亮氨酸儲存液怎麼配置

1. DMEM/F12培養液配製

DMEM/F12培養基說明書
產品代號：MD207-050
一．【組成成分】
成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L
無水氯化鈣 116.6 L-亮氨酸 59.05 亞油酸 0.042
五水硫酸銅 0.0013 L-賴氨酸鹽酸鹽 91.25 硫辛酸 0.105
九水硝酸鐵 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚紅 8.1
七水硫酸亞鐵 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二鹽酸鹽 0.081
氯化鉀 311.8 L-絲氨酸 26.25 丙酮酸鈉 55
氯化鎂 28.64 L-蘇氨酸 53.45 維生素H 0.0035
無水硫酸鎂 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸鈣 2.24
氯化鈉 6999.5 L-天門冬醯胺 7.5 氯化膽鹼 8.98
無水磷酸二氫鈉 54.35 L-天門冬氨酸 6.65 葉酸 2.65
磷酸氫二鈉 71.02 L-半胱氨酸鹽酸鹽 17.56 i-肌醇 12.6
七水硫酸鋅 0.432 L-谷氨酸 7.35 煙醯胺 2.02
L-精氨酸鹽酸鹽 147.5 L-脯氨酸 17.25 鹽酸吡哆醛 2
L-胱氨酸鹽酸鹽 31.29 L-色氨酸 9.02 鹽酸吡哆醇 0.031
L-谷氨醯胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黃素 0.219
甘氨酸 18.75 L-纈氨酸 52.85 鹽酸硫胺 2.17
L-組氨酸鹽酸鹽 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365
L-異亮氨酸 54.47 次黃嘌呤 2 維生素B12 0.68

二．【產品指標】

外觀 粉紅色固體粉末
溶解性 完全溶解，溶液澄明。
pH值
①加NaHCO3 6.60～7.20
②不加NaHCO3 5.50～6.10
水分（%） ≤5.0
滲透壓（mOsm/kgH2O）
①加NaHCO3 274～302
②不加NaHCO3 238～263
細菌內毒素（EU/ml） ≤10
微生物檢查（CFU/g） ≤1000
細胞生長試驗 細胞形態 與標准細胞形態相似

細胞數量 加10％小牛血清培養4天，細胞密度從104細胞/ml增加到105細胞/ml。
三.【配製方法】
⑴ 將一袋培養基全部倒入一容器中，用少量注射用水將袋內殘留培養基洗下，並入容器。加註射用水（水溫20℃～30℃）到950毫升，輕微攪拌溶解。
⑵ 加入2.438克碳酸氫鈉。
⑶ 輕微攪拌溶解，加註射用水至1升。
⑷ 用1mol / L 氫氧化鈉溶液或 1mol / L鹽酸溶液調pH至所需值。
⑸ 用0.2μm濾膜正壓過濾除菌。
⑹ 溶液應在2℃－8℃下避光保存。
四．【貯藏】 2℃－8℃冷藏，乾燥、密封、避光貯藏。

