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1比3福林试剂如何配置

发布时间: 2022-08-23 00:04:40

⑴ 怎么配2mol/l的福林酚试剂

在2升磨口回流瓶中,加入100克钨酸钠(Na2WO4·2H2O),25克钼酸钠(Na2MoO4·2H2O)及700毫升蒸馏水,再加50毫升85%磷酸,100毫升浓盐酸,充分混合,接上回流管,以小火回流10小时,回流结束时,加入150克 硫 酸 锂(Li2SO4),50毫升蒸馏水及数滴液体溴,开口继续沸腾15分钟,以便驱除过量的溴。冷却后溶液呈黄色(如仍呈绿色,须再重复滴加液体溴的步骤)。稀释至1升,过滤,滤液置于棕色试剂瓶中保存。使用时用标准NaOH滴定,酚酞作指示剂,然后适当稀释,使最终的酸浓度为2mol/l左右。

⑵ 福林试剂的介绍

福林试剂,是多种化合物配制成的混合物,可用比色法测定。

⑶ 福林肖卡试剂怎么配制

福林-肖卡试剂的配制:取钨酸钠10g,钼酸钠2.5g,加水70mL,85%磷酸5mL,盐酸10mL,置于200mL烧瓶中,缓缓加热回流10h,放冷,再加入硫酸锂15g,水5ml与溴水1滴煮沸约15minn,至溴除尽,放冷至室温,加水使成100mL,过滤。滤液不能呈绿色,置于棕色瓶中,于冰箱中保存。临用前用蒸馏水稀释l0倍使用。

⑷ Folin-Ciocalteu 试剂如何配制

FoLin-CiocaLteu试剂的配制:将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水,50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中,充分混合,文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴,然后将烧瓶内溶液开口煮15min,以驱除过量的溴,冷至室温后用容量瓶定容至1000mL,过滤。滤液呈微绿色。
吸取10 mL 1 moL/ mL的Na0H溶液,放入100 mL锥形瓶内,加入2滴酚酞指示剂,用上述滤液滴定。当溶液的颜色由绿经紫红到紫灰,到突然转变成墨绿色即为滴定终点。根据滴定所用的滤液量计算其酸度(相当于2 moL/ L HCL溶液)。将滤液稀释到H+浓度为1 moL/ L,此液即为FoLin酚试剂。将其置于棕色试剂瓶内,保存在冰箱中。用前稀释2倍。

⑸ 您好,能告诉福林酚试剂的试剂配制方法吗谢谢

olin—酚试剂法(Lowry法)
这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是:?在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。 Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原,产生深兰色(钼兰和钨兰的混合物)。在一定的条件下,兰色深度与蛋白的量成正比。 Folin—酚试剂法最早由Lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生物化学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时间较长,要精确控制操作时间,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰Lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、硫酸铵、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素(0.5%),硫酸纳(1%),硝酸纳(1%),三氯乙酸(0.5%),乙醇(5%),乙醚(5%),丙酮(0.5%)等溶液对显色无影响,但这些物质浓度高时,必须作校正曲线。含硫酸铵的溶液,只须加浓碳酸钠—氢氧化钠溶液,即可显色测定。若样品酸度较高,显色后会色浅,则必须提高碳酸钠—氢氧化钠溶液的浓度1~2倍。 进行测定时,加Folin—酚试剂时要特别小心,因为该试剂仅在酸性pH条件下稳定,但上述还原反应只在pH=10的情况下发生,故当Folin一酚试剂加到碱性的铜—蛋白质溶液中时,必须立即混匀,以便在磷钼酸—磷钨酸试剂 被破坏之前,还原反应即能发生。 此法也适用于酪氨酸和色氨酸的定量测定。 此法可检测的最低蛋白质量达5mg。通常测定范围是20~250mg。

