藻濃度演算法

1. 如何測量水體葉綠素濃度，藍藻濃度，微囊藻濃度

可以使用儀器。。請你看以下的內容

因為水藻中也有葉綠體，所以可以檢測到湖泊里的藻類。

SPAD-502 葉綠素儀可以即時測量植物的葉綠素相對含量或「綠色程度」，從而可以了解植物真實的硝基需求量並且幫助您了解土壤硝基的缺乏程度或是否過多地施加了氮肥。您可以通過這種儀器來增加氮肥的利用率，並可保護環境（防止施加過多的氮肥而使環境特別是水源受到污染）。

原理：

SPAD-502 葉綠素儀通過測量葉片在兩種波長范圍內的透光系數來確定葉片當前葉綠素的相對數量。
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當然是PAM-2100和MINI-PAM了！

1983年，WALZ公司首席科學家、德國烏茲堡大學的Ulrich Schreiber教授設計製造了全世界第一台調制熒光儀——PAM-101/102/103，使在自然光下測量葉綠素熒光成為現實，解決了科學界近50年的技術瓶頸。PAM-101/102/103迅速在植物生理、生態、農學、林學、水生生物學等領域得到廣泛應用，出版了大量高水平研究文獻。但該儀器比較笨重，不易帶到野外。

1992年，WALZ公司首席科學家、調制熒光儀發明人、德國烏茲堡大學的Ulrich Schreiber教授設計製造了全世界第一台攜帶型調制熒光儀——PAM-2000，並且在植物生理生態學等科研領域得到廣泛應用，此後十幾年中成為全球最暢銷的調制熒光儀。

1996年，WALZ公司在濃縮PAM-2000功能的基礎上，設計製造了一台更加方便攜帶的超攜帶型調制熒光儀——MINI-PAM。該儀器對PAM-2000的功能進行了濃縮，更加適合野外操作友手，同時價格也更加便宜。

2003年，WALZ公司在保留PAM-2000所有功能和優點的基礎上，結合最新技術，將PAM-2000升級到了PAM-2100。

PAM-2100

系統描述
PAM-2100採用了獨特的調制技術和飽和脈沖技術，從而可以通過選擇性的原位測量葉綠素熒光來檢測植物光合作用的變化。PAM-2100的調制測量光足夠低，好襲嫌可以只激發色素的本底熒光而不引起任何的光合作用，從而可以真實的記錄基礎熒光Fo。PAM-2100具有很強的靈敏度和選擇性，使其即使在很強的、未經濾光片處理的環境下（如全日照甚至是10000 μmol m-2 s-1的飽和光強下）也可測定熒光產量而不受到干擾。因此，PAM-2100不但適合在實驗室人工控制的環境下測量，還可以在自然環境中甚至是強烈的全光照條件下開展野外科學研究。

PAM-2100是非常便攜、強大的測量系統，它將各種光學和電子元件組裝在一個24 cm×10.5 cm×11 cm的外殼中。測量光由655 nm的發光二極體（LED）發出，可在低頻（600 Hz）和高頻（20 kHz）間自動切換。光化光（光合生物實際可吸收利用進行光合作用的可見光）由鹵素燈（白光）或紅光LED（655 nm）提供。遠紅光（735 nm，促進光系統I迅速消耗掉在PQ處累積的電子）由LED發出。

PAM-2100的按鍵操作非常簡單。基礎測量只需單健操作。數據在內置電腦中自動分析、存儲並且在顯示屏上顯示。除了「參數窗」外，在「動力學窗」還可顯示曲線的實時變化。

PAM-2100利用光纖進行信號傳輸。光適應葉夾2030-B（專利產品）上配備微型光量子/溫度感測器，可在記錄熒光信號的同時，同步記錄光合有效輻射（PAR）和溫度變化。

