为:
KH2PO4 27.2mg/L
KNO3 101.0mg/L
CaCl2.2H2O 1480.0mg/L
MgSO4.7H2O 246.0mg/L
KI 0.16mg/L
CuSO4.5H2O 0.025mg/L
pH 5.8
根据渗透剂的浓度和成分可分为以下几种培养基:
CPW13M: CPW盐+13%甘露醇(mannitol)
CPW9M: CPW盐+9%甘露醇
CPW21S: CPW盐+21%sucrose
CPW0M: CPW盐溶液。
多数情况下,甘露醇是常用的渗透剂,可能是由于它的钝性及扩散入原生质体的速度很慢的缘故,这样一来能保证一个稳定的渗透压。
4. 分离培养基:
钙、镁离子很重要(?);有时需要激素;PVP有时能增加原生质体产量。分离原生质体的培养基用量一般为10mg/g组织。
5. 培养条件:
最主要的是酶处理时的温度和pH。不同的酶需要的pH值不一样,但pH大于6时不利于原生质体生存。一般而言,分离原生质体的培养时间与温度成反比,可是高温下短时间分离的原生质体不适于培养,他们易发褐和破裂。但酶处理时间一般不超过24小时。一般常用温度是23-320C。酶处理时一般在暗处培养。叶片分离原生质体可在静置条件下进行,悬浮细胞由于壁厚,培养(分离)过程中间断低速震荡有利于酶渗透。
6. 组织前处理: 主要目的是便于原生质体分离和促进细胞分裂
高渗前处理
激素处理
低温处理
激素处理与低温处理结合使用
(三) 原生质体的收集、纯化与活力测定
经酶解处理后,得到的混合物是一个由原生质体、细胞团与细胞碎片等组成的混合液,只有将杂质和酶液去掉,使原生质体纯化,才能进行培养。
1. 收集:
原生质体混合液用滤网(40-100µm)去掉没有降解的细胞及组织,收集滤液.
2. 洗涤:
将网下物低速离心,去掉上清液,再加无酶液的CPW液悬起原生质体,再离心,弃上清,重复几次即可.
3.纯化:
采用上浮法和下沉法两种纯化方法。上浮法是将酶解的原生质体与蔗糖溶液(23%左右)混合,下沉法是先将原生质体与13%的甘露醇混合,然后加到23%的蔗糖溶液顶部,形成一个界面。两种方法中,均在100´g下离心5-10分钟,会在蔗糖溶液顶部形成一条原生质体带。用吸管将带轻轻地吸出来,用培养基悬浮离心,然后稀释到104-105/ml,用于培养。
4. 活力测定:
原生质体培养前通常要进行活力检查,以便知道其状态是否正常。测定原生质体活力的方法主要有观察胞质环流(Cytoplasmic streaming)、测定呼吸强度和FDA染色,其中最常用的是FDA法。FDA是荧光素双醋酸酯(Fluorescein diacetate,FDA),常用丙酮配置成2mg/ml溶液,在冰箱(4°C)中保存。FDA本身没有极性,无荧光,可以穿过细胞膜自由出入细胞,在细胞中不能积累。在活细胞中,FDA经酯酶分解为荧光素,后者为具有荧光的极性物质,不能自由出入细胞膜,从而在细胞中积累。在紫外光照射下,发出绿色荧光。相反如果是死细胞,则不会发出绿色荧光。
三、原生质体培养
1.原生质体计数
原生质体培养前必须调到一定密度,即确定每毫升培养基中含多少原生质体.用CPW13M悬浮原生质体,血球计数板计数,计算稀释倍数,离心,去除CPW13M,用所算体积的培养基悬起原生质体,用于培养.
