丙烯酰胺如何配置
❶ 1mg/ml丙烯酰胺标准溶液配制为什么避光低温保存
SDS-PAGE中 30%的聚丙烯酰胺溶液是需要避光保存的，因为N,N-亚甲基双丙烯酰胺对光敏感。
遇高温或强光则自交联。
另外TEMED也是需要避光保存的，过硫酸铵溶液需要低温保存。
❷ 你知道变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的那个胶是怎么配置的需要哪些必备药品还有用水平电泳可以吗
我把我们实验室的实验讲义发给你，供你参考。
你做的应该是蛋白质的电泳吧，只能用垂直电泳。水平电泳用于分离DNA或RNA。
实验十一 SDS-PAGE检测表达蛋白
1．目的
学习SDS-PAGE的基本操作，学会用SDS-PAGE检测蛋白。
2．原理
蛋白质在加热变性以后与SDS结合，带上负电荷，在电场的作用下，向正极移动，结果按分子量大小排列在胶板上，含量多的蛋白带纹粗。
3．器材
旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml 微量离心管，双面离心管架，台式冷冻离心机，制冰机，超声波破碎仪，电磁炉，电泳仪，垂直电泳槽及配套的玻璃和密封条、梳子等，摇菌试管，三角烧瓶，接种环，饭盒。
4．试剂
SDS（十二烷基磺酸钠），Acr（丙烯酰胺），Bis（N,N’-亚甲基双丙烯酰胺），Tris（三羟甲基氨基甲烷），甘氨酸，盐酸，Aps（过硫酸氨），TEMED（四甲基乙二胺），蛋白分子量标准（97.4，66.2，43，31，20.1，14.4 kDa），溴酚蓝，甘油，冰醋酸，乙醇，b-2-巯基乙醇，考马斯亮蓝R250，甲醇，乙醇。
5．实验准备
1.0mol/L Tris HCl，pH8.8（4°C保存）；0.5mol/L Tris HCl，pH6.8（4°C保存）；10%SDS（室温保存）；30%Acr/Bis（30g Acr+0.8g Bis dd water 定容至100mL，4°C保存）；10%Aps （-20°C保存）；2´上样缓冲液（0.5mol/L Tris HCl，pH6.8 2mL，甘油2mL，20%SDS 2mL，0.1%溴酚蓝 0.5mL，b-2-巯基乙醇 1.0mL，dd water 2.5mL，室温存放）；5´电泳缓冲液（Tris 7.5g ，甘氨酸36g，SDS 2.5g，加dd water至500mL，使用时稀释五倍）；考马斯亮蓝染色液（考马斯亮蓝R250 0.25g + 45ml甲醇+10mL冰醋酸，用dd water定容至100mL）；脱色液（95%乙醇：冰醋酸：水= 4.5：0.5：5，体积比）；
6．操作步骤
（1） 将表达后的菌体与2´上样缓冲液按1：1混匀于微量离心管中。
（2） 用超声波破碎仪脉冲10次，每次10秒。中间间隔时放入冰中降温。注意一定要将超声波探头插入容液底部，在溶液表面或上部时容易起泡！
（3） 将上述微量离心管插入水漂中，放在电磁炉锅里的沸水中煮3~5min。然后立即插入冰中。（可在-20°C冰柜中保存）。
（4） 组装电泳玻璃并用细橡胶管密封底部和侧面然后用夹子夹住（观察教师的演示）。插入梳子后在玻璃上距离梳子齿底部1cm的地方做一个标记。
（5） 配制10%分离胶。按顺序和量取下列溶液混在一个50mL的小烧杯中（注意Tris为 pH8.8）：
Acrylamide-bis 3.96 mL
1M Tris PH8.8 4.38 mL
d.d Water 3.432 mL
10% SDS 118.8 mL
TEMED 9.9 mL
10%APS 118.8 mL
（6） 加完APS后拿起烧杯轻轻转动几下底部将溶液混匀后，立刻缓缓倒入玻璃夹缝中，直到液面与所作的标记齐平。剩下的胶液留在小烧杯中，倾斜放置。然后在上部用1000ml微量移液器轻轻地沿玻璃壁来回移动加满dd water（尽可能不破坏下面的胶液）。然后静置30min。直到烧杯中剩余的溶液凝固。倒出蒸馏水，并倒置玻璃尽可能将水倒尽。
（7） 配支持胶。按顺序和量（注意体积单位！）取下列溶液混在一个50mL的小烧杯中（注意Tris为 pH6.8）：
