葉綠素分離的層析液如何配置
❶ 葉綠素分離研磨加什麼
在做葉綠素的提取和分離實驗時,研磨綠葉時需要加入二氧化硅(使研磨充分),碳酸鈣( 防止色素受到破壞),無水乙醇(提取色素);
分離色素用層析液.
濾紙條從上到下分別是:胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b.
故答案為:
二氧化硅 無水乙醇 層析液 胡蘿卜素 葉綠素a
❷ 葉綠素的提取液和層析液分別是什麼
提取液:丙酮5ml。
層析液:石油醚。
在做葉綠體色素分離時用到,將葉片碾碎,浸出綠色液體,將液體與層析液(石油醚)混合,將濾紙一段進入混合液體,四種色素在層析液中的溶解度不同,在濾紙上留下4條色素帶。由此觀查出各種色素的相對含量和種類。
紙層析法一般用於葉綠體中色素的分離,葉綠體中色素主要包括胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b,它們在層析液中的溶解度不同,溶解度大的隨層析液在濾
紙上擴散地快,反之則慢;含量較多者色素帶也較寬。最後在濾紙上留下4條色素帶,所以利用紙層析法
能清楚地將葉綠體中的色素分離。
葉綠素提取後的色素帶分布:最上端橙黃色為胡蘿卜素,其次黃色為葉黃素,再下面藍綠色為葉綠素a,最後的黃綠色為葉綠素b。
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葉綠素含量的測定方法主要有紫外分光光度法、熒光分析法、活體葉綠素儀法、光聲光譜法和高效液相色譜法。不過目前應用最為廣泛的還是分光光度法。
葉綠素提取液的吸收光譜表明:有兩個強吸收峰,分別在紅光區和藍紫區,不同提取溶劑和原料所得的葉綠素溶液的吸收光譜比較相似。
葉綠素a、葉綠素b的紅區最大吸收峰分別在663nm、645nm附近,在藍紫區分別為429nm、453nm附近。由於提取溶劑和原料不同,對葉綠素提取液進行光譜掃描後,所得的最大吸收值可能有較小范圍的浮動。
高效液相色譜(HPLC)定量檢測葉綠素含量准確率較高,效果很好。用甲醇和丙酮作為流動相,體積比為80:20時,同時在流動相中加入質量分數為0.1%的冰醋酸,流速為1.0mL/min。利用每一種色素的色譜峰面積進行定量,葉綠素a、葉綠素b的定量可通過外標法由工作曲線求得。
❸ 葉綠素提取分離實驗的層析液成分是什麼
下面四種都可做層析液:
(1)20份汽油、2份丙酮、2份石油醚、1份苯。將濾紙條直接用該層析液進行層析,就可以得到比較理想的效果。
(2)9份體積分數為95%的酒精和1份苯混合。
(3)汽油或四氯化碳加少許無水硫酸鈉。
(4)體積分數為95%的酒精或93號汽油。
❹ 高中葉綠素分離實驗中層析液是什麼物質
下面四種都可做層析液:
(1)20份60℃-90℃下分餾出來的石油醚、2份丙酮、1份苯。將濾紙條直接用該層析液進行層析,就可以得到比較理想的效果。
(2)9份體積分數為95%的酒精和1份苯混合。
(3)汽油或四氯化碳加少許無水硫酸鈉。
(4)體積分數為95%的酒精
(5)93號汽油
分離葉綠素試驗中是20份60℃-90℃下分餾出來的石油醚、2份丙酮、1份苯,也惡意用93號汽油。
❺ 葉綠素的提取和分離實驗怎麼做
提取色素:稱取5 g的綠葉,剪碎,放入研缽中→加入少量二氧化硅、碳酸鈣和10 mL無水乙醇→研磨→過濾→收集到試管內並塞嚴試管口。
制備濾紙條:將乾燥的定性濾紙剪成略小於試管長與直徑的濾紙條,將濾紙條的一端剪去兩角,在距離剪角一端1cm處用鉛筆畫一條細的橫線。
畫濾液細線:用毛細吸管吸取少量的濾液,沿鉛筆線均勻地畫出一條細線,待濾液干後,再畫1~2次。