2. 亮氨酸的制備方法

氨基酸的製造是從1820年水解蛋白質開始的。1908年日本人Ikeda發現谷氨酸鈉是鮮味的強化劑，開始了工業化生產氨基酸的歷史。1957年日本開始運用微生物進行谷氨酸發酵生產，從此揭開了微生物發酵方法生產氨基酸的歷史新篇章。20世紀六十年代左右，關於L一亮氨酸生物合成以及其代謝調節機制相繼闡明。這為微生物發酵法生產L一亮氨酸定向育種及酶法生產L-亮氨酸提供了理論基礎。
L一亮氨酸的生產方法主要有提取法、化學合成法、酶催化法、微生物發酵法等。 氨基酸是蛋白質的組成單位，在酸性條件下，將L一亮氨酸含量較高的蛋白質水解，得到各種氨基酸的混合物，經分離、純化、精緻等工序獲得L一亮氨酸產品。
我國大部分廠家採用蛋白質水解法生產L一亮氨酸和L-胱氨酸。蛋白質水解法生產L一亮氨酸的優點是生產設備簡單，技術要求不高，並且L一亮氨酸在蛋白質中的含量較高。但是蛋白質水解法生產的缺點是費時、污染嚴重、收率低、產品質量得不到保證，大規模生產受到限制。 酶催化法生產L一亮氨酸通常是利用轉氨酶轉氨給a一酮基異己酸生成L一亮氨酸和組氨酸將相關的酶和NADH共價結合在膜上，讓底物緩緩地經過膜而進行酶催化反應生成L一亮氨酸。如1981年，Wichmann er al.建立了一種用超濾膜製成的膜反應器，膜上共價結合了亮氨酸轉氨酶、甲酸轉氨酶、和NADH，當底物。一酮基異己酸通過膜反應器後，可被催化生成L一亮氨酸，其中NADH通過甲酸同步氧化成CO2實現再生。
酶法生產氨基酸的優點是轉化能力強，可避免代謝調控中的反饋抑制和反饋阻遏，並且其生物反應器緊湊，產物組分相對單一，易進行後工序加工處理，可以提高產品質量，降低成本。但酶法生產中所用到的酶需通過微生物發酵生成並提取精製，工藝過程比較復雜，且成本較高，因此目前尚未得到廣泛的應用。如果能夠低成本獲得高酶活的酶，則酶法生產L一亮氨酸是一條經濟可行的工藝路線。
微生物發酵法 一． 濃縮段
原料：蒸汽
將一次母液通入濃縮罐內，通入蒸汽，溫度120℃，氣壓-0.09MPa，濃縮時間6h，結晶。
終點產物：結晶液（去一次中和段）
二，一次中和段
輔料：硫酸，純水
結晶液進入一次中和罐，通入硫酸，純水，溫度80℃，中和時間4h，過濾
終點產物：1，濾液（回收利用）2，濾渣（去氨解段）
三, 氨解段
輔料：氨水，純水，蒸汽
濾渣進入氨解罐，通入氨水，純水，蒸汽，溫度80℃，氨解時間3h，過濾
終點產物，1，濾液（回收利用）2，濾渣（去脫色段）(胱氨酸)
四，脫色段。
輔料：蒸汽，純水，活性炭
濾渣進入脫色罐，通（投）入蒸汽，純水，活性炭，溫度80℃，脫色時間2h，過濾，
終點產物：1，濾渣（回收利用）2，濾液（去二次中和段）
五，二次中和段
輔料：氨水，蒸汽
濾液進入二次中和罐，通入氨水，蒸汽，溫度80℃，中和時間4h，過濾，
終點產物，1，濾液（回收利用）2，濾渣（即L-亮氨酸粗品，去精製段）
六，精製段
輔料：蒸餾水，蒸汽(組氨酸鹽酸鹽)
用蒸餾水沖洗上段工序產品並離心甩干，送入烘乾機，通入蒸汽烘乾，包裝，入庫，烘乾溫度100℃，烘乾時間3h。
終點產物：L-亮氨酸成品

3. 亮氨酸作用是什麼誰能介紹下

亮氨酸一般多用於麵包、面類製品。配製氨基酸輸液及綜合氨基酸制劑，降血糖劑，植物生長促進劑。可用作香料，可改善食品風味。在醫葯行業，L一亮氨酸是臨床選用的復合氨基酸靜脈注射液不可缺少的原料，對於維持危重病人的營養需要，搶救患者的生命起著積極的作用。亮氨酸還在調節氨基酸與蛋白質代謝方面起重要作用。研究發現，亮氨酸是骨骼肌與心肌中唯一可調節蛋白質周轉的氨基酸。另外也有研究表明，亮氨酸能促進骨骼肌蛋白質的合成。亮氨酸的代謝產物。一酮異己酸一也具有調節蛋白質代謝的作用。

