瑞士氏染液怎麼配置

A. 革蘭氏染色中需要的各種染色液（結晶紫染色液、碘液、番紅復染液）是怎樣配製的

革蘭氏(Gram)染色液

1．草酸銨結晶紫染液

A液：結晶紫(crystal violet) 1g

95%酒精 20ml

B液：草酸銨(ammonium oxalate) 0．8g

蒸餾水 80ml

混合A、B二液，靜置48小時後使用。

2．盧戈氏(Lugol)碘液

碘片 1．0g

碘化鉀 2．0g

蒸餾水 300ml

先將碘化鉀溶解在少量水中，再將碘片溶解在碘化鉀溶液中，待碘全溶後，加足水分即成。

3．95%的酒精溶液。

4．沙黃復染液
沙黃 0.25g
95%的酒精 10ml
蒸餾水 90ml
將沙黃溶於乙醇中，再用蒸餾水稀釋。

B. 瑞氏染色步驟

操作步驟：
1.滴加瑞氏吉姆薩A液(約0.5ml-0.8ml)塗片上，並讓染液覆蓋整個標本染色1min；
2.
再將瑞氏吉姆薩B液加於A液上面（滴加量為A液的2-3倍），以嘴或洗耳球吹出微風使液面產生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3-10min。（染血片時間可略短，染骨髓片時間應視細胞量多少而異）
3.水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖去，以防有沉渣沉澱在標本上），乾燥、鏡檢。
注意事項：
1.
染色時間須視何種標本，塗片厚度，有核細胞多少，何種細胞及室溫等而定；通常染血液塗片時滴加B液後染2-4分鍾，染骨髓片則應不少於8分鍾；氣溫較低時，可適當延長染色時間。染色結果如出現嗜酸性粒細胞變鹼，則考慮是否染色時間太長所致。
2.做骨髓塗片時，因為骨髓纖維蛋白含量較高，凝固較快，所以塗片過程要快。骨髓不可用草酸鹽抗凝，否則會使血細胞核變形，核染色質緻密，胞漿空泡形成，出現草酸鹽結晶。
3.染液量需充足，勿使染液蒸發乾燥，以防染料沉著於塗片上。
4.做細胞染色時，當天氣寒冷或濕度較大時，應於37℃溫箱中保溫促干，以免細胞變形縮小或在染色時脫片。
5.染料放置時間越長，染色效果越好。
6.
本試劑應由專業人員使用。
拓展資料
Wrfeht和Giemsa都於1902年報告了各自的新的血液學染色劑，其主要特點是在制備多色性亞甲藍（主要指天青B）方面做了改進，使血細胞和瘧原蟲著色較好，操作簡便。
上述染色法均是含伊紅和亞甲基藍衍生物的復合染料。在臨床檢驗工作中，瑞氏染色法常用於血液、其他體液、分泌物和排泄物塗片中各種細胞的染色，有利於在顯微鏡下觀察細胞形態及對細胞進行分類檢查。
【染色原理】
瑞氏染色分兩相進行，第一相是酸性染料伊紅與細胞中的鹼性物質如血紅蛋白、嗜酸性顆粒等結合；鹼性染料天青B與細胞中的酸性物質如核染色質（chro－matin）、特異中性顆粒、血小板及富含核蛋白的胞質結合。第二相是天青B和伊紅在適宜條件下形成紫色的天青B一伊紅復合物（azure
B－eosin
complex），這種復合物是形成Romanowsky－Giemsa效應的基礎。
Romanowsky－Giemsa效應包括：①白細胞核染色質染成紫色，瘧原蟲的染色質染成紅色；②中性粒細胞的顆粒及血小板顆粒區染成紫色；③產生本效應必須有兩種染料參與，一種是天青B，另一種是伊紅。
Wittekind（1985）指出，天青B與DNA分子中的磷酸基結合，而伊紅既與DNA分子中的陽離子部位結合，又與天青B結合，與天青B的結合力來源於電子供一受體的電子轉移力，天青B的甲氨基（－NHCHs）與伊紅分子中的叛基（－COOH）間形成氫鍵。因此，天青B是噻嗪類染料中能與伊紅形成復合物的最佳選擇，因為擁有四個甲基側鏈的亞甲藍不能以氫鍵與伊紅結合。
甲醇除作為染料的溶劑，能將瑞氏染料解離成帶正電荷的天青B和帶負電荷伊紅外，因其具有脫水力，還可將細胞固定為一定形態，並使蛋白沉澱為顆粒狀、網狀結構，增加細胞與染料的接觸表面，增強染色效果。
細胞中的各種有機物質（特別是蛋白質）、染料等對環境的州值非常敏感。如環境偏酸，氫離子增多，降低對鹼性染料的親和力；增強伊紅著色，出現異常紅染；相反，則可出現異常藍染。最佳環境應維持在PH值6
4～6、8.因此，必須使用緩沖溶液。
參考資料：
搜狗網路_瑞氏染色
瑞氏染色原理及方法_醫學教育網