Acrylamide-bis 0.675 mL
0.5M Tris pH6.8 0.563 mL
dd water 3.165 mL
10% SDS 45 mL
TEMED 7.5 mL
10% APS 45 mL
（8） 加完APS后拿起烧杯轻轻转动几下底部将溶液混匀后，立刻倒入玻璃夹缝中，液面与玻璃上边缘齐平。然后再慢慢插入梳子，静置约20min。烧杯中剩下的溶液倾斜放置直到溶液凝固。（此状态可以用塑料薄膜包起来放入冰箱过夜）。
（9） 小心拔出梳子以后，用注射器针头（剪平尖部）吸取梳子齿形成的加样槽中的水，并修平加样槽底部的胶面。
（10） 选取几个形态好的加样槽，在一张纸上做好对应的标记，用微量移液器在侧面的一个加样槽中加入20mL 蛋白分子量，其它槽中加入10～20mL自己制作的样品。
（11） 加完样品后，再用微量移液器吸取电泳缓冲液小心把加样槽液面都补平。电泳槽上部倒满电泳缓冲液（约250ml,淹没过加样槽的液面！），电泳槽的下部倒入一半电泳缓冲液（约180ml）。
（12） 接好电极，将电流调至10mA，待溴酚蓝移到分离胶后，在将电流调至18mA，电泳约2~3h，期间随时观察电泳槽上部的液体是否有泄漏（泄漏导致液面下降，电流中断）！当溴酚蓝移到玻璃距底部0.5cm时切断电源。
（13） 在一个搪瓷盘里准备适量的考马斯亮蓝染色液。
（14） 倒掉电泳槽中的缓冲液，取下玻璃，小心用铲子从下部将带有缺口的玻璃板撬起（切不可损坏胶！）。用铲子切去上部的支持胶，并把分离胶从玻璃上剥离倒染液搪瓷盘里（切不可损坏胶！）。
（15） 染色2h后，在将染液倒回瓶子里以备重复使用。在饭盒里倒入脱色液，过夜。
（16） 观察脱色后胶里的蓝色带纹，与对照比较或寻找异常粗的带纹，并比较其分子量，判断是否是预期的基因产物。
（17） 清理桌面，写实验报告。
❸ SDS-PAGE凝胶制实验及其各实验试剂的配制方法
SDS-PAGE凝胶制备属于实验室最常规的操作了，刚开始做蛋白实验总是在找凝胶配制实验中所用试剂的配方，这里总结了分离胶、浓缩胶、分离胶和浓缩胶缓冲液、考马斯亮蓝染液、样品缓冲液、电泳缓冲液等配方。
1.
分离胶(12%)
配制
所需试剂
所需体积
分离胶(12％)
30％丙烯酰胺
6.0
ml
1.5
mol/l
Tris-HCl
3.8
ml
10%SDS
150
μl
10%过硫酸铵
150
μl
TEMED
6
μl
蒸馏水
4.9
ml
2.
浓缩胶(5%)
配制
所需试剂
所需体积
浓缩胶(5％)
30％丙烯酰胺
1.3
ml
1.5
mol/l
Tris-HCl
1.0
ml
10%SDS
80
μl
10%过硫酸铵
80
μl
TEMED
8
μl
蒸馏水
5.5
ml
3.
分离胶缓冲液(pH8.9)
配制
所需试剂
所需体积
分离胶缓冲液
Tris
36.6
g
1
mol/l
HCl
48
ml
蒸馏水
补足至100
ml
4.
浓缩胶缓冲液(pH6.7)
配制
所需试剂
所需体积
浓缩胶缓冲液（pH6.7）
Tris
5.98
g
1
mol/l
HCl
48
ml
蒸馏水
补足至100
ml
5.
30%丙烯酰胺(pH≤7.0)
配制
所需试剂
所需体积
30%丙烯酰胺（pH≤7.0）
丙烯酰胺
29
g
甲叉-双丙烯酰胺
1
g
蒸馏水
补足至100
ml
6.
10%过硫酸铵(W/V)：1g过硫酸铵溶于10ml水中，4℃保存数周，尽量现用现配。
7.
10%SDS：将10
g
SDS溶于80ml重蒸水中并轻缓搅拌(室温低时需水浴加热溶解)，再定容至100ml，室温存放。
8.
样品缓冲液
配制
所需试剂
所需体积
样品缓冲液
1
M
Tris-HCl（pH6.7）
5
ml
SDS
2.5
g
巯基乙醇
1
ml
溴酚兰
0.05
g
蔗糖
10
g
蒸馏水
补足至100ml
9.
考马斯亮蓝染色液：0.25g考马斯亮蓝R-250用少量甲醇溶解后，用甲醇(40ml)-乙酸(10ml)水溶液稀释至100ml。
10.
