受试物配置过程中考虑哪些问题

① 化学配置溶液实验的心得

配置溶液是化学实验里最基本的操作之一，不必紧张。配制溶液也分为好多种，不知道是要做哪一种实验；

化学是建立在实验基础上的科学，与物理学不同，配置容易的时候一定要注意操作的准确性，以提高实验的精确度，配制溶液一般是一个实验的开始步骤，开始步骤出错，下面的实验就无法进行。

(1)受试物配置过程中考虑哪些问题扩展阅读：

用液体试剂配制：

根据稀释前后溶质质量相等原理得公式：

ω1ρ1 V1= ω2ρ2 V2

ω1：稀释质量分数ρ1 ：密度V1：欲配溶液体积

ω2：浓溶液质量分数ρ2：密度V2：需用浓溶液体积

② 配置培养基的基本步骤有哪些应注意什么问题

培养基的配置应该注意的几大步骤：
1、常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净，晾干后备用。
（1）平皿用纸或布包好，或装在金属盒内，于121℃高压蒸汽菌3min后烘干，备用。
（2）试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好，再用布或报纸包扎好，121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干，备用。
（3）吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端（防止污染物吸出，或橡皮帽内的气体污染），然后用纸包后或装入金属吸管筒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。其他玻璃器皿均应按上法处理，也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后，备用。
2、培养基的制备及储存
（1）溶化：一般应放在玻璃器皿或搪瓷齐内。加入蒸馏水，隔水加热以促其溶解，加热时应经常搅拌，防止焦结，待其溶解后补足水分。
在使用干燥培养基时，先将蒸馏水按定量加入容器中，然后称取一定量培养基干粉放入水中，静置10—15min，搅拌，振荡，或延长时间以促进溶解，一般不要热，必要时加热，但时间不宜过长，温度不宜过高，避免某些营养成分被破坏。
（2）校正酸碱度（调节pH）：培养基必须有适当的pH。因此测定pH是培养基配制过程中的重要步骤之一，测定pH的标准温度为25士2℃。调节pH可用无菌的1mol/l氢氧化钠溶液或10%碳酸钠溶液、1mol/l盐酸溶液。当调节缓冲液的pH时，宜用6mol/l磷酸或10mol/l氢氧化钾溶液。灭菌后的pH会比灭菌前的pH升高或降低，一般高压灭菌前培养基的pH会比最终pH调高0.2左右，灭菌后基本合适。因此对培养基、缓冲液、试剂在灭菌前后的pH均进行测定，并记下每次pH的测定结果，有助于积累数据考察每种培养基、缓冲液、试剂对灭菌程序的耐受性，从而指导灭菌前pH的调节。干燥培养基一般已校正过pH，用时也必须再验证。测定时，一般用指示剂滴入培养基观察其颜色的变化，或用pH计校正，如与所需pH不符，可用以上的酸或碱液加以校正。调整pH后要加热过滤，使培养基澄清。( 更多质量检测、分析测试、化学计量、标准物质相关技术资料请参考中国标准物质 www.rmhot.com)
（3）培养基的分装：大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后，均要对分配器的管道系统进行冲洗，在分装无菌培养基前，则要采用无菌硅胶管。
固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中，高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。
平皿：倾注平皿，应在无菌室中放置3—4h，如用塑料平皿须在35℃培养箱 中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。
斜面：制备低层斜面分装于试管，约占容积1/5，灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上，使成斜度，分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基，如沾有培养基应用布抹去，以避免污染。
高层斜面：制备高层斜面分装于试管，约占试管容积的1/3，灭菌后趁热放置成高层短斜面，待其凝固后应用。
分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天（2h内最佳）进行灭菌处理。液体、半固体培养基一般在高压灭前分装，约装试管容积的1/3，在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基，灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中。
培养基的灭菌：培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌，各种培养基的灭菌时间和压力，按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、103.42kPa灭菌15min，但容器和装量较大时，应延长至20min。含糖培养基115℃、68.85kPa灭菌30min。含糖、血清、 鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min，连续3d，间歇灭菌。血清或组织液，采用低热56—58水浴1h，连续5—6d灭菌，一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等，可用细菌过滤器，过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行，必须逐渐加热，彻底排除灭菌器内的空气，再逐渐升压保持预定的压力和时间，达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认，如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、68.85kPa灭菌30min为好。
通过无菌技术为测试制备的每一批培养基其PH在放冷至室温（25°）后，都应测定。一个扁平的pH计用于培养基表面pH值的测定，浸入式的pH计用于液体的测定。各供应商提供的培养基的pH应该在规定的±0.2的范围内，除非通过验证得到更宽的范围
注意：按配方计算培养基中各种成分的用量→称量,（一般动作要迅速一些,因为其中可能有些成分容易吸潮）→溶化（将称好的各种成分溶解在水中,如果是固体培养基,需要使用凝固剂,如琼脂等,熔化时,注意搅拌,防止糊底）→调pH→灭菌（高压蒸汽灭菌）→倒平板
1）确认培养基的成分,并精确称量；
2）加入各个成分的顺序；
3）准确调pH；
4) 适当的灭菌方法；
5）无菌条件下分装.