2.原生质体培养
主要有三种方法:
(1)液体浅层培养(Liquid thin layer culture)
原生质体纯化后,将原生质体悬浮于液体培养基中,取少许于培养皿底部形成很薄的一层,封口进行培养。
(2)固体培养(Solid culture)
也叫琼脂糖平板法(Agarose plate culture)或包埋培养法(Embedding culture)。将原生质体悬浮于液体培养基后,与凝固剂(主要是琼脂或低熔点琼脂糖,LMT agarose)按一定比例混合,在培养皿底部形成一薄层,凝固后封口培养。
(3)固液双层培养法(Solid over liquid culture)
此法结合液体浅层培养和固体培养的优点,在培养皿底部先铺一层固体培养基,待凝固后再在其上进行液体浅层培养。固体培养基中的营养成分可以被液体层中的原生质体吸收利用,而原生质体产生的有毒物质可以被固体培养基吸收。
植板率(Plating efficiency,即形成愈伤组织的原生质体数量占所培养原生质体总数的百分比).
3.细胞再生
(1)细胞壁的形成
原生质体培养后经过一段时间会再生出细胞壁,原生质体在培养初期仍然为圆球形,随着培养时间的延长,逐渐变为椭圆形,此时表明已经开始再生细胞壁。不同植物原生质体培养再生细胞壁所需时间不一样,从几小时到几天。简单的鉴别壁的再生的方法是用荧光增白剂(Calcofouor White),专染纤维素,在荧光灯下发出荧光。一些因素影响壁的再生:①碳源;②培养条件——固体培养时细胞壁再生比液体培养时快;③渗透剂的种类。
(2)细胞分裂
第一次分裂通常发生在培养后2-5天,可在黑麦中需14天。
4.植株再生
具有再生能力的原生质体就会不断分裂,形成多细胞团。当细胞团进一步发育成为肉眼可见的小愈伤组织(Minicallus),要及时转移到分化培养基(Differentiation medium)中 ,培养与再生过程同一般的愈伤组织培养.
四、影响原生质体细胞分裂的因素
物理条件
密度: 低于一定密度不能分裂,一般培养密度为:5×103—5×105/ml。
光:一般原生质体首先在暗处培养一周利于壁形成和细胞再生。照光如何、什么时候照光、光强如何等,直接影响着植板率。
温度:通常22-250C。
化学因素
(1)培养基:
即使来源于同一种基因型的原生质体,在不同培养基中的再生能力也不一样。许智宏等(1982,1984)发现在形成细胞团的数量上,KM5P和KM5都不如B5P培养基,但对细胞的持续分裂来说,KM5P和KM5又优于B5P培养基。培养基中的附加物质也会影响到原生质体培养效果,如培养基中的激素 、无机盐组成、氨基酸、有机酸等。MS铁盐一般对原生质体培养是有害的,50µM较合适,因为高铁能降低培养基的pH。
常用的KM8P培养基含有丰富的有机成分,包括维生素、AA、有机酸、核苷酸、糖及糖醇等,已经证实有机酸(丙酮酸、苹果酸、柠檬酸、延胡索酸)可以提高烟草原生质体的植板率。一些研究证明多胺类物质对原生质体发育有影响,培养基中添加腐胺、精胺、亚精胺及精氨酸可以促进巴旦杏原生质体发生分裂。生长素的使用量一定要小心确定,因为它很易使液泡长大或增加新液泡,从而使细胞破裂。
(2)渗透压调节剂
培养的原生质体随发育进程需要不断降低渗透压,以促进细胞分裂。
物的原生质体培养基中,以蔗糖和果糖作碳源和渗透压稳定剂时,细胞不能持续分裂,而用葡萄糖时,原生质体能持续分裂并形成细胞团。 现在一个趋势是将蔗糖或葡萄糖单独使用或与甘露醇结合作为稳定剂,一旦糖被降解,培养基渗透压降低,很利于细胞分裂。
3.原生质体来源
分离原生质体所用外植体的生理状态与原生质体的质量和其后的分裂频率有着密切的关系。如在小麦原生质体培养中,3-6月龄的悬浮细胞系分离的原生质体分裂率比1月龄的原生质体高。
4.基因型
基因型与原生质体培养及形态分化有一定的关系,同一植物不同基因型的原生质体脱分化与再分化所要求的条件不一样,造成不同品种在相同条件下的再生能力也会不同。
5.微电流处理
已经发现微电流处理能够促进三叶草、白芷、石防风、梨属、李属、大豆属和茄属植物原生质体细胞壁再生,提高分裂频率,促进细胞团的形成