4. L-亮氨酸的生產方法

氨基酸的製造是從1820年水解蛋白質開始的。其提取順序是是L-胱氨酸，L-組氨酸，L-亮氨酸，L-精氨酸，1908年日本人Ikeda發現谷氨酸鈉是鮮味的強化劑，開始了工業化生產氨基酸的歷史。1957年日本開始運用微生物進行谷氨酸發酵生產，從此揭開了微生物發酵方法生產氨基酸的歷史新篇章。20世紀六十年代左右，關於L一亮氨酸生物合成以及其代謝調節機制相繼闡明。這為微生物發酵法生產L一亮氨酸定向育種及酶法生產L-亮氨酸提供了理論基礎。
L一亮氨酸的生產方法主要有提取法、化學合成法、酶催化法、微生物發酵法等。
提取法(蛋白水解法)：氨基酸是蛋白質的組成單位，在酸性條件下，將L一亮氨酸含量較高的蛋白質水解，得到各種氨基酸的混合物，經分離、純化、精緻等工序獲得L-亮氨酸產品。
化學合成法:亮氨酸化學合成法有A . Strecker ,。一鹵代酸氨解、相轉移催化等幾種方法。雖然化學合成法原理簡單，價格低廉，但操作復雜，反應條件苛刻，產物多，產率不高，並且有的方法涉及到有毒物質。化學合成法得到亮氨酸是消旋的DL一亮氨酸，為了得到L一亮氨酸，必須進行光學異構體的拆分。
酶催化法生產L一亮氨酸通常是利用轉氨酶轉氨給。一酮基異己酸生成L一亮氨酸。將相關的酶和NADH共價結合在膜上，讓底物緩緩地經過膜而進行酶催化反應生成L一亮氨酸。如1981是否能夠被解除和解除的效果。獲得積累目的產物的突變株最有一效的方法是通過基因突變解除微生物的正常代謝控制。獲得突變株常用的幾種方法如下:選育營養缺陷型菌株，切斷或改變平行代謝途徑;選育抗結構類似物突變株解除反饋抑制和阻遏;選育細胞膜通透性突變株，使目的產物分泌到細胞外，使細胞內終產物的濃度達不到引起反饋調節的濃度;，應用基因工程、代謝工程的手段有目的改造微生物菌株，使其高濃度合成目的產物。
天然品存在於脾臟、心臟等中，並以蛋白質的形式存在於各種動植物組織中，腐敗分解後可游離而出。
用途：營養增補劑。一般多用於麵包、面類製品。配製氨基酸輸液及綜合氨基酸制劑，降血糖劑，植物生長促進劑。
可用作香料，可改善食品風味。
質量標准：FCC
項目 標准:
旋光+14.5～+16.5°
含量 98.5～101.5%
重金屬（以Pb計） ≤0.002%
鉛 ≤10mg/kg
乾燥失重 ≤0.2%
氯化物≤0.1%
功用：屬於必需氨基酸，成人男子需要量2.2g/d。為嬰幼兒正常生長及成人維持正常氮平衡所必需。
限量：1.占食品中總蛋白質量的6.4%。
2.可安全用於食品。
[包裝]：牛皮紙袋或紙桶包裝，每袋（桶）凈含量為25kg，還可根據用戶需要包裝。
[運輸]：輕裝輕卸以防包裝破損，防日曬雨淋，不能與有毒，害物同運。為非危險品。
[貯存]：本品應貯存在陰涼、乾燥、清潔、遮光的環境中，嚴禁與有毒、有害物質混放，以免污染。
L-亮氨酸的特性
白色有光澤六面體結晶或白色結晶性粉末。略有苦味。於145~148℃升華。熔點293~295℃（分解）。在烴類存在下，在無機酸水溶液中性能穩定。每克溶於40ml水和約100ml醋酸。微溶於乙醇，溶於稀鹽酸和鹼性氫氧化物和碳酸鹽溶液。不溶於乙醚。
L-亮氨酸生產工藝
一． 濃縮段
原料：蒸汽
將一次母液通入濃縮罐內，通入蒸汽，溫度120度，氣壓-0.09Mpa，濃縮時間6h，結晶。
終點產物：結晶液（去一次中和段）
二，一次中和段
輔料：硫酸，純水
結晶液進入一次中和罐，通入硫酸，純水，溫度80，中和時間4h，過濾
終點產物：1，濾液（回收利用）2，濾渣（去氨解段）
三, 氨解段
輔料：氨水，純水，蒸汽
濾渣進入氨解罐，通入氨水，純水，蒸汽，溫度80，氨解時間3h，過濾
終點產物，1，濾液（回收利用）2，濾渣（去脫色段）(胱氨酸)
四，脫色段。
輔料：蒸汽，純水，活性炭
濾渣進入脫色罐，通（投）入蒸汽，純水，活性炭，溫度80，脫色時間2h，過濾，
終點產物：1，濾渣（回收利用）2，濾液（去二次中和段）
五，二次中和段
輔料：氨水，蒸汽
濾液進入二次中和罐，通入氨水，蒸汽，溫度80，中和時間4h，過濾，
終點產物，1，濾液（回收利用）2，濾渣（即L-亮氨酸粗品，去精製段）
六，精製段
輔料：蒸餾水，蒸汽(組氨酸鹽酸鹽)
用蒸餾水沖洗上段工序產品並離心甩干，送入烘乾機，通入蒸汽烘乾，包裝，入庫，烘乾溫度100，烘乾時間3H。
終點產物：L-亮氨酸成品