分離色素:將適量的層析液倒入試管中。結果為濾紙條上呈現四條顏色、寬度不同的色素帶。
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葉綠素提取注意事項:
制備濾紙條時,要將濾紙條的一端剪去兩角,這樣可以使色素在濾紙條上擴散均心,便於觀察實驗結果。
過濾時不用濾紙過濾而用單層尼龍布過濾是因為濾紙對色素具有吸附作用,若用其過濾,會導致收集到的濾液色素含量少,使實驗效果不明顯或失敗。
分離色素時,一定不要讓濾紙條上的濾液細線接觸到層析液,這是因為色素易溶解於層析液中,導致色素帶不清晰,影響實驗效果。
❻ 在綠葉中色素的提取和分離的實驗步驟
(1)提取光合色素
用天平稱取5 g綠色葉片,剪碎,放入研缽中。向研缽中放入少量二氧化硅和碳酸鈣,加入10 mL無水乙醇(也可用丙酮),迅速、充分地研磨。在玻璃漏斗基部放一塊單層尼龍布,將漏斗插入試管。將研磨液倒入漏斗,及時用棉塞塞嚴盛有濾液的試管。
①剪碎和加二氧化硅的作用:利於研磨充分
②加入碳酸鈣的原因:防止色素破壞。研磨時會破壞溶酶體,溶酶體裡面的有機酸會流出來而色素中有Mg,碳酸鈣能和酸反應,防止酸和鎂反應,破壞了色素。
③加入無水乙醇(丙酮)的原因:光合色素易溶於無水乙醇等有機溶劑中,可以用無水乙醇提取綠葉中的光合色素。
④迅速研磨:防止乙醇揮發和色素的破壞。
⑤單層尼龍布的作用:過濾、去除雜質。
⑥用棉塞塞嚴的原因:防止乙醇(丙酮)揮發、提取液變少、變干。
(2)制備濾條
將乾燥的定性濾紙剪成長與寬略小於試管長與寬的濾紙條,將濾紙條一端剪去兩角,在此端距頂端1 cm處用鉛筆畫一條細橫線。
①濾紙條的長與寬略小於試管:既能使濾紙條輕松地放入試管內,易於取出,也能防止濾紙條太小,彎曲塌陷在試管內。
②剪去濾紙條兩角的作用:1.保證濾紙能立在燒杯中2.保證濾紙上的濾液線能水平向上擴展。
③1 cm:保證濾紙條有足夠的長度泡在層析液中,又能使色素帶不浸在層析液(分離液)中。
④用鉛筆,不能用簽字筆、圓珠筆、畫筆的原因:簽字筆、圓珠筆、畫筆的筆液色素會也能溶於乙醇和層析液,污染從綠葉中提取的色素。
(3)畫濾液細線
用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線均勻畫細線(也可用玻片較短那一端的邊緣沾取濾液後,印在濾紙條上)。待濾液線干後,重復畫線一兩次。
①濾液線要細,要均勻:保證濾液色素在同一起始點上。
②待濾液線干後再重復畫線的原因:既保證了濾液線的色素量,也防止濾液線過寬。畫的次數越多,色素量越多,越好跑,色素帶也就分得越開,越清楚。
(4)分離光合色素
將適量的層析液(分離液)倒入試管,將濾紙條畫線一端朝下,輕輕插入層析液中,迅速塞緊試管口。
①適量的層析液:保證足量用於色素的分離,防止層析液浸沒濾液線,也防止空氣污染(層析液易揮發、有毒),避免試劑的浪費。
②層析液的作用:色素可溶於層析液中,不同的色素在層析液中的溶解度不同。溶解度高的色素隨層析液在濾紙上擴散得快;溶解度低的色素在濾紙上擴散得慢。這樣,最終不同的色素會在擴散過程中分離開來。
③注意不要讓層析液觸及濾液線。接觸後會使大量濾液溶於層析液中,導致實驗失敗。
④塞緊試管口的原因:層析液易揮發,且具一定的毒性。
(5)觀察、記錄
待層析液上緣擴散至接近濾紙條頂端時,將濾紙條取出,風干。觀察濾紙條上所出現的色素帶及其顏色,並做好記錄。
最後濾紙條上將分離出四條色素帶,顏色從上往下分別是橙黃色、黃色、藍綠色和黃綠色,四種色素分別是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a和葉綠素b。