⑹ 如何使用Folin

实验原理:
采用Folin-酚法测定,Folin-酚试剂由甲试剂和乙试剂组成.甲试剂由碳酸钠,氢氧化钠,硫酸铜及酒石酸钾钠(KNaC4H4O6•4H2O)组成.多肽中的肽键在碱性条件下,与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用,生成紫红色络合物.乙试剂是由磷钼酸、磷钨酸、硫酸和溴等组成.此试剂在碱性条件下,易被多肽中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应,其色泽深浅与多肽含量成正比[28].
实验所需试剂的配置:
(1) 试剂甲:(A) :10g Na2CO3,2g NaOH和0.25g酒石酸钾钠(KNaC4H4O6•4H2O),溶解于500mL去离子水.(B) :0.5g 硫酸铜(CuSO4•5H2O)溶解于100mL 去离子水中;将50份(A)与1份(B)混合,即为试剂甲.
(2) 试剂乙:将Folin-酚试剂与去离子水按1:1混合.
(3) 标准蛋白质溶液:精确称取结晶牛血清蛋白,溶于去离子水中,浓度为250μg/mL左右.牛血清蛋白溶于水,若混浊,可改用0.9%(质量分数)NaCl溶液.
(4) 样品溶液:通常根据样品中蛋白含量的不同,样品在测定前需要进行适当倍数的稀释.
实验步骤:
(1) 标准曲线的测定:取16支大试管,1支作空白,3只留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 mL标准蛋白质溶液(浓度为250μg/mL).用水补足到1.0 mL,然后每支试管加入5mL试剂甲,在漩涡混合器上迅速混合,于室温(20-25℃)放置10 min.再向各个试管加入0.5mL试剂乙,同样立即混合.然后在室温下放置30 min,以未加蛋白质溶液的第一支试管作为空白对照,于700nm处测定各试管中溶液的吸光度值,以蛋白质的量为横坐标,吸光度值为纵坐标,绘制出标准曲线.
(2) 样品的测定:取1mL 样品溶液(其中蛋白质含量约20-25μg),按上述方法进行操作,取1mL水代替样品作为空白对照.

⑺ folin-ciocalteu 试剂 怎么配

Folin-Ciocalteu(福林-西奥卡特)试剂即Folin-酚试剂中的试剂Ⅱ。(不包括用氢氧化钠标准滴定溶液滴定)滤液应呈金黄色,如呈绿色,弃去。置于冰箱中。使用时,1 体积用2 体积水稀释。此试剂能被许多酚如苯酚、间甲酚、对甲酚、对氯间甲酚和对氯酚等碱性溶液还原而呈现蓝色,因此常用于酚的光度测定。食品中的抗氧化剂丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT )及没食子酸丙酯(PG)在比色测定其含量均用Folin-酚试剂Ⅱ做显色,呈蓝色,但试样中不能有还原剂存在。
Folin-酚试剂(用于蛋白质含量的比色测定)
试剂Ⅰ:由下述四种溶液组成。
A .4%碳酸钠
B.0.2mol/l 氢氧化钠溶液
C.1%硫酸铜溶液(无水硫酸铜)
D.2%酒石酸钾钠(或酒石酸钾、酒石酸钠)
在使用前,将A 与B 等体积混合,将C 与D 等体积混合。然后将这两种溶液按照50:1的比例混合,即Folin-酚试剂Ⅰ。该试剂只能放一天,过期失效。
试剂Ⅱ:
在2 升的磨口回流装置中加入100 克二水钨酸钠,25 克二水钼酸钠,700 毫升水,再加50 毫升85%磷酸及100 毫升浓盐酸,充分混合后,以小火回流10 小时。再加入150 克硫酸锂,50 毫升水及数滴液溴,然后开口继续沸腾15 分钟,以便驱除过量的溴。冷却后定容成一升。过滤,置棕色瓶中,保存在冰箱中。使用时用氢氧化钠标准滴定溶液滴定,以酚酞做指示剂,而后适当稀释(约1 倍),使最后浓度为1mol/l H+(1N 酸),此即为Folin-酚试剂Ⅱ应用液。贮于冰箱中可长期保存
这个试剂可以直接

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