1m硼氫化鈉溶液怎麼配置
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瑕佽皟閰嶃傜7閰哥洂緙撳啿娑詫細
鍙栫7閰鎬簩姘㈤挔38.0g錛屼笌紓烽吀姘浜岄挔5.04g錛屽姞姘翠嬌鎴1000ml錛屽嵆寰椼
紓烽吀鐩愮紦鍐叉恫(pH2.0)銆
鐢叉恫:鍙栫7閰16.6ml錛屽姞姘磋嚦1000ml錛屾憞鍖銆備箼娑詫細鍙栫7閰告阿浜岄挔71.63g錛屽姞姘翠嬌婧惰В鎴1000ml銆傚彇涓婅堪鐢叉恫72.5ml涓庝箼娑27.5ml娣峰悎錛屾憞鍖錛屽嵆寰椼
紓烽吀鐩愮紦鍐叉恫(pH2.5)錛氬彇紓烽吀浜屾阿閽100g錛屽姞姘800ml錛岀敤鐩愰吀璋冭妭pH鑷2.5,鐢ㄦ按紼閲婅嚦1000ml銆
紓烽吀鐩愮紦鍐叉恫(pH5.0)錛氬彇0.2mol/L紓烽吀浜屾阿閽犳憾娑蹭竴瀹氶噺,鐢ㄦ阿姘у寲閽犺瘯娑茶皟鑺俻H鍊艱嚦5.0錛屽嵆寰椼
鎵╁睍璧勬枡錛
鍦ㄩ吀鎬ф憾娑蹭笅紓烽吀瀹樿兘鍥㈢殑緇撴瀯寮忋傚湪紕辨х殑婧舵恫涓嬶紝璇ュ畼鑳藉洟浼氶噴鏀句袱涓姘㈠師瀛愶紝騫剁誨寲紓烽吀鐩愬甫鏈-2鐨勫艦寮忕數鑽楓傜7閰哥洂紱誨瓙鏄涓涓澶氬師瀛愮殑紱誨瓙錛屽畠鍖呭惈涓涓紓峰師瀛愶紝騫剁敱鍥涗釜姘у師瀛愭墍鍖呭洿錛屽艦鎴愪竴涓姝e洓闈浣撱
紓烽吀鐩愮誨瓙甯︽湁-3鐨勫艦寮忕數鑽鳳紝涓旀槸紓烽吀姘㈢洂紱誨瓙鐨勫叡杞紕憋紱紓烽吀姘㈢洂紱誨瓙鍒欐槸紓烽吀浜屾阿鐩愮誨瓙鐨勫叡杞紕憋紱鑰岀7閰鎬簩姘㈢洂紱誨瓙鍙堟槸紓烽吀鐨勫叡杞紕便傚畠鏄涓涓瓚呬環鍒嗗瓙錛堢7鍘熷瓙鍦ㄥ叾浠峰3灞傛湁鐫10涓鐢靛瓙錛夈傜7閰哥洂浜︽槸涓涓鏈夋満紓峰寲鍚堢墿錛屽叾鍖栧﹀紡涓篛P(OR)銆
闄や簡涓浜涚⒈閲戝睘澶栵紝澶ч儴浠界7閰哥洂錛屽湪鏍囧噯鐘舵佷笅錛岄兘鏄涓嶅彲婧朵簬姘寸殑銆
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鍙傝冭祫鏂欐潵婧愶細鐧懼害鐧劇-紓烽吀鐩
⑵ 奼傚姪pH=7.8嫻撳害涓0.01mol/L鐨凾ris-HCl緙撳啿娑茬殑閰嶅埗鏂規硶
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0.05M鐨勫彲浠0.2M鐨則ris25ml錛0.1N HCl 29ml錛屽姞姘寸█閲婂埌100ml錛宲H璁¤皟涓媝H
0.01鐨勬妸榪欎釜紼閲5鍊嶏紵鍐嶈皟涓媝H鍚
Tris-HCl緙撳啿娑茬殑閰嶅埗鏂規硶錛
Tris-HCl緙撳啿娑茬殑閰嶅埗鏂規硶錛
Tris錛氫笁緹熺敳鍩烘皚鍩虹敳鐑
