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1比3福林試劑如何配置

發布時間: 2022-08-23 00:04:40

⑴ 怎麼配2mol/l的福林酚試劑

在2升磨口迴流瓶中,加入100克鎢酸鈉(Na2WO4·2H2O),25克鉬酸鈉(Na2MoO4·2H2O)及700毫升蒸餾水,再加50毫升85%磷酸,100毫升濃鹽酸,充分混合,接上迴流管,以小火迴流10小時,迴流結束時,加入150克 硫 酸 鋰(Li2SO4),50毫升蒸餾水及數滴液體溴,開口繼續沸騰15分鍾,以便驅除過量的溴。冷卻後溶液呈黃色(如仍呈綠色,須再重復滴加液體溴的步驟)。稀釋至1升,過濾,濾液置於棕色試劑瓶中保存。使用時用標准NaOH滴定,酚酞作指示劑,然後適當稀釋,使最終的酸濃度為2mol/l左右。

⑵ 福林試劑的介紹

福林試劑,是多種化合物配製成的混合物,可用比色法測定。

⑶ 福林肖卡試劑怎麼配製

福林-肖卡試劑的配製:取鎢酸鈉10g,鉬酸鈉2.5g,加水70mL,85%磷酸5mL,鹽酸10mL,置於200mL燒瓶中,緩緩加熱迴流10h,放冷,再加入硫酸鋰15g,水5ml與溴水1滴煮沸約15minn,至溴除盡,放冷至室溫,加水使成100mL,過濾。濾液不能呈綠色,置於棕色瓶中,於冰箱中保存。臨用前用蒸餾水稀釋l0倍使用。

⑷ Folin-Ciocalteu 試劑如何配製

FoLin-CiocaLteu試劑的配製:將100g鎢酸鈉(Na2WO4 ·2H2O), 25g鉬酸鈉( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸餾水,50 mL 85%磷酸及100 mL濃鹽酸裝入帶迴流裝置的2000mL圓底燒瓶中,充分混合,文火緩慢迴流10h,在加入150g硫酸鋰(Li2SO4),50 mL蒸餾水及數滴液溴,然後將燒瓶內溶液開口煮15min,以驅除過量的溴,冷至室溫後用容量瓶定容至1000mL,過濾。濾液呈微綠色。
吸取10 mL 1 moL/ mL的Na0H溶液,放入100 mL錐形瓶內,加入2滴酚酞指示劑,用上述濾液滴定。當溶液的顏色由綠經紫紅到紫灰,到突然轉變成墨綠色即為滴定終點。根據滴定所用的濾液量計算其酸度(相當於2 moL/ L HCL溶液)。將濾液稀釋到H+濃度為1 moL/ L,此液即為FoLin酚試劑。將其置於棕色試劑瓶內,保存在冰箱中。用前稀釋2倍。

⑸ 您好,能告訴福林酚試劑的試劑配製方法嗎謝謝

olin—酚試劑法(Lowry法)
這種蛋白質測定法是最靈敏的方法之一。過去此法是應用最廣泛的一種方法,由於其試劑乙的配製較為困難(現在已可以訂購),近年來逐漸被考馬斯亮蘭法所取代。此法的顯色原理與雙縮脲方法是相同的,只是加入了第二種試劑,即Folin—酚試劑,以增加顯色量,從而提高了檢測蛋白質的靈敏度。這兩種顯色反應產生深蘭色的原因是:?在鹼性條件下,蛋白質中的肽鍵與銅結合生成復合物。 Folin—酚試劑中的磷鉬酸鹽—磷鎢酸鹽被蛋白質中的酪氨酸和苯丙氨酸殘基還原,產生深蘭色(鉬蘭和鎢蘭的混合物)。在一定的條件下,蘭色深度與蛋白的量成正比。 Folin—酚試劑法最早由Lowry確定了蛋白質濃度測定的基本步驟。以後在生物化學領域得到廣泛的應用。這個測定法的優點是靈敏度高,比雙縮脲法靈敏得多,缺點是費時間較長,要精確控制操作時間,標准曲線也不是嚴格的直線形式,且專一性較差,干擾物質較多。對雙縮脲反應發生干擾的離子,同樣容易干擾Lowry反應。而且對後者的影響還要大得多。酚類、檸檬酸、硫酸銨、Tris緩沖液、甘氨酸、糖類、甘油等均有干擾作用。濃度較低的尿素(0.5%),硫酸納(1%),硝酸納(1%),三氯乙酸(0.5%),乙醇(5%),乙醚(5%),丙酮(0.5%)等溶液對顯色無影響,但這些物質濃度高時,必須作校正曲線。含硫酸銨的溶液,只須加濃碳酸鈉—氫氧化鈉溶液,即可顯色測定。若樣品酸度較高,顯色後會色淺,則必須提高碳酸鈉—氫氧化鈉溶液的濃度1~2倍。 進行測定時,加Folin—酚試劑時要特別小心,因為該試劑僅在酸性pH條件下穩定,但上述還原反應只在pH=10的情況下發生,故當Folin一酚試劑加到鹼性的銅—蛋白質溶液中時,必須立即混勻,以便在磷鉬酸—磷鎢酸試劑 被破壞之前,還原反應即能發生。 此法也適用於酪氨酸和色氨酸的定量測定。 此法可檢測的最低蛋白質量達5mg。通常測定范圍是20~250mg。