PAM-2100內設10個標准Run（預先編好的間隔一定時間並按一定順序執行特定命令的程序），用戶只需一次按鍵就可進行復雜的實驗。用戶還可對這些標准Run進行編輯得到自己的User-Run（數量不限），來滿足特殊的實驗需要。
PAM-2100主機可以直接連接電腦（圓口）鍵盤，在野外現場，可以根據實驗需要，不需電腦就可以進行特殊程序的編輯。

PAM-2100還可以設定單機操作軟體DA-2100自動間隔一定時間執行某個Run或User-Run，而Run是可以無限擴展的，因此，可以說PAM-2100的功能幾乎可以無限擴展。只要將主機和葉夾（均可固定在三角架上）固定好，按一次按鍵，（人不在現場看守）儀器可以自動進禪罩行非常復雜的測量過程。

此外，PAM-2100主機還可以連接電腦顯示器或投影儀放大顯示，非常適合進行教學使用。

特點
1) 聲譽卓著的PAM-2000的升級版
2) 精巧、准確、迅速、操作簡便的高級光合作用檢測設備
3) 可單機操作（採用內置電腦，DA-2100軟體記錄），可連接外置電腦操作（Windows操作軟體PamWin）
4) 攜帶型設計，帶大屏幕液晶顯示屏（可顯示曲線變化）和20個按鍵
5) 強大的數據收集、分析和存貯功能
6) 可以預先編寫和設定程序，進行特殊研究目的測量
7) 內置鋰電池可滿足長時間野外工作需要，並可連接外置12 V電池
8) 多種葉夾可供選擇，專利設計的光適應葉夾2030-B可同時記錄PAR和溫度變化
9) 光源選擇：自然光，內置光源（提供測量光、光化光、飽和脈沖和遠紅光），可選外置鹵素燈光源（特別適合野外研究）

功能
1) 可測熒光誘導曲線的快速上升動力學O-I-D-P相和O-J-I-P相
2) 可測熒光誘導曲線的慢速下降動力學並進行淬滅分析（Fo, Fm, Fv/Fm, F, Fm, Fo』, dF/Fm』, qP, qN, NPQ, rETR等）
3) 可測光響應曲線和快速光曲線（RLC）
4) 儀器內置一系列標准實驗（Run1～Run10），用戶可對其進行編輯建立自己的User-Run
5) 可在線檢測植物、微藻、地衣、苔蘚等的光合作用變化
6) 單機操作功能強大，特別適合野外操作，實驗室內單機操作時可連接電腦顯示器或投影儀放大顯示

應用領域
儀器設計特別適合野外使用，可用於研究光合作用機理、各種環境因子（光、溫、營養等）對植物生理狀態的影響、植物抗逆性（乾旱、冷、熱、澇、UV、病毒、污染、重金屬等）、植物的長期生態學變化等。在植物生理學、植物生態學、植物病理學、農學、林學、園藝學、水生生物學、環境科學、毒理學、微藻生物技術、極地植物光合作用研究等領域有著廣泛應用。

10個標准Run
Run 1：測量實際量子產量Yield（ΔF/Fm』）
Run 2：測量最大量子產量Fv/Fm
Run 3：記錄誘導曲線並進行淬滅分析（采點率10 ms/點）
Run 4：記錄誘導曲線並進行淬滅分析（采點率30 ms/點）
Run 5：qN 的馳豫動力學
Run 6：快速誘導動力學O-I-D-P相（線性時間）
Run 7：快速誘導動力學O-J-I-P相（對數時間）
Run 8：光響應曲線（需76 min）（稍加編輯即可測量快速光曲線）
Run 9：光響應曲線（需33 min）（稍加編輯即可測量快速光曲線）
Run 10：儀器自檢