Tris-甘氨酸电泳缓冲液(pH8.3)
配制
所需试剂
所需体积
Tris-甘氨酸
电泳缓冲液（pH8.3）
Tris碱
15.1
g
甘氨酸
94
g
10％（W/V）SDS
50
ml
去离子水
补足至100
ml
凝胶配制所需试剂的母液不能放置太久，有条件的实验室可将母液保存在4度冰箱中，放置母液被微生物污染或者出现沉淀。
❹ 跪求聚丙烯酰胺的生产工艺
聚丙烯酰胺生产工艺有三种：水溶液聚合法、反相乳液聚合法和辐射引发法。
最推荐的一种：水溶液聚合法
是生产聚丙烯酰胺的传统方法。采用该法可以生产聚丙烯酰胺胶体和粉状产品。一般聚丙烯酰胺胶体是采用8%-10%丙烯酰胺水溶液在引发剂作用下直接聚合而得；聚丙烯酰胺干粉则多用25%-30%丙烯酰胺溶液进行聚合，聚合后得到的聚丙烯酰胺胶体经造粒、捏合、干燥、粉碎后制得产品。其中的聚合反应是关键工序。该法具有生产安全、工艺设备简单以及生产成本较低等特点，是目前国内外生产聚丙烯酰胺普遍采用的方法。中国采用该法生产聚丙烯酰胺最早采用手工作坊式的盘式聚合，后来采用捏合机。20世界80年代后期开发了锥形釜聚合工艺，由核工业部五部所在江都化工厂试车成功。20世纪90年代从国外引进的聚合技术，类似于国内的技术，只是反应釜可以旋转，聚合釜的容积也较大。
推荐理由：
是生产聚丙烯酰胺的传统方法。
采用该法可以生产聚丙烯酰胺胶体和粉状产品。
❺ 建筑用107胶水的制作与配置比列
107[丙烯酰胺晶体]建筑胶水新配方
本配方为生产一吨建筑胶水所需产品：
聚乙烯醇：10---12公斤
丙烯酰胺晶体：10--12公斤
过硫酸胺：20--25克
亚硫酸氢钠：20--25克
羧甲基纤维素[絮状]：4公斤
一：生产工艺在反应釜中加水150公斤，升温达到55度加入聚乙烯醇：10---12公斤，
继续升温到98度直至聚乙烯醇完全溶解。
二：加水200公斤降温至70度加入凯源丙烯酰胺晶体10--12公斤，搅拌直至溶解，温度至
68--70度时，停止加温，慢慢的边搅拌边加入引发剂过硫酸胺20--25克[20-25克引发剂
先用1000毫升水在其他容器内溶解]。
搅拌2分钟，加入稳定剂亚硫酸氢钠20-25克[20-25克稳定剂先用1000毫升水在其他容器内溶解]，
继续搅拌3分钟后停止搅拌，静态聚合时间不低于3小时，即得特稠胶体。
三：最后可以根据当地对建筑胶水要求在特稠胶体中加入提前一天用50公斤水溶解的4公斤羧甲基纤维素[絮状]溶液，
充分搅拌，使胶水总量达到1000公斤或更多。
注意事项：
1：丙烯酰胺晶体用凯源牌丙烯酰胺晶体。
2：过硫酸胺20--25克和亚硫酸氢钠20-25克在不同容器内用1000毫升水化开待用。
3：本胶水质量好，长时间保存不分水，批刮施工性能好，可调兑各种腻子。
4：成熟配方，可直接生产，各厂家可结合自己的配方生产。
5：过硫酸胺用量越多，反应速度越快，反应温度越高，但过硫酸胺的用量应该控
制在配方的范围之内。
6：如果需要加大生产量，温度不变，各种产品扩大一倍为二吨胶水配方。
7：可根据当地胶水要求加或不加羧甲基纤维素。
❻ 聚丙烯酰胺是如何制造的
聚丙烯酰胺是采用丙烯酰胺（acrylamide)为单体，通过过氧化苯甲酰（BPO)引发聚合而成的。
1.聚丙烯酰胺是采用丙烯酰胺（acrylamide)为单体，通过过氧化苯甲酰（BPO)引发聚合而成的。操作过程如下（或者你可查找有关高分子化学的书籍）：在三颈瓶中，将丙烯酰胺溶解在蒸馏水中（10%浓度），开始向体系通入氮气，30分钟后，加入一定量的BPO（BPO的投加量视你想得到多大分子量的聚丙烯酰胺而定，BPO加得越多，聚丙烯酰胺分子量就越小），装上回流冷凝管、搅拌装置，开始搅拌，并在同时水浴加热至50℃左右，反应开始，反应中应持续通氮气。随着反应进行，体系粘度增加。1小时后，反应停止。