5. 亮氨酸的理化性質

外觀與性狀：本品為白色結晶或結晶性粉末；無臭，味微苦。
熔點：332℃（消旋體），293～295℃（左旋體）
酸鹼性：pH約為為5.5 ～6.5
溶解性：本品在甲酸中易溶，在水中略溶，在乙醇或乙醚中極微溶解。
相對密度（水=1）：左旋體1.293
比旋光度：取本品，精密稱定，加6mol/L鹽酸溶液溶解並釋稀成每1ml 中含40mg的溶液，依法測定（附錄Ⅵ E），比旋光度為+14.5°至+16.0°
儲存注意事項：本品應密封乾燥避光保存。

6. 誰能告訴我——白氨酸和亮氨酸的區別急，謝

白氨酸;leucine
分子式：C6H13NO2
分子量：131.18
CAS號：

密度：左旋體1.293℃
熔點：消旋體332，左旋體293～295℃
性狀：白色晶體
溶解情況：溶於水，微溶於乙醇，不溶於乙醚。
用途：醫葯上作營養劑。
制備或來源：由谷蛋白、玉米蛋白等蛋白質水解、精製而得，也可用化學方法合成。

性質：又稱亮氨酸。學名α-氨基-γ-甲基戊酸或α-氨基異己酸。白色晶體。左旋體密度1.293。熔點：消旋體332℃（分解），左旋體293-295℃（閉管，分解）。溶於水，微溶於乙醇，不溶於乙醚。醫葯上用作營養劑，也用於生物化學研究等。可由谷蛋白、玉米蛋白等蛋白質水解、精製而得，也可用化學方法合成。

亮氨酸
亮氨酸

拼音名：Liang』ansuan

英文名：Leucine

書頁號：2000年版二部－525

C6H13NO2 131.17

本品為L-2-氨基-4- 甲基戊酸。按乾燥品計算，含C6H13NO2不得少於98.5％。

【性狀】 本品為白色結晶或結晶性粉末；無臭，味微苦。

本品在甲酸中易溶，在水中略溶，在乙醇或乙醚中極微溶解。

比旋度 取本品，精密稱定，加6mol/L鹽酸溶液溶解並釋稀成每1ml 中含40mg的溶

液，依法測定（附錄Ⅵ E），比旋度為＋14.5°至＋16.0°。

【鑒別】 本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集298 圖）一致。

【檢查】 酸度 取本品0.50g ，加水50ml，加熱使溶解，放冷至室溫，依法測定

（附錄Ⅵ H），pH值應為5.5 ～6.5 。

溶液的透光度 取本品0.50g ，加水50ml，加熱使溶解，放冷至室溫，照分光光度

法（附錄Ⅳ A），在430nm 的波長處測定透光率，不得低於98.0％。

氯化物 取本品0.25g ，依法檢查（附錄Ⅷ A），與標准氯化鈉溶液5.0ml 製成的

對照液比較，不得更濃（0.02％）。

硫酸鹽 取本品1.0g，依法檢查（附錄Ⅷ B），與標准硫酸鉀溶液2.0ml 製成的對

照液比較，不得更濃（0.02％）。

銨鹽 取本品0.10g ，依法檢查（附錄Ⅷ K），與標准氯化銨溶液2.0ml 製成的對

照液比較，不得更濃（0.02％）。

其他氨基酸 取本品，加水製成每1ml 中含4mg 的溶液，作為供試品溶液；精密量

取上述溶液適量，加水釋稀成每1ml 中含20μg 的溶液，作為對照溶液。照薄層色譜法

（附錄Ⅴ B）試驗，吸取上述兩種溶液各5μl ，分別點於同一硅膠G薄層板上，以正

丁醇－水－冰醋酸（3:1:1 ）為展開劑，展開後，晾乾，噴以茚三酮的丙酮溶液（1 →

50），在80℃乾燥5 分鍾，立即檢視，供試品溶液所顯雜質斑點的顏色，與對照溶液的

主斑點比較，不得更深（0.5 ％）。

乾燥失重 取本品，在105 ℃乾燥3 小時，減失重量不得過0.2 ％（附錄Ⅷ L）。

熾灼殘渣 取本品1.0g，依法檢查（附錄Ⅷ N），遺留殘渣不得過0.1 ％。 鐵鹽 取本品1.5g ，依法檢查（附錄Ⅷ G），與標准鐵溶液1.5ml 製成的對照液

