胶回收的胶怎么配置
① 现在橡胶制品回收后怎么用
作为废品处理,粉碎成橡胶粉,用来生产再生胶,或用来做填充。
② 我准备开始做DNA胶回收,之前查资料说低浓度的胶易回收,那一般在多少范围内呢另外我用的是Goldview核酸
要看你回收片段的长度决定用胶的浓度,长度约大胶浓度可以越小。一般1%左右
GoldView染色,可在自然光下切割DNA条带,对DNA损伤小
③ 抽提的质粒,跑完胶后,怎么进行胶回收
在紫外照射下,将目的带切下来。用胶回收试剂盒回收。
什么??
没试剂盒?
那低熔点胶有没???在目的带的途中,挖坑,填上低熔点胶,时常用紫外观察,目的带一旦进入,将其取出,混在低熔点胶里,稍微加热,加水即可用。
什么??没低熔点胶???那V型电泳槽有没,有的话将目的带切下,放到v型槽入口,v型槽内装入高浓度缓冲液,带目的带进入v型槽,吸出,乙醇沉淀后,加水就可以啦。
上面的配置,总有一个你有吧!
④ 胶回收以后至少需要多少的浓度才可以做
双酶切胶回收后片段浓度大概多少
如果你是测紫外定浓度,来判断酶切是否完全,这个方法是不靠谱的.只能大致判断你的回收效率.
要验证是否酶切完全,一是看跑胶时的条带数(也不完全靠谱,比如少量质粒没切开,但形成的条带弱,看不见),二是通过连接转化实验,看其自连情况如何.
想把质粒切好,主要是把酶切实验做好,时间、温度、酶量控制好.
⑤ 求助PCR产物胶回收的问题
胶回收是胶回收,纯化是纯化。胶回收的过程也能达到纯化的目的,只是因为要跑胶要稍麻烦些,一般用于产物特异性不大好时。纯化相对就要省事多了,但不适用有非特异扩增的产物
⑥ dna胶怎么配
就是琼脂糖凝胶,要是分子量大的DNA就配1%的胶,就是取1g琼脂糖+100ml的TAE缓冲液,微波炉高火加热至沸腾(沸腾2-3次),降温到50℃左右时加入EB,混匀后倒入制胶架中,一小时以后就可以使用了。
琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂糖,琼脂糖的熔点在6265°C之间。
融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的分离。
琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下。
它的结构是稳定的,可以在许多条件下使用(如水,pH4-9范围内的盐溶液)。琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化,也不能高压消毒,可用化学灭菌活处理。
琼脂糖 Agarose,缩写为AG,是琼脂中不带电荷的中性组成成份,也译为琼胶素或琼胶糖。琼胶糖化学结构由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基单位构成.
⑦ 琼脂糖凝胶怎么配制
把琼脂糖,即几乎不含硫酸根的主要成分为多糖的琼脂,溶于热水,倒入玻璃杯中,冷却制成的凝胶。融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。即完成琼脂糖凝胶的配置。
制成的小颗粒用于凝胶过滤,适于用sephadex不能分级分离的大分子的凝胶过滤,若使用5%以下浓度的凝胶,也能够分级分离细胞颗粒、病毒等。利用其吸附性小的特点,有时用它代替琼脂、以作为免疫电泳或凝胶内沉降反应的支持物。
(7)胶回收的胶怎么配置扩展阅读:
琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂糖,琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的分离。
琼脂由琼脂糖和琼脂果胶两部分组成:
作为胶凝剂的琼脂糖是不含硫酸酯的非离子型多糖,是形成凝胶的组分,其大分子链链节着1,3苷键交替相连的β-D-半乳糖残基和3,6-内醚-L-半乳糖残基 。而琼脂果胶是非凝胶部分,是带有硫酸酯、葡萄糖醛酸和丙酮酸醛的复杂多糖,也是商业提取中力图去掉的部分。
商品琼脂一般带有2%~7%的硫酸酯,0%~3%的丙酮酸醛及1%~3%的甲乙基。在工业上的琼脂 色泽由白到微黄,具有胶质感,无气味或有轻微的特征性气味,琼脂不溶于冷水,易溶于沸水。
琼脂系选用优质天然石花菜、江蓠菜、紫菜等海藻为原料,采用科学方法精炼提纯的天然高分子多糖物质。
琼脂为亲水性胶体,分有条状和粉末状,不溶于冷水,易溶于热水。琼脂在工业上具有独特的重要性,琼脂的浓度即使低至1%仍能形成相当稳定的凝胶,是食品工业、化学工业、医学科研所必需之原料。
⑧ 胶回收产物的浓度怎么算
胶回收产物的浓度计算:酶能解开的质粒在微克级别,跑胶一般肉眼能看到的是在纳克级别。胶回收的回收效率一般达到50%,回收肯定会有损失。
一般的线性Marker都有浓度标识。取1ul样品,再取若干体积确定浓度的Marker,肉眼基本可判断回收DNA片断的质量。
如果是测紫外定浓度,来判断酶切是否完全,这个方法是不靠谱的,只能大致判断回收效率,要验证是否酶切完全,一是看跑胶时的条带数,二是通过连接转化实验,看其自连情况如何。
称取空离心管的重量
切下带目的片段的凝胶装在1.5ml离心管中并称其重量,求出凝胶块的重量,近似地确定其体积。一般情况下,凝胶的密度为1g/ml,于是凝胶的体积与重量的关系可按下面换算:凝胶薄片的重量为0.2g 则其体积为0.2ml;加入等倍凝胶体积的Binding Buffer,把混合物置于55℃~65℃水浴中温浴7min至凝胶完全融化,其间每隔2-3分钟混匀一次。