③ 用高锰酸钾配制标定溶液时，应注意什么问题

高猛酸碱溶液的配制需要提前配制,不能现配现用.能标定高锰酸钾的基准物质相当多,如草酸钠、二水合草酸、纯金属铁丝等,一般采用草酸钠来标定.
2MnO4- +5C2O42- +16H+ = 2Mn2+ +10CO2 ↑+8H2O
标定时因注意温度、酸度、滴定速度、催化剂、指示剂和滴定终点.
1.温度 在室温下,这个反应的速率缓慢,因此常将溶液加热至70-85℃（一般是水浴加热到刚好冒蒸气）时进行滴定.但温度不宜过高,若是高于90℃,会使部分草酸发生分解.
2.酸度 酸度过低,高锰酸钾易分解为二氧化锰；酸度过高,草酸亦易分解.一般滴定开始时的酸度应控制在0.5-1mol/L
3.滴定速度 开始滴定时的速度不宜过快,否则加入的高锰酸钾溶液来不及与草酸根离子反应,即在热的酸性溶液中发生分解
4.催化剂 开始加入的几滴高锰酸钾溶液褪色较慢,随着滴定产物锰离子的生成 ,反应速率逐渐加快.因此,常在滴定前加入几滴硫酸锰作为催化剂
5.指示剂 高锰酸钾自身可作为滴定时的催化剂,但是用浓度低至0.002mol/L高锰酸钾溶液作为滴定剂时,应加入二苯胺磺酸钠或1,10-邻二氮菲-Fe（Ⅱ）等指示剂来确定终点
6.滴定终点 用高锰酸钾溶液滴定至终点后,溶液中出现的粉红色不能持久,这是因为空气中的还原性气体和灰尘都能使高锰酸根还原,使溶液的粉红色逐渐消失.所以,滴定时溶液中出现的粉红色如在0.5-1min内不褪色,即已达到终点.

④ 配制培养基过程中应该注意什么问题

1、为确认工作细胞库是否受到污染，病毒种子的工作种子批次是否受到污染，培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否受到污染，可通过细菌、真菌、支原体无菌试验确认和消除。同时，还应验证无菌试验介质的灵敏度。

实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。

2、高压灭菌设备和过滤灭菌设备应进行验证，以确保灭菌灭菌效果；高压灭菌设备调试前后每6个月进行一次验证，每灭菌前后（灭菌后至少一次）进行验证。

3、有毒区域应严格与无毒区隔离，并应设置独立的空气净化系统和培养箱。毒性区应在无毒区保持相对负压，防止病毒污染培养细胞（特别是细胞库）。

4、在基本培养基中加入抗生素，野生型菌株被杀死，营养缺陷型不能在基本培养基中生长而被保留下来。

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配制培养基过程中的其它相关介绍：

培养基各成分完全溶解后，应进行pH的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2。而肠浸液pH却会有显着的升高。

因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终pH，保证培养基的质量。pH调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。