比較，不得更深（0.001％）。

重金屬 熾灼殘渣項下遺留的殘渣，依法檢查（附錄Ⅷ H第二法），含重金屬不得過

百萬分之十。

砷鹽 取本品2.0g，加水5ml，加硫酸1ml與亞硫酸10ml，在水浴上加熱至體積約剩2ml ，

加水5ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，加鹽酸5ml ，加水使成28ml，依法檢查（附錄Ⅷ

J第一法），應符合規定（0.0001％）。

熱原 取本品，加氯化鈉注射液製成每1ml中含20mg的溶液，依法檢查(附錄Ⅺ D)，

劑量按家兔體重每1kg 注射10ml，應符合規定（供注射用）。

【含量測定】 取本品約0.1g，精密稱定，加無水甲酸1ml 溶解後，加冰醋酸25ml，

照電位滴定法（附錄Ⅶ A），用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，並將滴定的結果用空

白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當於13.12mg的C6H13NO2。

7. 等電亮氨酸ph

摘要：採用天然高分子絮凝劑殼聚糖對L-異亮氨酸發酵液進行預處理，在發酵液pH=2，殼聚糖用量30mg／L的條件下可取得較好的絮凝效果．並通過靜態吸附實驗，考察了pH和L-異亮氨酸濃度對平衡吸附量的影響．最後確定了732離子交換樹脂提取L-異亮氨酸的最佳工藝條件： 上柱發酵液pH=2，上樣速度0.6BV／h，洗脫液為0.5mol/L的NH4Cl．流出液經脫色、濃縮結晶後得L-異亮氨酸成品，總提取率為55％．
關鍵詞：L-異亮氨酸；離子交換；提取；工藝條件
1前言
早在1936年，Rose等人根據動物營養試驗結果證實，L-異亮氨酸為人和動物體營養必需氨基酸之一。它可作為強化劑添加於食品中，可用於配製一般營養復合氨基酸輸液和治療型特種氨基酸輸液，其用量逐年增長IJl。目前，L-異亮氨酸主要是通過發酵法來生產，在L-異亮氨酸的發酵液中，除主要產物外還有其他氨基酸如丙氨酸、纈氨酸，因L-異亮氨酸跟這兩種氨基酸均為中性氨基酸，它們的結構相似，等電點也接近，導致L-異亮氨酸分離非常困難。目前中性氨基酸的工業化分離方法國內外報道都不多，為了提高總提取率，作者採用離子交換法對L-異亮氨酸的分離提取進行了研究。
2實驗部分
2．1 材料和儀器
001 X7(732)離子交換樹脂，中國醫葯(集團)上海化學試劑公司。離子交換柱(φ20×500mm)，無錫儀器廠。L-異亮氨酸發酵液，江南大學生物工程學院氨基酸研究室提供。回轉式恆溫調速搖瓶櫃HYG-II型，上海欣蕊自動化設備有限公司。PHs-3C型精密pH計，上海雷磁儀器廠。72 分光光度計，上海第三分析儀器廠。
2．2 發酵液預處理
在發酵液中加入草酸並加熱至80℃，保溫3min，離心除去部分菌體和碳酸鈣，上清液用絮凝劑處理，過濾，根據物質顏色與吸收光顏色的互補關系，實驗中採用650nm的入射波長，測定其透光率。
2-3 樹脂的預處理
陽離子交換樹脂依次用20％NaCl、2mol／LNaOH、2mol／L HCl浸泡洗滌，最後浸泡於去離子水中備用。
2．4 分析方法
L-異亮氨酸和L-丙氨酸含量的測定採用紙色譜定量分析法。即將待測液點樣於新華3號層析紙上，電吹風加熱趕氨，經展開劑(正丁醇：冰醋酸：水=4：l：1)展開後，用1.0％茚三酮丙酮溶液顯色，剪下斑點加5ml 75％乙醇：0.2％ CuSO4.5H20=39：l的溶液洗脫，顯色液在分光光度計的570nm波長下測吸光值，然後從標准曲線上查出氨基酸的含量。
2．5 靜態吸附量和選擇性系數的測定
准確量取經過預處理的lOml離子交換樹脂和100ml一定濃度不同pH值的L-異亮氨酸發酵液，置於500ml的錐形瓶中。25"C下恆溫振盪，直至平衡為止，測定平衡後發酵液中L－亮氨酸和L－丙氨酸的濃度，按(1)、(2)式計算樹脂的吸附量Q及選擇性系數KAB。Q=(Co-C『)V／131.16W (1)式中，Co為起始發酵液中L-異亮氨酸的濃度(g／L)：C『為平衡後發酵液中L-異亮氨酸的濃度(g／L),V為發酵液體積(L)； 為濕樹脂體積(L)：l31.16為L-異亮氨酸分子量；Q為樹脂交換容量(mol／L)。
2．6 動態吸附實驗
將一定量的離子交換樹脂裝入玻璃交換柱中，通入已經預處理過的L-異亮氨酸發酵液，直至穿透液與茚三酮反應呈陽性為止，水洗後，用洗脫劑洗脫，分部收集流出液，確定最佳洗脫條件。
3結果和討論
