丙烯醯胺如何配置
❶ 1mg/ml丙烯醯胺標准溶液配製為什麼避光低溫保存
SDS-PAGE中 30%的聚丙烯醯胺溶液是需要避光保存的，因為N,N-亞甲基雙丙烯醯胺對光敏感。
遇高溫或強光則自交聯。
另外TEMED也是需要避光保存的，過硫酸銨溶液需要低溫保存。
❷ 你知道變性聚丙烯醯胺凝膠電泳的那個膠是怎麼配置的需要哪些必備葯品還有用水平電泳可以嗎
我把我們實驗室的實驗講義發給你，供你參考。
你做的應該是蛋白質的電泳吧，只能用垂直電泳。水平電泳用於分離DNA或RNA。
實驗十一 SDS-PAGE檢測表達蛋白
1．目的
學習SDS-PAGE的基本操作，學會用SDS-PAGE檢測蛋白。
2．原理
蛋白質在加熱變性以後與SDS結合，帶上負電荷，在電場的作用下，向正極移動，結果按分子量大小排列在膠板上，含量多的蛋白帶紋粗。
3．器材
旋渦混合器，微量移液取樣器，移液器吸頭，1.5ml 微量離心管，雙面離心管架，台式冷凍離心機，製冰機，超聲波破碎儀，電磁爐，電泳儀，垂直電泳槽及配套的玻璃和密封條、梳子等，搖菌試管，三角燒瓶，接種環，飯盒。
4．試劑
SDS（十二烷基磺酸鈉），Acr（丙烯醯胺），Bis（N,N』-亞甲基雙丙烯醯胺），Tris（三羥甲基氨基甲烷），甘氨酸，鹽酸，Aps（過硫酸氨），TEMED（四甲基乙二胺），蛋白分子量標准（97.4，66.2，43，31，20.1，14.4 kDa），溴酚藍，甘油，冰醋酸，乙醇，b-2-巰基乙醇，考馬斯亮藍R250，甲醇，乙醇。
5．實驗准備
1.0mol/L Tris HCl，pH8.8（4°C保存）；0.5mol/L Tris HCl，pH6.8（4°C保存）；10%SDS（室溫保存）；30%Acr/Bis（30g Acr+0.8g Bis dd water 定容至100mL，4°C保存）；10%Aps （-20°C保存）；2´上樣緩沖液（0.5mol/L Tris HCl，pH6.8 2mL，甘油2mL，20%SDS 2mL，0.1%溴酚藍 0.5mL，b-2-巰基乙醇 1.0mL，dd water 2.5mL，室溫存放）；5´電泳緩沖液（Tris 7.5g ，甘氨酸36g，SDS 2.5g，加dd water至500mL，使用時稀釋五倍）；考馬斯亮藍染色液（考馬斯亮藍R250 0.25g + 45ml甲醇+10mL冰醋酸，用dd water定容至100mL）；脫色液（95%乙醇：冰醋酸：水= 4.5：0.5：5，體積比）；
6．操作步驟
（1） 將表達後的菌體與2´上樣緩沖液按1：1混勻於微量離心管中。
（2） 用超聲波破碎儀脈沖10次，每次10秒。中間間隔時放入冰中降溫。注意一定要將超聲波探頭插入容液底部，在溶液表面或上部時容易起泡！
（3） 將上述微量離心管插入水漂中，放在電磁爐鍋里的沸水中煮3~5min。然後立即插入冰中。（可在-20°C冰櫃中保存）。
（4） 組裝電泳玻璃並用細橡膠管密封底部和側面然後用夾子夾住（觀察教師的演示）。插入梳子後在玻璃上距離梳子齒底部1cm的地方做一個標記。
（5） 配製10%分離膠。按順序和量取下列溶液混在一個50mL的小燒杯中（注意Tris為 pH8.8）：
Acrylamide-bis 3.96 mL