用戶可根據實驗需要，自行修改或編製程序。

MINI-PAM

MINI-PAM採用了獨特的調制技術和飽和脈沖技術，從而可以通過選擇性的原位測量葉綠素熒光來檢測植物光合作用的變化。MINI-PAM的調制測量光足夠低，可以只激發色素的本底熒光而不引起任何的光合作用，從而可以真實的記錄基礎熒光Fo。MINI-PAM具有很強的靈敏度和選擇性，使其即使在很強的、未經濾光片處理的環境下（如全日照甚至是10000 μmol m-2 s-1的飽和光強下）也可測定熒光產量而不受到干擾。MINI-PAM是野外光合作用研究的強大工具。
超攜帶型調制葉綠素熒光儀MINI-PAM的特點在於快速、可靠的測量光合作用光化學能量轉換的實際量子產量。此外，MINI-PAM秉承了WALZ公司PAM系列產品的一貫優點，通過應用調制測量光來選擇性的測量活體葉綠素熒光。基於創新性的光電設計和高級微處理器技術，MINI-PAM在達到超便攜設計的同時可以得到靈敏、可靠的結果。同時，MINI-PAM的操作非常簡單。
測量光合量子產量只需一個按鍵（START）操作即可，儀器會自動測量熒光產量（F）和最大熒光（Fm），並計算光合量子產量（Y＝ΔF/Fm），得到的數據會在液晶顯示屏上顯示同時自動存儲。此外MINI-PAM還有許多模式（MODE）菜單，包括熒光淬滅分析（qP、qN和NPQ）和記錄光響應曲線等，以滿足用戶的特殊需要。
連接光適應葉夾2030-B後，可以測量光合有效輻射（PAR）、葉片溫度和相對電子傳遞速率（rETR）。內置電池可以滿足1000次量子產量測量的需要，儀器內存可以存儲4000組數據。
Windows操作軟體WinControl可以進行數據傳輸、數據分析和遙控操作。
標准版的MINI-PAM採用紅光作為測量光。根據用戶需要，我們也可提供以藍光（470 nm）作為測量光的MINI-PAM。

特點
1）聲譽卓著的PAM-2000的濃縮版
2）精巧、准確、迅速、操作簡便的高級光合作用檢測設備
3）可單機操作（採用內置電腦），可連接外置電腦操作（Windows操作軟體WinControl）
4）超攜帶型設計，帶液晶顯示屏和8個按鍵
5）強大的數據收集、分析和存貯功能
6）能耗低，內置鋰電池可滿足長時間野外工作需要，並可連接外置12 V電池
7）多種葉夾可供選擇，專利設計的光適應葉夾2030-B可同時記錄PAR和溫度變化
8）光源選擇：自然光，內置光源（提供測量光、光化光和飽和脈沖），可選外置鹵素燈光源（特別適合野外研究）

功能
1）可測熒光誘導曲線並進行淬滅分析（Fo, Fm, Fv/Fm, F, Fm', ΔF/Fm』, qP, qN, NPQ, rETR, PAR和葉溫等）
2）可測光響應曲線和快速光曲線（RLC）
3）51個內置模式菜單，方便參數設置和標准測量
4）可在線監測植物、微藻、地衣、苔蘚等的光合作用變化
5）功能強大，特別適合野外操作，實驗室內利用WinControl控制時可自編程序

2. 如何用紫外分光光度計測藻類密度

使用紫外分光光度計測藻類密度的方法如下：

1. 收集藻樣：將需要測量的藻類樣本採集，並將其用離心機離心，以分離出細胞。伏咐

2. 制備樣品：將分離出的藻細胞用無菌鹽水洗凈，然後用無菌鹽水制備稀釋系列，通常包帶念含10、100、1000等倍數的稀釋液。要確保使用無菌技術制備樣品，以保證准確性和可重復性。

3. 測量吸光度：將制備蠢廳困好的樣品放入紫外分光光度計中，設置波長為260nm，記錄各稀釋液的吸光度。藻類細胞中的核酸吸收紫外線，因此可以通過測量吸光度來估算其濃度。

