100微升細胞懸液如何配置
⑴ 怎樣配製顯微鏡下白細胞稀釋液
如果是要改變白細胞的濃度,那可以先用血球計數板計數現有百細胞懸液的濃度,然後計算,加入一定量稀釋液.
如果是問在顯微鏡下怎麼稀釋,那一般操作時都先要江漢有百細胞懸液的血球板或者載玻片從載物台上取下,在桌面操作.用20-200微升的移液槍加稀釋液,然後用移液槍吹打即可混勻.
⑵ 細胞培養時怎樣調整細胞濃度
細胞培養時怎樣調整細胞濃度
1、一般96孔板,每孔是加100微升細胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板後,將未加的細胞懸液混一下再,繼續加剩餘的半邊板子,都加完後蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(一般輕巧敲三下),太強或次數太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(逆時針效果不好),依次敲擊剩餘三個邊,靜置約5分鍾,放入37度培養箱。
6孔板12孔板或24孔板,均採用將第一個孔加入少量無血清培養基,晃動浸潤整個孔底,然後用移液槍吸至第二孔,同樣方法浸潤孔底,其它孔一次類推,這樣整個孔底都是濕潤的,細胞懸液會平鋪在整個孔底,加細胞懸液的時候可以避免加在中間中間細胞多,而加在周邊晃勻後周邊細胞多中間少的現象,細胞分散較均勻,注意加完細胞懸液後要放工作台靜置一下。這個方法就是有點慢,但操作熟練了也不慢。也可以採用輕拍的方式,但力度沒有96孔板好掌握,效果沒有96孔板好,所以我放棄改用浸潤孔底的方法。
2、細胞懸液加完後,將細胞培養板抬高,對著燈光,從底部往上看,看細胞有沒有抱團。然後從底部敲擊,使之分散。
3、如果實驗室有平板振盪器的話,我建議用這個儀器稍振盪一下,效果不錯,就是振幅小,頻率高的那種。
4、細胞要盡量打散,大部分呈單個狀態。離心後,要充分懸浮!還有轉移到六孔板後,是要晃得!晃的時候最好不要讓那個細胞液轉圈,不然細胞就全被帶到中間去了,就會不均勻!
5、一瓶細胞長滿後,正常處理,在培養瓶里吹勻,然後鋪6孔板,每孔2毫升,鋪完之後不用觀察直接用酒精棉擦拭,然後放到培養箱里,輕微的左三圈 右三圈 前三圈 後三圈。基本上24小時之後觀察 每孔的細胞都會很均勻。
⑶ 如何配製5×10∧6/ml細胞懸液
[現有細胞體積(ml) x 細胞濃度(個/ml) ] / 5x10^6,即為你要制備的5x10^6/ml細胞懸液的總體積(ml)。
如果所用液體一樣,現有細胞濃度大於5x10^6/ml的話,那麼加入一定體積(總體積 - 現有細胞體積)的液體,混勻即可。
如果現有細胞濃度小於5x10^6/ml,那就得離心,棄液體,用液體將細胞沉澱重懸為上面公式計算出的總體積。
如果現有細胞的液體和制備細胞懸液的液體不一樣的話,那無論如何都得離心,用制備細胞懸液的液體離心洗滌1-2次後,再用制備細胞懸液的液體重選細胞。
⑷ 2%紅細胞懸液怎麼配置
首先全血離心1000rpm
10min,(離心後加生理鹽水,混勻,在離心,可重復這個步驟,直至離心後上清液透亮)制備壓積紅細胞,然後取一滴壓積紅細胞和九滴生理鹽水混勻,這是為10%的紅細胞懸液,取此懸液2滴,加生理鹽水八滴,混勻,就是2%的紅細胞懸液
⑸ 96孔板加多少ttc
每孔是加100微升細胞懸液。
一般96孔板,每孔是加100微升細胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板後,將未加的細胞懸液混一下再,繼續加剩餘的半邊板子,都加完後蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(一般輕巧敲三下),太強或次數太多會導致細胞集中成堆,將板順時針旋轉(逆時針效果不好),依次敲擊剩餘三個邊,靜置約5分鍾,放入37度培養箱。
⑹ 紅細胞懸液怎麼配 知乎
0.5% 雞紅細胞懸液怎樣配製
0.5%紅細胞懸液的制備:取全血1ml,加等滲鹽水2 3ml,充分 搖勻離心沉澱,棄去上清液,然後再加生理鹽水2 3ml 按上述方法洗滌,共三次.100ml生理鹽水加0.5ml紅細胞(離心後沉澱的血)=0.5%
⑺ 怎樣配製5%紅細胞懸液
首先全血離心1000rpm
10min,(離心後加生理鹽水,混勻,去掉上清液後再離心,可重復這個步驟,直至離心後上清液透亮)制備壓積紅細胞,然後取一滴壓積紅細胞和九滴生理鹽水混勻,這是為10%的紅細胞懸液,取此懸液5滴,加生理鹽水5滴,混勻,應該就是5%的紅細胞懸液。
還有以下的
2
%標准紅細胞懸液的制備:按需要型別,取全血1ml,加等滲鹽水2
~3ml,充分
搖勻離心沉澱,棄去上清液,然後再加生理鹽水2
~3ml
按上述方法洗滌,共三次,最
後取壓積紅細胞2
滴,加新鮮等滲鹽水4
ml
,輕輕搖動,即成所需2
%的標准紅細胞懸液。
取壓積紅細胞5
滴,加新鮮等滲鹽水4
ml
,即成5
%紅細胞懸液。
取壓積紅細胞5
滴,加新鮮等滲鹽水2
ml
,即成10
%紅細胞懸液。
標准紅細胞鹽水懸液臨用前制備,最多存放3
天,用
ACD
溶液保存最長可保存1周。
⑻ 細胞懸浮液或者是組織懸浮液是怎麼配置的有誰知道非常感謝
1,先制備動物細胞培養液,成分為:葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。
2,對將要培養的組織細胞先剪碎,然後用胰蛋白酶處理成單個細胞。
3,然後把這些單個細胞放入動物細胞培養液中。
4,調節培養液的PH值,並放入適宜的環境下培養即可。
上述是細胞懸浮液的具體製作步驟,對於組織懸浮液來說,只是把單個細胞換成組織即可。
希望採納,謝謝!
⑼ 貼壁細胞計數的細胞懸液如何制備
可以用細胞培養液來稀釋
當然要吹打了
一般來說25平方厘米方瓶20毫升液就夠了
加液的多少主要是為了稀釋和計數時計算用的。
沒有具體的規定。