涓夌緹鐢插熀姘ㄥ熀鐢茬兎錛圱ris(hydroxymethyl)aminomethane錛屼竴鑸綆縐頒負Tris錛夋槸涓縐嶆湁鏈哄寲鍚堢墿錛屽叾鍒嗗瓙寮忎負(HOCH2)3CNH2銆俆ris琚騫挎硾搴旂敤浜庣敓鐗╁寲瀛﹀拰鍒嗗瓙鐢熺墿瀛﹀疄楠屼腑鐨勭紦鍐叉恫鐨勫埗澶囥備緥濡傦紝鍦ㄧ敓鐗╁寲瀛﹀疄楠屼腑甯哥敤鐨凾AE鍜孴BE緙撳啿娑詫紙鐢ㄤ簬鏍擱吀鐨勬憾瑙o級閮介渶瑕佺敤鍒癟ris銆傜敱浜庡畠鍚鏈夋皚鍩哄洜姝ゅ彲浠ヤ笌閱涘彂鐢熺緝鍚堝弽搴
Tris涓哄急紕憋紝鍦ㄥゆ俯錛25鈩冧笅錛屽畠鐨刾Ka涓8.1錛涙牴鎹緙撳啿鐞嗚猴紝Tris緙撳啿娑茬殑鏈夋晥緙撳啿鑼冨洿鍦╬H7.0鍒9.2涔嬮棿銆
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鐢變簬Tris緙撳啿娑蹭負寮辯⒈鎬ф憾娑詫紝DNA鍦ㄨ繖鏍風殑婧舵恫涓浼氳鍘昏川瀛愬寲錛屼粠鑰屾彁楂樺叾婧惰В鎬с備漢浠甯稿父鍦═ris鐩愰吀緙撳啿娑蹭腑鍔犲叆EDTA鍒舵垚鈥淭E緙撳啿娑測濓紝TE緙撳啿娑茶鐢ㄤ簬DNA鐨勭ǔ瀹氬拰鍌ㄥ瓨銆傚傛灉灝嗚皟鑺俻H鍊肩殑閰告憾娑叉崲鎴愪箼閰革紝鍒欒幏寰椻淭AE緙撳啿娑測濓紙Tris/Acetate/EDTA錛夛紝鑰屾崲鎴愮〖閰稿垯鑾峰緱鈥淭BE緙撳啿娑測濓紙Tris/Borate/EDTA錛夈傝繖涓ょ嶇紦鍐叉恫閫氬父鐢ㄤ簬鏍擱吀鐢墊吵瀹為獙涓銆 鐢ㄩ旓細鏈夋満鍚堟垚涓闂翠綋銆傚湪鐢墊吵緙撳啿娑蹭腑鍚岀敇姘ㄩ吀鏋勬垚緙撳啿浣撶郴錛岀ǔ瀹氱數娉寵繃紼嬩腑鐨凱H鍊箋傚湪鍑濊兌涓涔熻搗鍒扮ǔ瀹歅H鐨勪綔鐢錛屽彧涓嶈繃鏄疶ris-HCl緙撳啿浣撶郴銆
Tris緙撳啿娑蹭笉浠呰騫挎硾鐢ㄤ綔鏍擱吀鍜岃泲鐧借川鐨勬憾鍓傦紝榪樻湁璁稿氶噸瑕佺敤閫斻俆ris琚鐢ㄤ簬涓嶅悓pH鏉′歡涓嬬殑錏嬬櫧璐ㄦ櫠浣撶敓闀褲俆ris緙撳啿娑茬殑浣庣誨瓙寮哄害鐗圭偣鍙鐢ㄤ簬綰胯櫕錛圕. elegans鏍哥氦灞傝泲鐧絣amin錛夌殑涓闂寸氦緇寸殑褰㈡垚銆俆ris涔熸槸錏嬬櫧璐ㄧ數娉崇紦鍐叉恫鐨勪富瑕佹垚鍒嗕箣涓銆傛ゅ栵紝Tris榪樻槸鍒跺囪〃闈㈡椿鎬у墏銆佺~鍖栦績榪涘墏鍜屼竴浜涜嵂鐗╃殑涓闂寸墿銆俆ris涔熻鐢ㄤ綔婊村畾鏍囧噯鐗┿
1 M Tris-HCl (pH7.4錛7.6錛8.0)
緇勪喚嫻撳害 1 M Tris-HCl 閰嶅埗閲 1L 閰嶅埗鏂規硶錛
1.縐伴噺121.1 g Tris緗浜巐 L鐑ф澂涓銆
2.鍔犲叆綰800 ml鐨勫幓紱誨瓙姘達紝鍏呭垎鎼呮媽婧惰В銆 3.鎸変笅琛ㄥ姞鍏ユ祿HCl閲忚皟鑺傛墍闇瑕佺殑pH鍊箋
pH鍊 嫻揌Cl 7.4 綰70 ml 7.6 綰60 ml 8.0 綰42ml
4.灝嗘憾娑插畾瀹硅嚦1 L銆
5.楂樻俯楂樺帇鐏鑿屽悗錛屽ゆ俯鍌ㄥ瓨銆 娉ㄦ剰錛氬簲浣挎憾娑插喎鍗磋嚦瀹ゆ俯鍚庡啀璋冨畾pH鍊礆紝鍥犱負Tris婧舵恫鐨刾H鍊奸殢娓╁害鐨勫彉鍖栧樊寮傚緢澶э紝娓╁害姣忓崌楂1鈩冿紝婧舵恫鐨刾H鍊煎ぇ綰﹂檷浣0.03涓鍗曚綅銆
1.5 M Tris-HCl (pH8.8)