1M Tris PH8.8 4.38 mL
d.d Water 3.432 mL
10% SDS 118.8 mL
TEMED 9.9 mL
10%APS 118.8 mL
（6） 加完APS後拿起燒杯輕輕轉動幾下底部將溶液混勻後，立刻緩緩倒入玻璃夾縫中，直到液面與所作的標記齊平。剩下的膠液留在小燒杯中，傾斜放置。然後在上部用1000ml微量移液器輕輕地沿玻璃壁來回移動加滿dd water（盡可能不破壞下面的膠液）。然後靜置30min。直到燒杯中剩餘的溶液凝固。倒出蒸餾水，並倒置玻璃盡可能將水倒盡。
（7） 配支持膠。按順序和量（注意體積單位！）取下列溶液混在一個50mL的小燒杯中（注意Tris為 pH6.8）：
Acrylamide-bis 0.675 mL
0.5M Tris pH6.8 0.563 mL
dd water 3.165 mL
10% SDS 45 mL
TEMED 7.5 mL
10% APS 45 mL
（8） 加完APS後拿起燒杯輕輕轉動幾下底部將溶液混勻後，立刻倒入玻璃夾縫中，液面與玻璃上邊緣齊平。然後再慢慢插入梳子，靜置約20min。燒杯中剩下的溶液傾斜放置直到溶液凝固。（此狀態可以用塑料薄膜包起來放入冰箱過夜）。
（9） 小心拔出梳子以後，用注射器針頭（剪平尖部）吸取梳子齒形成的加樣槽中的水，並修平加樣槽底部的膠面。
（10） 選取幾個形態好的加樣槽，在一張紙上做好對應的標記，用微量移液器在側面的一個加樣槽中加入20mL 蛋白分子量，其它槽中加入10～20mL自己製作的樣品。
（11） 加完樣品後，再用微量移液器吸取電泳緩沖液小心把加樣槽液面都補平。電泳槽上部倒滿電泳緩沖液（約250ml,淹沒過加樣槽的液面！），電泳槽的下部倒入一半電泳緩沖液（約180ml）。
（12） 接好電極，將電流調至10mA，待溴酚藍移到分離膠後，在將電流調至18mA，電泳約2~3h，期間隨時觀察電泳槽上部的液體是否有泄漏（泄漏導致液面下降，電流中斷）！當溴酚藍移到玻璃距底部0.5cm時切斷電源。
（13） 在一個搪瓷盤里准備適量的考馬斯亮藍染色液。
（14） 倒掉電泳槽中的緩沖液，取下玻璃，小心用鏟子從下部將帶有缺口的玻璃板撬起（切不可損壞膠！）。用鏟子切去上部的支持膠，並把分離膠從玻璃上剝離倒染液搪瓷盤里（切不可損壞膠！）。
（15） 染色2h後，在將染液倒回瓶子里以備重復使用。在飯盒裡倒入脫色液，過夜。
（16） 觀察脫色後膠里的藍色帶紋，與對照比較或尋找異常粗的帶紋，並比較其分子量，判斷是否是預期的基因產物。
（17） 清理桌面，寫實驗報告。
❸ SDS-PAGE凝膠制實驗及其各實驗試劑的配製方法
SDS-PAGE凝膠制備屬於實驗室最常規的操作了，剛開始做蛋白實驗總是在找凝膠配製實驗中所用試劑的配方，這里總結了分離膠、濃縮膠、分離膠和濃縮膠緩沖液、考馬斯亮藍染液、樣品緩沖液、電泳緩沖液等配方。
1.
分離膠(12%)
配製
所需試劑
所需體積
分離膠(12％)
30％丙烯醯胺
6.0
ml
1.5
mol/l
Tris-HCl
3.8
ml
10%SDS
150
μl
10%過硫酸銨
150
μl
TEMED
6
μl
蒸餾水
4.9
ml
2.