3．1 發酵液預處理工藝的確定
發酵液是含有大量菌體等固形物組成復雜的帶有負電荷的膠體分散體系，同時具有親水性和憎水性的膠體特性。如果採用帶菌體的發酵液直接上柱，不僅給操作帶來困難，而且影響產品的質量和收率，因此採用絮凝沉降的辦法對發酵液進行預處理。殼聚糖是天然聚合物，具有無毒，易被動物消化吸收，對提高家禽的產蛋率和瘦肉率很有好處，用殼聚糖絮凝得到的菌體蛋白是很好的飼料添加劑。故本文採用殼聚糖為絮凝劑。以其處理後發酵液的透光率為考察指標，結果發現溶液pH和殼聚糖用量是影響絮凝效果的重要因素。
3．1．1 pH對絮凝效果的影響
溶液pH對絮凝作用的影響有兩方面：一是影響菌體細胞表面帶電情況：二是影響絮凝劑的電離程度和絮凝劑分子鏈伸展程度。發酵液pH對絮凝效果的影響可以看出pH為2時，絮凝效果最好。這是因為殼聚糖作為一線性含氨基的高分子氨基在酸性介質中質子化，表現出陽離子絮凝劑的性質。pH 值降低，殼聚糖陽離子絮凝劑的性質更加明顯，然而當溶液的pH值太低時，會使殼聚糖溶解，反而影響絮凝的效果，另外pH值還會影響殼聚糖的架橋能力，因此pH值太高或太低對絮凝都不利，應該把發酵液控制在合適的pH值。
3．1．2 殼聚糖用量對絮凝效果的影響
殼聚糖用量對絮凝效果的影響可以看出在一定的pH值下，絮凝效果隨絮凝劑用量的增加而增加，達到峰值後，又隨絮凝劑用量的增加而降低，這與架橋絮凝機理一致 l： 當高分子絮凝劑覆蓋微粒表面的部分接近50％時，其絮凝作用最佳； 當絮凝劑過量時，微粒表面全部被覆蓋，已沒有空餘表面吸附起架橋作用的其他絮凝劑，又由於覆蓋的絮凝劑帶有許多親水官能團，故反而起分散作用，這時懸浮液又變為穩定的分散體系， 因此絮凝劑過量反而使絮凝效果下降。
3．2 pH值對樹脂交換容量和選擇性系數的影響
發酵液pH是影響交換平衡關系的一個重要因素。通過靜態實驗，測定了不同pH下的離子交換容量可以看出pH為2時，樹脂的交換容量最大，為0.882mol／L。在pH 由6降至2的過程中L-異亮氨酸以陽離子形式存在，使陽離子交換樹脂的吸附量增加，但當pH繼續降低時，溶液中[H+]增加，與L-異亮氨酸根離子發生競爭吸附，因此導致交換容量降低。
3．3 發酵液中L-異亮氨酸濃度對樹脂交換容量的影響
配製不同濃度的L-異亮氨酸溶液，在pH為2的條件下測定樹脂的靜態交換容量，實驗結果可以看出，隨溶液中L-異亮氨酸濃度增加，樹脂的交換容量增加，但在濃度大於0.16mol／L以後增加L-異亮氨酸濃度對交換容量的提高影響不大。
3．4 固定床操作工藝
上柱：經預處理後的發酵液調酸至pH為2上柱。另外固定床操作的一個重要參數是固液兩相的接觸時間，可以用BV／h表示，即每小時流經柱子的上樣液為床體積BV（Bed Volume）的倍數。為了進行有效的交換，離子交換過程中必須使固液兩相有充分的接觸時間，如果液相流速增加，固液接觸時間縮短，樹脂與上樣液來不及交換，就會導致交換區拉長，很快發生滲漏現象。通過實驗上柱流速採用0.6BV/h。
水洗： 上柱後， 用適量的水洗。一般為上柱發酵液體積的l～2倍，水洗流速為1.0BV／h。
洗脫：本實驗以O.1mol／L，0.2mol／L，O.5mol／L，lmol／L的氨水和0.2mol／L，O.5mol／L，O.8mol／L，1mol／L的NH4Cl作為洗脫劑進行洗脫。結果發現以氨水洗脫時，L-異亮氨酸與L-丙氨酸重疊較多，而以O.5mol／L的NH4Cl作為洗脫劑時，分離效果較好。
3．5 洗脫液的脫色與精製
本實驗採用粉末狀活性炭脫色。活性炭脫色是利用優先選擇吸附有機大分子色素的特性，將色素分子強烈吸附於活性炭顆粒表面，隨活性炭的分離而被除去。據文獻報道，在偏酸性條件下活性炭脫色效果顯著。因此本實驗選定pH為4.5。並且通過多次實驗，發現當活性炭用量為l％、溫度為8O℃脫色lh，能達到較理想的脫色效果。
脫色液經旋轉蒸發儀濃縮，加入乙醇結晶，於4℃靜置過夜，過濾晶體，真空乾燥12h，即得成品。成品總提取率為55％，高氯酸滴定法測得其純度達98.8％ 。
4結 論
1．殼聚糖對L-異亮氨酸發酵液中的菌體具有良好的絮凝作用。溶液pH和殼聚糖用量是影響絮凝效果的重要因素。pH為2，殼聚糖用量為30mg／L時可獲得良好的絮凝效果。
2．pH 2時最有利於732樹脂吸附L-異亮氨酸。增加溶液中L-異亮氨酸濃度有利於增加樹脂吸附量，但當L-異亮氨酸濃度大於O.16mol／L時，這種影響不明顯。
3．L．異亮氨酸經732 樹脂吸附，0.5mol／L NH4Cl洗脫後濃縮結晶得成品，成品總提取收率為55％。