緇勪喚嫻撳害 1.5 MTris-HCl 閰嶅埗閲 1 L 閰嶅埗鏂規硶
1.縐伴噺181.7 g Tris緗浜1 L鐑ф澂涓銆
2.鍔犲叆綰800 ml鐨勫幓紱誨瓙姘達紝鍏呭垎鎼呮媽婧惰В銆 3.鐢ㄦ祿HCl璋冭妭pH鍊艱嚦8.8銆 4.灝嗘憾娑插畾瀹硅嚦1 L銆
5.楂樻俯楂樺帇鐏鑿屽悗錛屽ゆ俯鍌ㄥ瓨銆 娉ㄦ剰錛氬簲浣挎憾娑插喎鍗磋嚦瀹ゆ俯鍚庡啀璋冨畾pH鍊礆紝鍥犱負Tris婧舵恫鐨刾H鍊奸殢娓╁害鐨勫彉鍖栧樊寮傚緢澶э紝娓╁害姣忓崌楂1鈩冿紝婧舵恫鐨刾H鍊煎ぇ綰﹂檷浣0.03涓鍗曚綅銆
TE鍗砊ris-EDTA buffer錛10mM Tris錛1mM EDTA錛宲H7.4 pH7.6 pH8.0錛夈
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緇勪喚嫻撳害錛 100 mM Tris-HCl錛10 mM EDTA 閰嶅埗閲忥細 1 L 閰嶅埗鏂規硶錛
1. 閲忓彇涓嬪垪婧舵恫錛岀疆浜巐 L鐑ф澂涓銆
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4錛7.6錛8.0) 100 ml 500 mM EDTA(pH8.0) 20 ml
2.鍚戠儳鏉涓鍔犲叆綰800 ml鐨勫幓紱誨瓙姘達紝鍧囧寑娣峰悎銆 3.灝嗘憾娑插畾瀹硅嚦1 L鍚庯紝楂樻俯楂樺帇鐏鑿屻 4.瀹ゆ俯鍌ㄥ瓨銆
奼傚姪pH=8.0錛10mmol/L鐨凾ris-Hcl緙撳啿娑插備綍閰嶅埗
涓鑸鍏堥厤緗鎴1M鐨勬瘝娑詫紝鐢ㄧ殑鏃跺欑█閲婂埌10mM.
鍙傝冿細1 M Tris buffer(緙撳啿鑼冨洿pH7.0-8.5) 1L
1錛岀О鍙121.1 g Tris-Base錛屽姞鍏700 ml鍙岃捀姘達紝鏀劇疆杞瀛愶紝鏃嬭漿娣峰悎婧惰В銆,
2錛宲H璁℃牎鍑員ris-Base瀹屽叏婧惰В鍚庯紝錛岀劧鍚庡姞鍏ユ祿鐩愰吀榪涜岄吀搴﹁皟鑺傦紙鍔犲叆嫻撶洂閰稿悗娓╁害浼氬崌楂橈級錛岃皟鑷蟲帴榪戠洰鐨刾H鏃訛紝瑙傚療娓╁害鍙樺寲騫剁敤鍔犵儹錛堟按嫻達紝寰娉錛夋垨鍐版盪鐨勬柟娉曡皟鑺傛俯搴﹁嚦25 鈩兟0.2 鈩冿紝浣挎俯搴﹀湪25 鈩兟0.2 鈩冩椂鍒氬ソ杈懼埌鎵闇pH鍊礆紙pH鍊煎厑璁歌宸鹵0.01錛夈
3錛宲H鍊艱皟鑺傚畬姣曞悗錛岀敤瀹歸噺鐡跺畾瀹硅嚦1 L錛0.45渭m婊よ啘榪囨護錛屽掑叆璇曞墏鐡朵腑鍌ㄥ瓨錛屾爣璁板ソ鏃ユ湡鍜屽悕縐般
4錛岄厤1 L pH8.0鐨凾ris錛岀害闇瑕42 ml嫻撶洂閰搞
0.2mol/L 鐨 PBS 錛圥H8.0錛夌紦鍐叉恫濡備綍閰嶅埗錛 0.05mol/L鐨凾ris-HCl錛圥H8.0錛夌紦鍐叉恫濡備綍閰嶅埗錛
絎涓縐嶏紝縐板彇120脳0.2=24鍏嬬7閰鎬簩姘㈤挔錛屽姞鍏ュ埌1鍗囨按涓鍏呭垎鎼呮媽鍚庯紝鍐嶅湪鎼呮媽鐨勫悓鏃剁紦鎱㈠姞鍏1%鐨勭伀紕辨憾娑詫紝闅忔椂嫻嬮噺PH鍊礆紝鐩磋嚦PH=8.0鏃躲