濃縮膠(5%)
配製
所需試劑
所需體積
濃縮膠(5％)
30％丙烯醯胺
1.3
ml
1.5
mol/l
Tris-HCl
1.0
ml
10%SDS
80
μl
10%過硫酸銨
80
μl
TEMED
8
μl
蒸餾水
5.5
ml
3.
分離膠緩沖液(pH8.9)
配製
所需試劑
所需體積
分離膠緩沖液
Tris
36.6
g
1
mol/l
HCl
48
ml
蒸餾水
補足至100
ml
4.
濃縮膠緩沖液(pH6.7)
配製
所需試劑
所需體積
濃縮膠緩沖液（pH6.7）
Tris
5.98
g
1
mol/l
HCl
48
ml
蒸餾水
補足至100
ml
5.
30%丙烯醯胺(pH≤7.0)
配製
所需試劑
所需體積
30%丙烯醯胺（pH≤7.0）
丙烯醯胺
29
g
甲叉-雙丙烯醯胺
1
g
蒸餾水
補足至100
ml
6.
10%過硫酸銨(W/V)：1g過硫酸銨溶於10ml水中，4℃保存數周，盡量現用現配。
7.
10%SDS：將10
g
SDS溶於80ml重蒸水中並輕緩攪拌(室溫低時需水浴加熱溶解)，再定容至100ml，室溫存放。
8.
樣品緩沖液
配製
所需試劑
所需體積
樣品緩沖液
1
M
Tris-HCl（pH6.7）
5
ml
SDS
2.5
g
巰基乙醇
1
ml
溴酚蘭
0.05
g
蔗糖
10
g
蒸餾水
補足至100ml
9.
考馬斯亮藍染色液：0.25g考馬斯亮藍R-250用少量甲醇溶解後，用甲醇(40ml)-乙酸(10ml)水溶液稀釋至100ml。
10.
Tris-甘氨酸電泳緩沖液(pH8.3)
配製
所需試劑
所需體積
Tris-甘氨酸
電泳緩沖液（pH8.3）
Tris鹼
15.1
g
甘氨酸
94
g
10％（W/V）SDS
50
ml
去離子水
補足至100
ml
凝膠配製所需試劑的母液不能放置太久，有條件的實驗室可將母液保存在4度冰箱中，放置母液被微生物污染或者出現沉澱。
❹ 跪求聚丙烯醯胺的生產工藝
聚丙烯醯胺生產工藝有三種：水溶液聚合法、反相乳液聚合法和輻射引發法。
最推薦的一種：水溶液聚合法
是生產聚丙烯醯胺的傳統方法。採用該法可以生產聚丙烯醯胺膠體和粉狀產品。一般聚丙烯醯胺膠體是採用8%-10%丙烯醯胺水溶液在引發劑作用下直接聚合而得；聚丙烯醯胺乾粉則多用25%-30%丙烯醯胺溶液進行聚合，聚合後得到的聚丙烯醯胺膠體經造粒、捏合、乾燥、粉碎後製得產品。其中的聚合反應是關鍵工序。該法具有生產安全、工藝設備簡單以及生產成本較低等特點，是目前國內外生產聚丙烯醯胺普遍採用的方法。中國採用該法生產聚丙烯醯胺最早採用手工作坊式的盤式聚合，後來採用捏合機。20世界80年代後期開發了錐形釜聚合工藝，由核工業部五部所在江都化工廠試車成功。20世紀90年代從國外引進的聚合技術，類似於國內的技術，只是反應釜可以旋轉，聚合釜的容積也較大。
推薦理由：
是生產聚丙烯醯胺的傳統方法。
採用該法可以生產聚丙烯醯胺膠體和粉狀產品。
❺ 建築用107膠水的製作與配置比列
107[丙烯醯胺晶體]建築膠水新配方
本配方為生產一噸建築膠水所需產品：
聚乙烯醇：10---12公斤