4. 計算藻類密度：根據吸光度值和稀釋倍數，使用以下公式計算藻類密度：密度（cells/mL）=吸光度×系數×稀釋倍數，其中系數是不同種類藻類所需的系數，一般是1-3之間。

需要注意的是，使用紫外分光光度計測藻類密度需要嚴格控制實驗條件，如稀釋液的配製、洗滌、離心等操作要求使用無菌技術，以避免樣品中的雜質對實驗結果的影響。

3. 柵藻和小球藻混合培養時，怎麼測定藻液中兩種藻的濃度

兩種銷磨藻吸收波長如果不同，則可以分別測定兩者最大吸收峰，並通過二元一次方程兆橋組求解。如果兩種早吸收波長相同，則無法直接用OD測定，最簡虧猜斗單的方法是使用血球計數板在顯微鏡下進行計數。

4. 做藻類的試驗，怎麼測定水中的藻類含量。最好是包括試驗裝置圖片的

一般用測定葉綠素a來表示藻類的含量：
實驗14 葉綠素a和b含量的測定（分光光度法）

一、目的

學會Chla、b含量的測定方法，了解葉片中Chla、b的含量。

二、材料用具及儀器葯品

菠菜葉片、721分光光度計、天平、研缽、剪刀、容量瓶（25ml）、漏斗、濾紙、乙醇（95%）

三、原理

葉綠素a、b在波長方面的最大吸收峰位於665nm和649nm，同時在該波長時葉綠素a、b的比吸收系數K為已知，我們即可以根據Lambert Beer定律，列出濃度C與光密度D之間的關系式：

D665=83.31Ca+18.60Cb…………………………….(1)

D649=24.54Ca+44.24 Cb…………………………….(2)

(1)(2)式中的D665、D649為葉綠素溶液在波長665nm和649nm時的光密度。

為葉綠素a、b的濃度、單位為每升克數。

82.04、9.27為葉綠素a、b在、在波長665nm時的比吸收系數。

16.75、45.6為葉綠素a、b在、在波長649nm時的比吸收系數。

解方程式(1)(2)，則得 ：

CA=13.7 D665—5.76 D649………………………(3)

CB=25.8 D649—7.6 D665………派亮譽……………… (4)

G=CA+CB=6.10 D665+20.04 D649………(5)

此時，G為總葉綠素濃度，CA、CB為葉綠素a、b濃度，單位為每升毫克，利用上面（3）（4）（5）式，即可以計算葉綠素塵段a、b及總葉綠素的總含量。

四、方法步驟

1．稱取0.1克新鮮葉片，剪碎，放在研缽中，加入乙醇10ml共研磨成勻漿，再加5ml乙醇，過濾，最後將濾液用乙醇定容到25ml。

2．取一光徑為1cm的比色杯，注入上述的葉綠素乙醇溶液，另加乙醇注入另一同樣規格的比色杯中，作為對照，在721分光光度計下分別以665nm和649nm波長測出該鍵襪色素液的光密度。

計算結果：

葉綠素a含量（mg/g. FW）=
葉綠素b含量（mg/g.FW）=
葉綠素總量（mg/g.FW）= 見鏈接
http://sky.scnu.e.cn/jpkc/zwslx/fenye/jakj/li/shi-yan/14.htm
還有

實驗33 葉綠素a和b含量的測定（分光光度法）

原理

如果混合液中的兩個組分，它們的光譜吸收峰雖有明顯的差異，但吸收曲線彼此又有些重疊，在這種情況下要分別測定兩個組分，可根據Lambert—Beer定律，通過代數方法，計算一種組分由於另一種組分存在時對吸光度的影響，最後分別得到兩種組分的含量。

如圖9葉綠素a和b的吸收光譜曲線，葉綠素a的最大吸收峰在663nm，葉綠素b在645nm，吸收曲線彼此又有重疊。

根據Lambert—Beer定律，最大吸收光譜峰不同的兩個組分的混合液，它們的濃度C與吸光度A之間有如下的關系（參閱實驗86）：

A1=Ca·ka1+Cb·kb1 (1)