絎浜屼腑錛岀О鍙朤ris121脳0.05=6.05鍏嬶紝鍔犲叆鍒1鍗囨按涓鍏呭垎鎼呮媽鍚庯紝鍐嶅湪鎼呮媽鐨勫悓鏃剁紦鎱㈠姞鍏1%鐨勭洂閰告憾娑詫紝鐩磋嚦PH=8.0銆
Tris-HCL 0.05mol/L pH7.4 緙撳啿娑叉庝箞閰
Tris-HCl緙撳啿娑詫紙0.05mol/L錛宲H7,4錛
50ml 0.1mol/L涓夌緹鐢插熀姘ㄥ熀鐢茬兎錛圱ris錛夋憾娑蹭笌x ml 0.1mol/L 鐩愰吀娣峰寑鍚庯紝鍔犳按紼閲婅嚦100ml錛屽氨鏄0.05mol/l錛屽緩璁棰樹富鏍規嵁闇瑕侀厤緗澶氬皯姣鍗囷紝璋㈣阿
奼傚姪Tris-HCl pH8.0 鐨勯厤鍒舵柟娉
浠ラ厤1L涓轟緥錛
Tris鐨勫垎瀛愰噺涓121.14
闇瑕乀ris涓121.14*50/1000=6.057錛屽嵆闇瑕乀ris6.057g銆
鐢ㄥぇ綰﹀弻钂告按800ml婧惰В榪欎簺Tris銆傜劧鍚庣敤鍚堥傛祿搴HCl錛堟瘮濡1mol/L,鎴栬0.5mol/L鐨勯兘琛岋級璋冭妭pH鍒8.0.鐒跺悗鍔犲弻钂告按錛屽畾瀹瑰埌1000ml銆傚傛灉綺楃暐瀹氬瑰彲浠ョ敤閲忕瓛錛岀簿紜鍙浠ョ敤瀹歸噺鐡躲
璇鋒暀pH=8.0錛10mmol/L鐨凾ris-Hcl緙撳啿娑插備綍閰嶅埗
*
10 mmol/L Tris-HCl(pH 8.0)
1 mmol/L EDTA(pH 8.0)
鍥犱負鍚鏈変互涓婁袱縐嶇墿璐錛屾墍浠ョО涓篢E銆
閰嶅埗鍒嗕笁姝ワ細
1) 1 M Tris-HCl (pH 8.0) 50 ml鐨勯厤鍒訛細縐板彇Tris紕6.06 g錛屽姞瓚呯函姘40 ml婧惰В錛屾淮鍔犳祿HCl綰2.1 ml璋僷H鑷8.0錛屽畾瀹硅嚦50 ml銆
2) 0.5 M EDTA錛坧H 8.0錛50 ml鐨勯厤鍒訛細縐板彇EDTA-Na2路2H2O 9.306 g錛屽姞瓚呯函姘35 ml錛屽墽鐑堟悈鎷岋紝鐢ㄧ害1 g NaOH棰楃矑璋僷H鑷8.0錛屽畾瀹硅嚦50 ml銆傦紙EDTA浜岄挔鐩愰渶鍔犲叆NaOH灝唒H璋冭嚦鎺ヨ繎8.0鏃訛紝鎵嶄細婧惰В銆傦級
3) 1脳TE錛10 mM Tris-HCl錛宲H 8.0錛1 mM EDTA錛宲H 8.0錛夌殑閰嶅埗錛
浣滅敤錛
TE緙撳啿娑叉槸寮辯⒈鎬,瀵笵NA鐨勭⒈鍩烘湁淇濇姢鎬,(DNA鍦ㄥ畠鏄鐨勭ǔ瀹氭ц緝濂,涓嶆槗鐮村潖鍏跺畬鏁存ф垨浜х敓寮鐜鍙婃柇瑁),鍖呮嫭鎻愬彇濂界殑DNA涔熻佹斁鍦═E緙撳啿娑叉槸鍌ㄥ瓨. 10mMTris-Hcl錛宲H鏈7.47.68.0涓夌嶃
EDTA璋冨埌8.0鏄涓轟簡鏇村ソ婧惰В錛屽叾浠栧彧瑕佽皟鍒扮浉搴攑H灝卞彲浠ャ俆ris鍦7錛8闄勮繎緙撳啿鑳藉姏寰堝己錛屾墍浠ュ姞8.0鐨凟DTA涓嬪幓鍚庯紝涓嶄細鏀瑰彉pH銆