C. 瑞氏染色的步驟是什麼

操作步驟：

1.滴加瑞氏吉姆薩A液(約0.5ml-0.8ml)塗片上，並讓染液覆蓋整個標本染色1min；

2. 再將瑞氏吉姆薩B液加於A液上面（滴加量為A液的2-3倍），以嘴或洗耳球吹出微風使液面產生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3-10min。（染血片時間可略短，染骨髓片時間應視細胞量多少而異）

3.水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖去，以防有沉渣沉澱在標本上），乾燥、鏡檢。

注意事項：

1. 染色時間須視何種標本，塗片厚度，有核細胞多少，何種細胞及室溫等而定；通常染血液塗片時滴加B液後染2-4分鍾，染骨髓片則應不少於8分鍾；氣溫較低時，可適當延長染色時間。染色結果如出現嗜酸性粒細胞變鹼，則考慮是否染色時間太長所致。

2.做骨髓塗片時，因為骨髓纖維蛋白含量較高，凝固較快，所以塗片過程要快。骨髓不可用草酸鹽抗凝，否則會使血細胞核變形，核染色質緻密，胞漿空泡形成，出現草酸鹽結晶。

3.染液量需充足，勿使染液蒸發乾燥，以防染料沉著於塗片上。

4.做細胞染色時，當天氣寒冷或濕度較大時，應於37℃溫箱中保溫促干，以免細胞變形縮小或在染色時脫片。

5.染料放置時間越長，染色效果越好。

6. 本試劑應由專業人員使用。

拓展資料

Wrfeht和Giemsa都於1902年報告了各自的新的血液學染色劑，其主要特點是在制備多色性亞甲藍（主要指天青B）方面做了改進，使血細胞和瘧原蟲著色較好，操作簡便。

上述染色法均是含伊紅和亞甲基藍衍生物的復合染料。在臨床檢驗工作中，瑞氏染色法常用於血液、其他體液、分泌物和排泄物塗片中各種細胞的染色，有利於在顯微鏡下觀察細胞形態及對細胞進行分類檢查。

【染色原理】

瑞氏染色分兩相進行，第一相是酸性染料伊紅與細胞中的鹼性物質如血紅蛋白、嗜酸性顆粒等結合；鹼性染料天青B與細胞中的酸性物質如核染色質（chro－matin）、特異中性顆粒、血小板及富含核蛋白的胞質結合。第二相是天青B和伊紅在適宜條件下形成紫色的天青B一伊紅復合物（azure B－eosin complex），這種復合物是形成Romanowsky－Giemsa效應的基礎。

Romanowsky－Giemsa效應包括：①白細胞核染色質染成紫色，瘧原蟲的染色質染成紅色；②中性粒細胞的顆粒及血小板顆粒區染成紫色；③產生本效應必須有兩種染料參與，一種是天青B，另一種是伊紅。

Wittekind（1985）指出，天青B與DNA分子中的磷酸基結合，而伊紅既與DNA分子中的陽離子部位結合，又與天青B結合，與天青B的結合力來源於電子供一受體的電子轉移力，天青B的甲氨基（－NHCHs）與伊紅分子中的叛基（－COOH）間形成氫鍵。因此，天青B是噻嗪類染料中能與伊紅形成復合物的最佳選擇，因為擁有四個甲基側鏈的亞甲藍不能以氫鍵與伊紅結合。

甲醇除作為染料的溶劑，能將瑞氏染料解離成帶正電荷的天青B和帶負電荷伊紅外，因其具有脫水力，還可將細胞固定為一定形態，並使蛋白沉澱為顆粒狀、網狀結構，增加細胞與染料的接觸表面，增強染色效果。

細胞中的各種有機物質（特別是蛋白質）、染料等對環境的州值非常敏感。如環境偏酸，氫離子增多，降低對鹼性染料的親和力；增強伊紅著色，出現異常紅染；相反，則可出現異常藍染。最佳環境應維持在PH值6 4～6、8.因此，必須使用緩沖溶液。

網路_瑞氏染色

瑞氏染色原理及方法_醫學教育網

D. 吉姆薩染液的配製

①甲液：取瑞氏染粉1克,姬姆薩染粉0.3g,置於乾燥清潔研缽中,另備甲醇（不含水或丙酮）500ml分數次加少量甲醇研磨,分次收集於棕色玻璃瓶中,每天早晚各搖3分鍾,經1星期後即可使用.
②乙液：（磷酸緩沖液 PH值6.7.0）：
磷酸二氫鉀（無水） 0.3g
磷酸氫二鈉（無水） 0.2g
加適量水溶解,校正PH值,加水至1L,可加入0.01%TritonX—100改善染色性.