8. 0.05%的亮氨酸如何配製

亮氨酸鹽酸鹽可看成滴加了鹽酸的亮氨酸，亮氨酸鈉鹽相當於滴加了NAOH.

9. 0.12 M KCl，5 mM 組氨酸緩沖溶液 (pH 6.8)溶液的配製方法謝謝！

L-組氨酸的歷史

其實，組氨酸在90年代時價格是非常高的,但是國外的買家，特別是日本和韓國以及歐美市場，是中國的主要買家，其價格也是相當高，一直到2002年，L-組氨酸的價格都是一直堅挺，大概到500元/kg，但是其提煉工藝也是異常的復雜，成本高，製造周期長，不易於保存等特點也是困擾國內主要廠家的原因,L-組氨酸又名L-組氨酸鹼，其和L-組氨酸鹽酸鹽是酸鹼對立的兩種產品，國內的主要廠家有湖北，山東，浙江等省份廠家，當時的主要工藝還是動物的毛發進行水解以後，在進行中和反應，反復酸鹼中和幾次之後，我們便得到了結晶析出的L-組氨酸，其前面得到的一種氨基酸我們稱之為精氨酸,是以樹脂交換，然後上柱吸附為原理，柱子也分為陰樹脂和陽樹脂之分，其價格也是十分昂貴。

早在1900年代，日本科學家就開始了對L-組氨酸的研究，然後到了1950年，中國的科學家才開始進行水解法生產L-組氨酸的研究，當時主要還是以湖北為生產基地進行生產，同時也帶動了L-胱氨酸，L-亮氨酸，L-酪氨酸等系列化氨基酸產品的生產。