A2=Ca·ka2+Cb·kb2 (2)

式中：Ca為組分a的濃度，g/L。

Cb為組分b的濃度，g/L。

A1為在波長λ1（即組分a的最大吸收峰波長）時，混合液的吸光度A值。

A2為在波長λ2（即組分b的最大吸收峰波長）時，混合液的吸光度A值。

ka1為組分a的比吸收系數，即組分a當濃度為1g/L時，於波長

λ1時的吸光度A值。

kb2為組分b的比吸收系數，即組分b當濃度為1g/L時，於波長λ2時的吸光度A值。

ka2為組分a（濃度為1g/L）在波長λ2時的吸光度A值。

kb1為組分b（濃度為1g/L）在波長λ1時的吸光度A值。

從文獻中可以查得葉綠素a和b的80%丙酮溶液，當濃度為1g/L時，比吸收系數k值如下：

將表中數值代入上式(1)、(2)，則得：

A663=82.04×Ca+9.27×Cb

A645=16.75×Ca+45.60×Cb

經過整理之後，即得到下式：

Ca=0.012 7 A663—0.002 69 A645

Cb=0.022 9 A645—0.004 68 A663

如果把Ca，Cb的濃度單位從原來的g/L改為mg/L，則上式可改寫為下列形式：

Ca=12.7A663—2.69A645 (3)

Cb=22.9A645—4.68A663 (4)

Ct=Ca+Cb=8.02A663+20.21A645 (5)

(5)式中Ct為總葉綠素濃度，單位為mg/L。

利用上面(3)、(4)、(5)式，即可計算出葉綠素a和b及總葉綠素的濃度。

註：一般大學教學實驗室所用的分光光度計多為721型，屬低級類型，其單色光的半波寬值要比中級類型的751型大得多，而葉綠素a和b吸收峰的波長相差僅18nm（663—645nm），難以達到精確測定。此外有時還由於儀器本身的標稱波長與實際波長不符，測定的正確性就更差了。根據公式計算往往會得到葉綠素a∶b值小於1，這就不很奇怪了。除向學生說明其中原因外，還可以在實驗前對儀器的波長進行校正，使標稱波長與實際波長一致。校正可用純的葉綠素a和b進行，分別在波長650—670nm和630梍650nm之間，每隔1—2nm測定葉綠素a或b的吸光度A，以確定葉綠素a和b的吸收峰的波長。如果測得的峰值與文獻上的峰值663nm和645nm不同，可按照儀器說明書步驟進行校正，或者更方便的方法可以打開儀器蓋子，松動波長刻度盤緊固螺絲，調節刻度盤使波長至正確值，而後旋緊螺絲復原儀器。

為校正儀器波長所需的葉綠素a和b的用量是很少的，用紙層析法很快就能分離製得。取植物葉子約1g，用乙醚提取葉綠體色素，再用毛細管將色素溶液畫在3mm厚濾紙上使成一直線，為使分離效果好，一般重復點樣一次即可。然後於密閉容器中進行上行層析，溶劑為含0.5%丙醇的石油醚。層析結束，用剪刀小心地剪下藍綠色的葉綠素a和黃綠色的葉綠素b，注意剪時盡量避開有可能遭污染的色區。最後分別浸於80%丙酮中，洗下葉綠素a和b
http://bio.biox.cn/Biology/200701/20070106230337_25343.shtml

只是說測葉綠素a是常規的表示藻類總量的方法，也有些在線直接測藻類的儀器，你可以搜一下。

5. 水華藻濃度

40mg／L。水華藻是淡水中的一種自然生態現象，只是僅由藻類引起的，如藍藻、綠藻、硅藻等，也就是水的富營養化，水華藻濃度孫嫌是40mg／L，且不同濃度沖猜對水華藻細胞密度的影響也不則判手同。