40乙腈水溶液怎麼配置
A. 水和乙腈比例45:55,總共配置800ml,怎麼算
水和乙腈比例45:55,總共配置800ml,怎麼算?
45+55=100
水800×45/100=360(ml)
乙腈800×55/100=440(ml)
B. 如何配置要在加熱的時使用的流動相
A. 液相試劑要求
試劑如甲醇,乙腈必須為色譜級純,其他試劑也盡量使用色譜級純,試劑標簽上都會標有色譜級或HPLC等字樣。水為超純水或者直接購買質量有保證的純凈水。
B. 流動相配置注意事項
一般來說,溶劑的混合按體積比(V/V)或重量比(W/W)進行。溶液的體積因溫度而變化,所以按重量比混合配置流動相,樣品測定的重復性較好,但是操作繁瑣,通常多為體積混合。
體積混合有三種方式,例如50%乙腈水溶液:
方式(1):可以用量筒量取乙腈500ml,再量取水500ml,兩種液體在瓶內充分搖晃混合。
方式(2):可以先取500ml乙腈到1L容量瓶中然後用水定容。
方式(3):可以先取500ml水到1L容量瓶中然後用乙腈定容。
這三種方式配置得到的流動相組成都是不同的,即使不考慮其他方面因素,保留時間也不會相同。一般情況推薦使用方式(1) 來配置流動相。
C. 含緩沖鹽流動相的配製需注意的問題
配置緩沖鹽使用的鹽試劑也盡量使用色譜級純,稱樣要精準,為了達到要求,選用合適量程的天平且每天使用前對天平校正。按要求配置好以後必須通過0.45μm或0.22μm濾膜過濾並超聲脫氣20min以上。
注意:緩沖鹽要臨用新配。
D. 何時調節流動相pH值
採用反相色譜法分離弱酸(3≤pKa≤7)或弱鹼(7≤pKa≤8)樣品時,通過調節流動相的pH值,以抑制樣品組分的解離,增加組分在固定相上的保留,並改善峰形的技術稱為反相離子抑制技術。
(1)對於弱酸,流動相的pH值越小,組分的k值越大,當pH值遠遠小於弱酸的pKa值時,弱酸主要以分子形式存在;分析弱酸樣品時,通常在流動相中加入少量弱酸,常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和1%醋酸溶液。
(2)對於弱鹼,情況相反。分析弱鹼樣品時,通常在流動相中加入少量弱鹼,常用50mmol/L磷酸鹽緩沖液和30mmol/L三乙胺溶液。流動相中加入有機胺可以減弱鹼性溶質與殘余硅醇基的強相互作用,減輕或消除峰拖尾現象。所以在這種情況下有機胺(如三乙胺)又稱為減尾劑或除尾劑。
注意:PH的調節不可超出色譜柱的PH耐受范圍。