丙烯醯胺晶體：10--12公斤
過硫酸胺：20--25克
亞硫酸氫鈉：20--25克
羧甲基纖維素[絮狀]：4公斤
一：生產工藝在反應釜中加水150公斤，升溫達到55度加入聚乙烯醇：10---12公斤，
繼續升溫到98度直至聚乙烯醇完全溶解。
二：加水200公斤降溫至70度加入凱源丙烯醯胺晶體10--12公斤，攪拌直至溶解，溫度至
68--70度時，停止加溫，慢慢的邊攪拌邊加入引發劑過硫酸胺20--25克[20-25克引發劑
先用1000毫升水在其他容器內溶解]。
攪拌2分鍾，加入穩定劑亞硫酸氫鈉20-25克[20-25克穩定劑先用1000毫升水在其他容器內溶解]，
繼續攪拌3分鍾後停止攪拌，靜態聚合時間不低於3小時，即得特稠膠體。
三：最後可以根據當地對建築膠水要求在特稠膠體中加入提前一天用50公斤水溶解的4公斤羧甲基纖維素[絮狀]溶液，
充分攪拌，使膠水總量達到1000公斤或更多。
注意事項：
1：丙烯醯胺晶體用凱源牌丙烯醯胺晶體。
2：過硫酸胺20--25克和亞硫酸氫鈉20-25克在不同容器內用1000毫升水化開待用。
3：本膠水質量好，長時間保存不分水，批刮施工性能好，可調兌各種膩子。
4：成熟配方，可直接生產，各廠家可結合自己的配方生產。
5：過硫酸胺用量越多，反應速度越快，反應溫度越高，但過硫酸胺的用量應該控
制在配方的范圍之內。
6：如果需要加大生產量，溫度不變，各種產品擴大一倍為二噸膠水配方。
7：可根據當地膠水要求加或不加羧甲基纖維素。
❻ 聚丙烯醯胺是如何製造的
聚丙烯醯胺是採用丙烯醯胺（acrylamide)為單體，通過過氧化苯甲醯（BPO)引發聚合而成的。
1.聚丙烯醯胺是採用丙烯醯胺（acrylamide)為單體，通過過氧化苯甲醯（BPO)引發聚合而成的。操作過程如下（或者你可查找有關高分子化學的書籍）：在三頸瓶中，將丙烯醯胺溶解在蒸餾水中（10%濃度），開始向體系通入氮氣，30分鍾後，加入一定量的BPO（BPO的投加量視你想得到多大分子量的聚丙烯醯胺而定，BPO加得越多，聚丙烯醯胺分子量就越小），裝上迴流冷凝管、攪拌裝置，開始攪拌，並在同時水浴加熱至50℃左右，反應開始，反應中應持續通氮氣。隨著反應進行，體系粘度增加。1小時後，反應停止。
2.將反應物倒於燒杯中，向燒杯中緩緩加入無水乙醇或丙酮，並不斷攪拌，這是聚丙烯醯胺開始析出，當不再有白色固體析出時，將所得的白色固體於紅外燈下烘乾，研磨至粉末裝即得聚丙烯醯胺。所得的聚丙烯醯胺通過測定粘度可以得出分子量（一般分子量500萬左右）；使用BPO前，應用丙酮進行重結晶提純後置於乾燥器中陰冷處保存，否則聚合反應很難開始。
❼ SDS膠濃度怎麼計算,比如怎麼配置10％，12％，16％的分離膠，丙烯醯胺的量怎麼確定，各個含量咋確定
按的是你丙烯醯胺和雙丙烯醯胺的總質量
與
膠總體積
的質量體積比（m/V）
首先你要將上述葯品粉末按照19:1或29:1的比例用水配置成母液（一般為30%，也是m/V）
而10%，12%，16%你自然也就知道應該用多少的母液去配製了。相信如何配膠你是知道的。
❽ 聚丙烯醯胺如何復配