⑹ 如何使用Folin

實驗原理:
採用Folin-酚法測定,Folin-酚試劑由甲試劑和乙試劑組成.甲試劑由碳酸鈉,氫氧化鈉,硫酸銅及酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6•4H2O)組成.多肽中的肽鍵在鹼性條件下,與酒石酸鉀鈉銅鹽溶液起作用,生成紫紅色絡合物.乙試劑是由磷鉬酸、磷鎢酸、硫酸和溴等組成.此試劑在鹼性條件下,易被多肽中酪氨酸的酚基還原呈藍色反應,其色澤深淺與多肽含量成正比[28].
實驗所需試劑的配置:
(1) 試劑甲:(A) :10g Na2CO3,2g NaOH和0.25g酒石酸鉀鈉(KNaC4H4O6•4H2O),溶解於500mL去離子水.(B) :0.5g 硫酸銅(CuSO4•5H2O)溶解於100mL 去離子水中;將50份(A)與1份(B)混合,即為試劑甲.
(2) 試劑乙:將Folin-酚試劑與去離子水按1:1混合.
(3) 標准蛋白質溶液:精確稱取結晶牛血清蛋白,溶於去離子水中,濃度為250μg/mL左右.牛血清蛋白溶於水,若混濁,可改用0.9%(質量分數)NaCl溶液.
(4) 樣品溶液:通常根據樣品中蛋白含量的不同,樣品在測定前需要進行適當倍數的稀釋.
實驗步驟:
(1) 標准曲線的測定:取16支大試管,1支作空白,3隻留作未知樣品,其餘試管分成兩組,分別加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 mL標准蛋白質溶液(濃度為250μg/mL).用水補足到1.0 mL,然後每支試管加入5mL試劑甲,在漩渦混合器上迅速混合,於室溫(20-25℃)放置10 min.再向各個試管加入0.5mL試劑乙,同樣立即混合.然後在室溫下放置30 min,以未加蛋白質溶液的第一支試管作為空白對照,於700nm處測定各試管中溶液的吸光度值,以蛋白質的量為橫坐標,吸光度值為縱坐標,繪制出標准曲線.
(2) 樣品的測定:取1mL 樣品溶液(其中蛋白質含量約20-25μg),按上述方法進行操作,取1mL水代替樣品作為空白對照.

⑺ folin-ciocalteu 試劑 怎麼配

Folin-Ciocalteu(福林-西奧卡特)試劑即Folin-酚試劑中的試劑Ⅱ。(不包括用氫氧化鈉標准滴定溶液滴定)濾液應呈金黃色,如呈綠色,棄去。置於冰箱中。使用時,1 體積用2 體積水稀釋。此試劑能被許多酚如苯酚、間甲酚、對甲酚、對氯間甲酚和對氯酚等鹼性溶液還原而呈現藍色,因此常用於酚的光度測定。食品中的抗氧化劑丁基羥基茴香醚(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT )及沒食子酸丙酯(PG)在比色測定其含量均用Folin-酚試劑Ⅱ做顯色,呈藍色,但試樣中不能有還原劑存在。
Folin-酚試劑(用於蛋白質含量的比色測定)
試劑Ⅰ:由下述四種溶液組成。
A .4%碳酸鈉
B.0.2mol/l 氫氧化鈉溶液
C.1%硫酸銅溶液(無水硫酸銅)
D.2%酒石酸鉀鈉(或酒石酸鉀、酒石酸鈉)
在使用前,將A 與B 等體積混合,將C 與D 等體積混合。然後將這兩種溶液按照50:1的比例混合,即Folin-酚試劑Ⅰ。該試劑只能放一天,過期失效。
試劑Ⅱ:
在2 升的磨口迴流裝置中加入100 克二水鎢酸鈉,25 克二水鉬酸鈉,700 毫升水,再加50 毫升85%磷酸及100 毫升濃鹽酸,充分混合後,以小火迴流10 小時。再加入150 克硫酸鋰,50 毫升水及數滴液溴,然後開口繼續沸騰15 分鍾,以便驅除過量的溴。冷卻後定容成一升。過濾,置棕色瓶中,保存在冰箱中。使用時用氫氧化鈉標准滴定溶液滴定,以酚酞做指示劑,而後適當稀釋(約1 倍),使最後濃度為1mol/l H+(1N 酸),此即為Folin-酚試劑Ⅱ應用液。貯於冰箱中可長期保存
這個試劑可以直接

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