E. 血塗片染色常用緩沖液ph是多少

血塗片染色常用緩沖液ph是：6.0----6.5

1、血塗片染色包括兩個過程：固定和染色。固定是將細胞蛋白質和多糖等成分迅速交聯凝固，以保持細胞原有形態結構不發生變化。常用的染色方法有瑞特染色法(Wright)、姬姆薩染色法(Giemsa)等。
2、目的探討血細胞塗片瑞氏染色所用緩沖液的優選。方法在室溫（25℃）下分別用pH值為5.0、5.5、6.0、6.5、7.0的混合磷酸鹽（KH2PO4-Na2HPO4）、乙酸鹽（HAc-NaAc）緩沖液稀釋的瑞氏染液對血塗片進行染色,並觀察染色效果。結果在pH 6.0、6.5時,血細胞著染色澤符合ICSH質量標准,尤以pH 6.0時染色效果最佳,且乙酸鹽緩沖液優於混合磷酸鹽緩沖液。結論血細胞塗片以pH 6.0～6.5的乙酸鹽緩沖液稀釋的瑞氏染液染色效果優良。

F. 瑞士吉姆薩染色的染液配製及染色方法

太高難了

G. 瑞士染色中甲醇的作用是

．用 甲醇作瑞氏 染料溶劑，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶劑，有兩種作用：
（ 1 ）甲醇使瑞氏染料中美藍（ M ）與伊紅（ E ）在溶液中離解，可使細胞成分選擇性吸附其中的有色物質而著色。
甲 醇
ME （瑞氏染料）—— —— → M + + E -
在配製的瑞氏染液中美藍如放置過久即可氧化而含有天青，美藍天青與伊紅化合物能使核染成紫紅色，但不能使胞漿染為藍色，多餘 美藍就可以 使胞漿染成藍色，染色主要是化學作用，是離子彼此結合的反應。
（ 2 ）甲醇具有強大的脫水力，可將細胞固定在一定形態及增加細胞結構的表面積，提高細胞對染料吸收作用，同時由於甲醇吸附染色液中的水，使染色液升溫，加速染色反應。

H. 瑞氏染色血塗片的步驟

靜脈采血後使用玻璃棒、毛細管、注射針頭等在距載玻片一端1cm處加1滴抗凝血，左手平執載玻片，或放在類似桌子等平坦地方，右手持推片從前方接近血滴，使血液沿推片邊緣展開成適當的寬度，立即將推片與載玻片呈30~45°角，輕壓推片邊緣將血液推製成厚薄適宜的血塗片。

染色用特種玻璃鉛筆在血膜兩側畫兩條線，防止染液外溢。再將瑞氏染液滴在血膜上，至染液淹沒全部血膜，染1分鍾。加等量蒸餾水(或緩沖液)與染液混合再染5分鍾。最後用蒸餾水把染液沖掉，用吸水紙吸干，自然乾燥後即可觀察。

(8)瑞士氏染液怎麼配置擴展閱讀：

注意事項：

1、血塗片干透後固定，否則細胞在染色過程中容易脫落。

2、沖洗時應以流水沖洗，不能先倒掉染液，防染料沉著在血塗片上。沖洗時間不能過久，以防脫色。如血塗片上有染料顆粒沉積，可滴加甲醇，然後立即用流水沖洗。

3、染色過淡可以復染，復染時應先加緩沖液，然後加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡，也可用甲醇脫色。

4、瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇（AR級以上）和甘油組成，Ⅱ液為磷酸鹽緩沖液（pH6.4～pH6.8）。

I. 血細胞染色常用的瑞氏染色法的原理主要講一下瑞氏染液。

瑞氏染色法：用瑞氏染色液對細菌進行染色以便進行顯微鏡檢查的染色法

原理
甲醇具強大脫水力，可將細胞固定在一定形態及增加細胞結構表面積，提高細胞對染料吸收作用
同時吸附染色液中的水，使染色液升溫，加速反應