摻點無機鹽混合均勻可以復配聚丙烯醯胺。
聚丙烯醯胺分類聚丙烯醯胺產品簡介：聚丙烯醯胺（PAM）為水溶性高分子聚合物，不溶於大多數有機溶劑，具有良好的絮凝性，可以降低液體之間的摩擦阻力，按離子特性分可分為非離子、陰離子、陽離子和兩性型四種類型。（註：聚丙烯醯胺不同於丙烯醯胺）
❾ 非變性聚丙烯醯胺凝膠電泳的實驗步驟
1、PAGE膠電泳緩沖液配置
1）丙烯醯胺單體貯液：14.55g丙烯醯胺加上0.45g N，N'-甲叉雙丙烯醯胺，先用40mL雙蒸水攪拌溶解，直到溶液變成透明，再用雙蒸水稀至50mL，過濾。用棕色瓶4°C保存備用。
2)濃縮膠緩沖液貯液(0.5mol/L Tris-HCl，pH6.8)：3.03gTris溶解在40mL雙蒸水中，用4mol/L鹽酸調pH6.8。再用雙蒸水稀至50mL。保存在4°C備用。
3)分離膠緩沖液貯液(1.5mol/L Tris-HCl，pH8.9)：18.16gTris溶解在80mL雙蒸水中，用4mol/L鹽酸調pH8.9。再用雙蒸水稀至100mL，保存在4°C備用。
4)10%（AP）過硫酸銨：0.1g過硫酸銨溶入1.0mL雙蒸水，使用前新鮮配製。
5)電極緩沖液(0.025mol/L Tris，0.2mol/L甘氨酸，pH8.3)：15.14gTris加上72.07g甘氨酸，用雙蒸水稀釋到5L。可在室溫保存一個月。
6）樣品緩沖液（0.1mol/L Tris-HCl，pH6.8）：2ml濃縮膠緩沖液貯液加上1mL87%甘油、0.1mg溴酚藍，用雙蒸水稀釋至10mL，可在-20°C保存6個月。
2、Native-PAGE配方 分離膠： 雙蒸水 6.6ml 30%丙烯醯胺溶液 8.0ml 1.5mol/L Tris(pH8.8) 5.0ml 10%過硫酸銨溶液 (W/V) 200μl TEMED 15μl 濃縮膠： 雙蒸水 6.8ml 30%丙烯醯胺溶液 1.7ml 0.5 mol/ LTris(pH6.8) 1.25ml 10%過硫酸銨溶液 (W/V) 100μl TEMED 10μl 3、Native-PAGE電泳
將玻璃板、膠墊、梳子用雙蒸水洗干凈，用酒精棉球擦拭，將電泳槽安裝好，配製分離膠(12%)和濃縮膠(5%)如表1。過硫酸銨和TEMED最後加入，加入後聚合即開始，應立即混勻倒入兩塊玻璃板之間。分離膠倒入兩塊玻璃板間，應該留下適合的高度，使點樣孔前端離分離膠有2.5cm左右的距離，在膠頂部緩緩加入約0.5cm高的雙蒸水，待分離膠聚合完全後，傾去上層的雙蒸水，用雙蒸水清洗凝膠頂層，用吸水紙吸去殘余的水滴。將濃縮膠倒入玻璃板夾層，插上梳子，待濃縮膠聚合完全後，拔去梳子，立即用雙蒸水清洗點樣孔。加入電極緩沖液，將樣品用微量進樣器點入點樣孔底部，200伏電泳。當溴酚藍到達分離膠時，電壓改為250伏，繼續電泳至溴酚藍到達凝膠底部。將凝膠剝下，浸泡在100ml的底物液中，染色1小時，待膠帶顯色後立即照相。然後將凝膠進行常規的考馬斯亮藍染色。
❿ 0.5mmol/L丙烯醯胺怎麼配置
35.5mg丙烯醯胺加入到1L容量瓶內，加水至刻度線，搖勻即可。