2.将反应物倒于烧杯中，向烧杯中缓缓加入无水乙醇或丙酮，并不断搅拌，这是聚丙烯酰胺开始析出，当不再有白色固体析出时，将所得的白色固体于红外灯下烘干，研磨至粉末装即得聚丙烯酰胺。所得的聚丙烯酰胺通过测定粘度可以得出分子量（一般分子量500万左右）；使用BPO前，应用丙酮进行重结晶提纯后置于干燥器中阴冷处保存，否则聚合反应很难开始。
❼ SDS胶浓度怎么计算,比如怎么配置10％，12％，16％的分离胶，丙烯酰胺的量怎么确定，各个含量咋确定
按的是你丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量
与
胶总体积
的质量体积比（m/V）
首先你要将上述药品粉末按照19:1或29:1的比例用水配置成母液（一般为30%，也是m/V）
而10%，12%，16%你自然也就知道应该用多少的母液去配制了。相信如何配胶你是知道的。
❽ 聚丙烯酰胺如何复配
掺点无机盐混合均匀可以复配聚丙烯酰胺。
聚丙烯酰胺分类聚丙烯酰胺产品简介：聚丙烯酰胺（PAM）为水溶性高分子聚合物，不溶于大多数有机溶剂，具有良好的絮凝性，可以降低液体之间的摩擦阻力，按离子特性分可分为非离子、阴离子、阳离子和两性型四种类型。（注：聚丙烯酰胺不同于丙烯酰胺）
❾ 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的实验步骤
1、PAGE胶电泳缓冲液配置
1）丙烯酰胺单体贮液：14.55g丙烯酰胺加上0.45g N，N'-甲叉双丙烯酰胺，先用40mL双蒸水搅拌溶解，直到溶液变成透明，再用双蒸水稀至50mL，过滤。用棕色瓶4°C保存备用。
2)浓缩胶缓冲液贮液(0.5mol/L Tris-HCl，pH6.8)：3.03gTris溶解在40mL双蒸水中，用4mol/L盐酸调pH6.8。再用双蒸水稀至50mL。保存在4°C备用。
3)分离胶缓冲液贮液(1.5mol/L Tris-HCl，pH8.9)：18.16gTris溶解在80mL双蒸水中，用4mol/L盐酸调pH8.9。再用双蒸水稀至100mL，保存在4°C备用。
4)10%（AP）过硫酸铵：0.1g过硫酸铵溶入1.0mL双蒸水，使用前新鲜配制。
5)电极缓冲液(0.025mol/L Tris，0.2mol/L甘氨酸，pH8.3)：15.14gTris加上72.07g甘氨酸，用双蒸水稀释到5L。可在室温保存一个月。
6）样品缓冲液（0.1mol/L Tris-HCl，pH6.8）：2ml浓缩胶缓冲液贮液加上1mL87%甘油、0.1mg溴酚蓝，用双蒸水稀释至10mL，可在-20°C保存6个月。
2、Native-PAGE配方 分离胶： 双蒸水 6.6ml 30%丙烯酰胺溶液 8.0ml 1.5mol/L Tris(pH8.8) 5.0ml 10%过硫酸铵溶液 (W/V) 200μl TEMED 15μl 浓缩胶： 双蒸水 6.8ml 30%丙烯酰胺溶液 1.7ml 0.5 mol/ LTris(pH6.8) 1.25ml 10%过硫酸铵溶液 (W/V) 100μl TEMED 10μl 3、Native-PAGE电泳
将玻璃板、胶垫、梳子用双蒸水洗干净，用酒精棉球擦拭，将电泳槽安装好，配制分离胶(12%)和浓缩胶(5%)如表1。过硫酸铵和TEMED最后加入，加入后聚合即开始，应立即混匀倒入两块玻璃板之间。分离胶倒入两块玻璃板间，应该留下适合的高度，使点样孔前端离分离胶有2.5cm左右的距离，在胶顶部缓缓加入约0.5cm高的双蒸水，待分离胶聚合完全后，倾去上层的双蒸水，用双蒸水清洗凝胶顶层，用吸水纸吸去残余的水滴。将浓缩胶倒入玻璃板夹层，插上梳子，待浓缩胶聚合完全后，拔去梳子，立即用双蒸水清洗点样孔。加入电极缓冲液，将样品用微量进样器点入点样孔底部，200伏电泳。当溴酚蓝到达分离胶时，电压改为250伏，继续电泳至溴酚蓝到达凝胶底部。将凝胶剥下，浸泡在100ml的底物液中，染色1小时，待胶带显色后立即照相。然后将凝胶进行常规的考马斯亮蓝染色。
❿ 0.5mmol/L丙烯酰胺怎么配置
35.5mg丙烯酰胺加入到1L容量瓶内，加水至刻度线，摇匀即可。