❼ 葉綠體色素提取與分離實驗
用毛細玻璃管蘸取植物葉片研磨液畫一條濾液細線(在制備濾紙條之後)
加入二氧化硅是為了研磨的充分,加碳酸鈣是為了防止研磨時色素被破壞,加入丙烯來溶解色素。
層析也是由二十分石油醚、二份丙酮、一份苯混合,將濾紙下部(切記僅是濾液線以下)浸入層析液。
減去角是為了盡量讓層析液在濾紙上的擴散速度相等
❽ 提取葉綠素為什麼必須用無水乙醇,後面鑒別成分(層析法)必須專門配層析液(課本上這么講的)
其實葉綠素這個東西很嬌貴的,浸取所用的溶劑不同對其穩定性都有影響。
我做過實驗,浸取最適合的溶劑就是經精提過的無水乙醇,最理想,丁酮、乙酸乙酯等都不很好。並且乙醇也要用95%的那種,含水量高了時間長了都不可以。
你做層析,需要考慮載體對水的敏感性,對水太親和了恐怕對有機試劑就不那麼「友好」了。用活性氧化鋁作載體時關鍵一步的活化就說明問題。
❾ 葉綠素的提取和分離實驗中,畫濾液細線用的液體是什麼
畫濾液細線用的液體:丙酮(作用:溶解葉綠體中的色素)
葉綠體中的色素都能夠溶解於有機溶劑丙酮中,所以,可以用丙酮提取葉綠體中的色素。
層析液(石油醚):是一種脂溶性很強的有機溶劑。(作用:溶解並分離色素)
根據葉綠體中的四種色素在石油醚中的溶解度不同來進行分離,溶解度高的在濾紙上擴散的快,溶解度低的擴散得慢。溶解度最高的是胡蘿卜素,它隨石油醚在濾紙上擴散得最快,葉黃素和葉綠素a的溶解度次之;葉綠素b的溶解度最低,擴散得最慢。這樣,四種色素就在擴散過程中分離開來。
附:實驗教學方案—葉綠體中色素的提取和分離
實驗原理
葉綠體中的色素都能夠溶解於有機溶劑丙酮中,所以,可以用丙酮提取葉綠體中的色素。
層析液(石油醚)是一種脂溶性很強的有機溶劑。根據葉綠體中的四種色素在石油醚中的溶解度不同來進行分離,溶解度高的在濾紙上擴散的快,溶解度低的擴散得慢。溶解度最高的是胡蘿卜素,它隨石油醚在濾紙上擴散得最快,葉黃素和葉綠素a的溶解度次之;葉綠素b的溶解度最低,擴散得最慢。這樣,四種色素就在擴散過程中分離開來。
目的要求
1.學會提取和分離葉綠體中色素的方法和原理。 2.能分辨葉綠體中的四種色素。 材料用具
新鮮的綠色葉片(如菠菜葉片)。
乾燥的定性濾紙,燒杯( 100 mL),研缽,玻璃漏斗,吸管,剪刀,小試管,葯勺,量筒(10ml),天平,試管架 丙酮,層析液,二氧化硅,碳酸鈣。
方法步驟
1.提取綠色葉片中的色素
(1)取幾片綠色的葉片,去掉葉柄和主脈,用天平稱取5g葉片,剪碎,放入研缽中。
(2)向研缽中放入少許二氧化硅和碳酸鈣,進行充分的研磨。用量筒量取5ml丙酮,倒入研缽中,迅速充分研磨。 (3)將研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中進行過濾。將濾液收集到一個小試管中,及時用棉塞將試管目塞緊。
2.制備濾紙條
取一塊預先乾燥處理過的定性濾紙,將濾紙剪成長 10 cm、寬 1cm的濾紙條,在距濾紙條一端 1cm處用鉛筆畫一條細的橫線。
3.畫濾液細線、
用毛細吸管吸取少量濾液,沿鉛筆線均勻地畫出一條細而直的濾液細線。待濾液於後,再畫2~3次。
4.分離葉綠體中的色素
將3 mL層析液倒入燒杯中,將濾紙條(有濾液細線的一端朝下)略微料靠著燒杯的內壁,輕輕地插入到層析液中,隨後用培養皿蓋蓋上燒體;注意,不能讓濾紙上的濾液細線觸到層析液。 5.觀察實驗結果
看到四種色素的顏色後,取出濾紙條,觀察濾紙條上的色素帶顏色、位置、寬窄,並且填寫實驗報告。