總的來說，我們國家在生產氨基酸方面還是比較有優勢的，大體上來講是成本和技術優勢，原料優勢和政策優勢，我們當時的環保要求不高，財政也是很支持，

L-組氨酸還是主要用於葯用方面，和甘氨酸等其它氨基酸可以反應生產其它復雜的氨基酸系列產品。
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10. 誰給我介紹亮氨酸````扔幾個網站也成啊~

亮氨酸
拼音名：Liang』ansuan
英文名：Leucine
書頁號：2000年版二部－525
C6H13NO2 131.17
本品為L-2-氨基-4- 甲基戊酸。按乾燥品計算，含C6H13NO2不得少於98.5％。
【性狀】 本品為白色結晶或結晶性粉末；無臭，味微苦。
本品在甲酸中易溶，在水中略溶，在乙醇或乙醚中極微溶解。
比旋度 取本品，精密稱定，加6mol/L鹽酸溶液溶解並釋稀成每1ml 中含40mg的溶
液，依法測定（附錄Ⅵ E），比旋度為＋14.5°至＋16.0°。
【鑒別】 本品的紅外光吸收圖譜應與對照的圖譜（光譜集298 圖）一致。
【檢查】 酸度 取本品0.50g ，加水50ml，加熱使溶解，放冷至室溫，依法測定
（附錄Ⅵ H），pH值應為5.5 ～6.5 。
溶液的透光度 取本品0.50g ，加水50ml，加熱使溶解，放冷至室溫，照分光光度
法（附錄Ⅳ A），在430nm 的波長處測定透光率，不得低於98.0％。
氯化物 取本品0.25g ，依法檢查（附錄Ⅷ A），與標准氯化鈉溶液5.0ml 製成的
對照液比較，不得更濃（0.02％）。
硫酸鹽 取本品1.0g，依法檢查（附錄Ⅷ B），與標准硫酸鉀溶液2.0ml 製成的對
照液比較，不得更濃（0.02％）。
銨鹽 取本品0.10g ，依法檢查（附錄Ⅷ K），與標准氯化銨溶液2.0ml 製成的對
照液比較，不得更濃（0.02％）。
其他氨基酸 取本品，加水製成每1ml 中含4mg 的溶液，作為供試品溶液；精密量
取上述溶液適量，加水釋稀成每1ml 中含20μg 的溶液，作為對照溶液。照薄層色譜法
（附錄Ⅴ B）試驗，吸取上述兩種溶液各5μl ，分別點於同一硅膠G薄層板上，以正
丁醇－水－冰醋酸（3:1:1 ）為展開劑，展開後，晾乾，噴以茚三酮的丙酮溶液（1 →
50），在80℃乾燥5 分鍾，立即檢視，供試品溶液所顯雜質斑點的顏色，與對照溶液的
主斑點比較，不得更深（0.5 ％）。
乾燥失重 取本品，在105 ℃乾燥3 小時，減失重量不得過0.2 ％（附錄Ⅷ L）。
熾灼殘渣 取本品1.0g，依法檢查（附錄Ⅷ N），遺留殘渣不得過0.1 ％。 鐵鹽 取本品1.5g ，依法檢查（附錄Ⅷ G），與標准鐵溶液1.5ml 製成的對照液
比較，不得更深（0.001％）。
重金屬 熾灼殘渣項下遺留的殘渣，依法檢查（附錄Ⅷ H第二法），含重金屬不得過
百萬分之十。
砷鹽 取本品2.0g，加水5ml，加硫酸1ml與亞硫酸10ml，在水浴上加熱至體積約剩2ml ，
加水5ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯中性，加鹽酸5ml ，加水使成28ml，依法檢查（附錄Ⅷ
J第一法），應符合規定（0.0001％）。
熱原 取本品，加氯化鈉注射液製成每1ml中含20mg的溶液，依法檢查(附錄Ⅺ D)，
劑量按家兔體重每1kg 注射10ml，應符合規定（供注射用）。
【含量測定】 取本品約0.1g，精密稱定，加無水甲酸1ml 溶解後，加冰醋酸25ml，
照電位滴定法（附錄Ⅶ A），用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，並將滴定的結果用空
白試驗校正。每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當於13.12mg的C6H13NO2。
【類別】 氨基酸類葯。
【貯藏】 遮光，密封保存。